吴斌
- 作品数：26 被引量：46H指数：5
- 供职机构：中国林业科学研究院亚热带林业研究所更多>>
- 发文基金：引进国际先进林业科学技术项目国家农业科技成果转化资金项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 杜鹃红山茶CaCPI基因的克隆及过量表达提高烟草植株的抗虫性被引量：5
- 2015年
- 绝大多数观赏山茶花属于设施栽培植物,因环境湿热易造成病虫害出现,导致观赏价值降低,影响种植效益。为了提高抗虫性,根据山茶同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3＇,5＇-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Cysteine proteinase inhibitor,CPI）基因,命名为CaCPI,基因全长579 bp,开放阅读框306 bp,编码101个氨基酸,分子量为11.078 kDa,等电点p I=6.72。利用实时荧光定量PCR方法对杜鹃红山茶根、茎、叶中该基因的表达特性进行分析,结果表明,CaCPI基因在叶中的表达量较高,其次为茎,在根中表达量较低,比较显示叶的表达量分别约为茎的1.53倍,根的1.61倍。转基因烟草分析表明,过量表达CaCPI基因后,转基因烟草中目的基因表达量提高了55.84-174.83倍,并且转基因植株抗蚜虫能力获得提高,接虫5 d后植株上的蚜虫绝大多数死亡,累积死亡率约为90.75%,高达野生型的5.14倍。
- 王江英范正琪殷恒福吴斌刘伟鑫李纪元
- 关键词：杜鹃红山茶基因克隆虫害转基因烟草
- 木糖筛选系统对杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的影响被引量：3
- 2015年
- 在农杆菌介导的遗传转化过程中，抗生素不同程度地抑制山茶转化体的生长与分化。以木糖异构酶基因xylA为筛选标记，试图建立杜鹃红山茶（Camellia azalea）遗传体系过程中的非抗生索筛选系统。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因，并用其替换经改造的植物表达载体pCAMBIA1300中的hptⅡ基因，获得植物表达载体pCAMBIA1300-xrlA并导入根癌农杆菌EHA105中，经农杆菌介导转化烟草结果表明，xylA标记基因可以替代卡那霉素应用于烟草转化体中，且效果更优。以杜鹃红山茶带柄叶片、茎段、子叶为外植体诱导的愈伤组织，生长状态均表现良好．愈伤组织启动诱导的所需天数比对照组提前约10d，生长量为对照组的1．5～2．5倍。可以认为25g/L的木糖浓度是适合杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的筛选浓度。
- 王江英吴斌范正琪李纪元
- 关键词：杜鹃红山茶愈伤组织
- 芳香型山茶芳香基因挖掘及快繁关键技术研究
- 范正琪李纪元李辛雷殷恒福林长春孙迎坤吴斌肖政
- “芳香型山茶芳香基因挖掘及快繁关键技术研究”(2010C32038)属浙江省科技计划公益技术研究农业项目，2010年7月批准立项，2012年12月结题。该项目由中国林科院亚热带林业研究所独立提出申请并承担，在执行过程中，...
- 关键词：
- 关键词：山茶品种繁殖
- 杜鹃红山茶CaAPX基因的克隆、表达及功能分析被引量：2
- 2016年
- [目的]利用分子生物学技术探讨杜鹃红山茶CaAPX基因的表达模式及在模式植物烟草中所起的抗寒、耐热作用,为今后山茶花抗逆育种奠定基础。[方法]根据山茶花同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3’,5’-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出抗坏血酸过氧化物酶(APX),命名为CaAPX,基因全长1 097 bp,开放阅读框753 bp,编码250个氨基酸。实时荧光定量PCR对杜鹃红山茶7种组织和温度胁迫下该基因的表达模式进行分析。[结果]表明:CaAPX基因在杜鹃红山茶7种组织中均得到表达,但表达水平不一,表达量由高到低依次为:未成熟果实>嫩叶>花苞>叶芽>种胚>花瓣>花芽,其中,未成熟果实中的表达量是其它组织的2.6811.44倍;温度胁迫处理8 h后该基因呈上调表达,CaAPX基因表达量分别是0 h的3.49和2.67倍。CaAPX基因转化烟草分析表明,过量表达CaAPX基因后,APX活性提高了2.58 4.09倍,抗坏血酸(As A)含量提高了2.673.56倍,并且转基因烟草植株的抗寒、耐热能力也获得提高。[结论]通过过量表达CaAPX基因能够提高烟草植株的抗寒、耐热性,为山茶花抗逆育种提供了科学依据。
- 王江英范正琪殷恒福李辛雷吴斌李纪元
- 关键词：杜鹃红山茶基因克隆温度胁迫转基因烟草
- 茶花红叶芽变品种‘金华美女’叶色突变相关主要化学成分含量变化被引量：9
- 2017年
- ‘金华美女’是从‘贝拉大玫瑰’中选育出的茶花芽变品种,其主要特点是叶色呈现暗红色。分别测定了上述两个品种在4个不同发育阶段叶片叶绿素、类胡萝卜素、总花青苷、矢车菊素葡萄糖苷、总多酚、儿茶素和表儿茶素含量。结果表明:(1)在相同阶段,两个品种间叶绿素a和叶绿素b差异均不显著。认为红叶品种的叶绿素合成途径也正常,排除因叶绿素变异引起的叶色变异;(2)红叶品种‘金华美女’叶片中的类胡萝素含量显著低于绿叶品种‘贝拉大玫瑰’,可见其积累对‘金华美女’的叶色无影响;(3)在4个时期中,‘金华美女’叶片总多酚、儿茶素和表儿茶素的平均含量仅占‘贝拉大玫瑰’叶片中的相应含量的33.1%、42%和15%,可见变色品种叶片的多酚合成途径可能受到一定程度的阻碍。(4)‘金华美女’叶片中总花青苷平均含量达3.06 mg·g^(-1),是‘贝拉大玫瑰’的7倍。由此可见,叶片花青苷合成途径中红色类组分的积累和多酚合成途径中无色类组分的合成受阻,是引起‘金华美女’叶色变红的主要成因。
- 应震张晶殷恒福范正琪倪穗吴斌李纪元
- 关键词：茶花芽变红叶花青苷
- 耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法
- 耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法，属于生物技术领域。其特征在于包括以下步骤：采集9月初的耐冬山茶果实，消毒、清洗；剥去种子的内外种皮，接种于愈伤诱导培养基；第25-28天将材料转移至愈伤组织过渡培养基上；待愈伤组织由淡黄色...
- 李纪元范正琪李辛雷殷恒福吴斌
- 杜鹃红山茶叶片愈伤组织再生体系的建立方法
- 杜鹃红山茶叶片愈伤组织再生体系的建立方法，属于生物技术领域。其包括以下步骤：1）杜鹃红山茶无菌苗的获得；2） 叶片的愈伤组织诱导与继代；3）愈伤组织不定芽的分化及植株再生；4）再生植株的生根及驯化移栽。本发明利用杜鹃红山...
- 李纪元吴斌范正琪李辛雷殷恒福王江英应震
- 山茶‘耐冬’愈伤组织诱导与植株再生的研究
- ‘耐冬’为常绿阔叶灌木或小乔木，山茶科山茶属植物，主要分布于青岛崂山及长门岩等岛屿，为我国山茶自然分布的最北端。‘耐冬’四季常青，花色艳丽，花型优美，花期持久，傲雪凌霜，其种苗目前仍以传统的籽播、扦插、嫁接等方式繁殖为主...
- 吴斌
- 关键词：山茶愈伤组织不定芽分化植株再生移栽方法
- 文献传递
- 杜鹃红山茶叶片愈伤组织再生体系的建立方法
- 杜鹃红山茶叶片愈伤组织再生体系的建立方法，属于生物技术领域。其包括以下步骤：1）杜鹃红山茶无菌苗的获得；2） 叶片的愈伤组织诱导与继代；3）愈伤组织不定芽的分化及植株再生；4）再生植株的生根及驯化移栽。本发明利用杜鹃红山...
- 李纪元吴斌范正琪李辛雷殷恒福王江英应震
- 文献传递
- 霸王抗旱性分子机理及相关基因克隆研究
- 干旱是主要的环境胁迫因子之一，它严重影响着植物生长及作物产量。在干旱条件下，许多基因参与了植物对干旱胁迫的响应，然而，目前只有为数不多的基因的详尽功能得到阐明，并且这方面的大部分工作是在一年生草本模式植物如拟南芥、烟草及...
- 吴斌
- 关键词：霸王抗旱基因抗旱机理锌指蛋白基因
- 文献传递
