叶菊连
- 作品数:14 被引量:43H指数:4
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- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金杭州市科技发展计划项目杭州市卫生科技计划项目更多>>
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- 4种用于产毒型艰难梭菌核酸检测的粪便基因组提取试剂的性能评价被引量:1
- 2019年
- 目的对4种粪便基因组提取试剂进行比较,评价适用于艰难梭菌临床诊断的试剂盒。方法随机选取100份临床腹泻样本,分别采用QIAGEN、天根、美宁康诚和新百基4种试剂提取粪便DNA,采用本实验室研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测。结果4种提取试剂的特异度均较好(>95%),敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。而QIAGEN试剂盒的最低检测限(10^3 cfu/ml)高于其他3种试剂盒。4种试剂盒的变异系数均<5%。美宁康诚试剂盒同时操作10份标本的平均用时(30 min)远少于其他3种(F=483.18,P<0.01)。结论4种提取试剂盒均能用于艰难梭菌分子诊断的样本前处理。但美宁康诚试剂盒提取操作时间短,敏感度和特异度均符合检测要求,结果准确,较适合待检艰难梭菌的临床粪便标本的前处理。
- 杨筠叶菊连罗芸宋小军吴俊金大智
- 关键词:艰难梭菌
- 副溶血性弧交叉菌污染引起的食物中毒73例分析
- 2003年
- 2001年8月29日晚遂昌县城某酒店,165人参加的乔迁宴会发生73人食物中毒事件,经流行病学调查及实验室检验,证实为一起副溶血性弧菌引起的食物中毒,现报道如下:
- 叶菊连林仁卫
- 关键词:污染食物中毒流行病学
- 两种产毒型艰难梭菌分子诊断方法的临床应用评价被引量:1
- 2018年
- 目的通过与Xpert C.difficile/Epi检测临床粪便样本中艰难梭菌毒素基因方法的对比,系统评价实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法的性能。方法2016年8月1日至12月30日采集杭州市余杭区第一人民医院和宁波市鄞州人民医院临床腹泻患者粪便样本176份,平行采用Xpert C.difficile/Epi和实验室研发的检测方法进行检测,同时进行艰难梭菌分离培养和PCR毒素鉴定。采用SPSS 20.0软件对检测结果进行交叉表分析。结果以Xpert C.difficile/Epi检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为91.7%(22/24)、特异度为100%(152/152)、阳性预测值为100%(22/22)、阴性预测值为98.7%(152/154),两种方法检测结果的一致性好(Kappa=0.950,P〈0.001)。以厌氧分离培养和PCR毒素检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为90.0%(18/20)、特异度为97.0%(152/156)、阳性预测值为81.8%(18/22)、阴性预测值为98.7%(152/154)(Kappa=0.838,P〈0.001);Xpert C.difficile/Epi的敏感度为90.0%(18/20)、特异度为96.0%(150/156)、阳性预测值为75.0%(18/24)、阴性预测值为98.7%(150/152)(Kappa=0.792,P〈0.001)。结论实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法与Xpert C.difficile/Epi检测性能基本一致,可直接用于临床腹泻标本中产毒型艰难梭菌检测。该方法的临床应用为国内临床艰难梭菌感染病例的诊断提供一种国产化的检测方法。
- 庄国华宋小军许星星罗芸黄忱叶菊连蔡剑王丽倩许向军王贤军汪一萍金大智
- 关键词:艰难梭菌分子诊断
- 一种用于艰难梭菌分离培养的新型显色培养基的性能评价被引量:5
- 2019年
- 目的评价自主研发的艰难梭菌显色培养基(CDCA)性能。方法选用艰难梭菌及其他细菌的标准株进行CDCA显色的特异性评价;将艰难梭菌标准菌株梯度稀释后测定BD公司CDSA、生物梅里埃公司CDIF和CDCA的灵敏度。收集临床120份粪便样本分别采用3种培养基进行艰难梭菌分离培养,并对生长菌落进行质谱鉴定和tpi基因检测,以3种平板中任1种能培养出艰难梭菌的样本定义为真阳性。结果在CDCA平板上除了梭形梭菌、双酶梭菌、第三梭菌、脆弱拟杆菌等菌种能够少量生长并显色外,对其他实验菌种均有抑制作用。CDSA、CDIF和CDCA检测艰难梭菌的灵敏度分别为2.0×10~5 CFU/mL、8.0×10~1 CFU/mL和4.0×10~2 CFU/mL。120份标本中检出艰难梭菌31份(25.8%),CDSA、CDIF和CDCA培养阳性标本分别为25份(20.8%)、28份(23.3%)和26份(21.7%),3种显色培养基对临床腹泻标本检测阳性率差异无统计学意义(χ~2=0.418,P=0.811)。3种显色培养基的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为:CDCA 83.8%、100%、100%、94.7%;CDIF 90.3%、98.9%、96.6%、96.7%;CDSA 80.6%、100%、100%、93.7%。结论本实验室研发的CDCA的特异性和灵敏度较高,可用于临床艰难梭菌的初步分离。
- 边俏罗芸许星星宋小军叶菊连蒋健敏金大智
- 关键词:艰难梭菌显色培养基性能评价
- 人感染猪链球菌II型毒力因子研究
- 杨婷婷朱水荣程苏云王复甦徐宝祥占利罗芸叶菊连
- 简要技术说明:通过人SS2分离株进行分子、细胞、动物等不同水平的生物学实验,分析人SS2分离株毒力作用,进行相关毒力因子研究与鉴定,对SS2某些毒力基因组信息未知的状况进行补充和分析,寻找新的可能毒力因子和基因;最后建立...
- 关键词:
- 关键词:人感染猪链球菌病血清流行病学调查基因诊断
- PCR快速检测甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原H-a研究被引量:2
- 2005年
- 目的 研究快速、特异、灵敏的检测甲型副伤寒沙门菌鞭毛特异相H a的PCR法。方法 选择甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原H a基因的特异引物进行PCR扩增 ,检测甲型副伤寒沙门菌标准菌株和我省不同地区上送的 5 7株甲型副伤寒沙门菌以及非甲型副伤寒沙门菌的其它菌株 ;将甲型副伤寒沙门菌标准菌株按10 - 1 ~ 10 - 9稀释后扩增比较PCR的检测灵敏度。结果 所有甲型副伤寒沙门菌均在 3 2 9bp处出现甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原基因产物 ,非甲型副伤寒沙门菌株PCR结果均为阴性 ;PCR检测下限为 10 3cfu/ml。结论 PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏、简便 ,为临床诊断、实验室筛查以及流行病学快速查源、溯源提供了新的手段。
- 朱水荣陈恩富张政楮佩英孟真叶菊连罗芸
- 关键词:甲型副伤寒沙门菌
- 浙江省首起因志贺4C引起的暴发疫情检测结果分析被引量:4
- 2005年
- 目的了解本次海宁市尖山围垦开发区发牛的一起疫情的暴发流行情况以及引起该疫情的病因。方法采用现场流行病学方法对疫情调查分析,按照GB47891994分离常见病原菌,采用玻片凝集试验进行血清学分型,采用VITEK32全自动生化鉴定仪对分离菌株进行生化鉴定,采用PCR方法检测侵袭性毒力基因,采用改良K-B纸片法检测药物敏感性。结果现场流行病学调查发现本次疫情与新建开发区内自来水以及厕所等基础卫生设施建设滞后有关;经实验室检测从59例患者粪便中分离出9株志贺4C菌株,检出率为15.25%,所有菌株均携带有侵袭性毒力基因且对药物的敏感性及耐药性均相同。结论本次疫情系因志贺4C菌引起的一起痢疾暴发疫情,在浙江省省尚属首次报道。今后在治疗该菌株引起的痢疾病人时,宜用CF、AKN、FPA、CIPX这类药物。
- 朱水荣陈恩富顾孝嵋莫顺堂叶菊连
- 杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染及菌株分子特征分析被引量:6
- 2019年
- 目的了解浙江省杭州市富阳地区住院腹泻患者艰难梭菌感染情况,研究感染患者临床危险因素及分离菌株的分子特征。方法收集2017年5月至2018年2月就诊于第一人民医院的228例腹泻患者的粪便标本,通过厌氧培养进行艰难梭菌菌株分离和鉴定,进行多位点序列基因分型,以琼脂稀释法测定菌株耐药性,对患者临床资料进行统计分析。结果 228份标本共检测出产毒型艰难梭菌41株,其中31株为医院获得性腹泻;阳性患者平均年龄67.8岁,主要来自消化内科(34.1%)和肾内科(19.5%)。ST2、ST3和ST54为主要基因型。所有菌株对万古霉素、甲硝唑、四环素、哌拉西林敏感。临床资料统计分析显示,>60周岁、患基础性疾病和有抗生素用药史的阳性患者数量远高于阴性患者比例(χ2=4.229、9.022、5.767,P=0.023、0.001、0.009)。结论杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染患者主要来源于院内感染。患有基础性疾病、8周内有抗生素用药史的老年患者为感染的危险因素;在院内感染防控中需进一步加强监测。
- 黄有平金旭华叶菊连罗芸李珺宋小军黄忱金大智
- 关键词:艰难梭菌腹泻分子特征
- 浙江省2003—2004年甲副伤寒菌株质粒图谱分析被引量:4
- 2005年
- 目的:探讨浙江省2003、2004年不同地区分离的甲型副伤寒菌株质粒基因定位及与致病性的关系。方法:利用技术及电泳图谱方法,对浙江省2003、2004年暴发点病人和住院病人分离的部分甲型副伤寒菌株进行质粒图谱分析并做药敏试验。结果:分析发现选择的78株菌株中, 78株( 100% )对红霉素(ETM)耐药, 77株(98. 72% )对利福平(RFP)、链霉素(SM)及头孢拉定(CV)耐药, 76株(97 .44% )对羧苄青霉素(CAR)及磺胺(SD)耐药,64株(82 .05% )对强力霉素(DC)耐药;大多数菌株带有一20kb大小质粒,所有菌株均带有2 2kb大小的质粒。结论:甲型副伤寒菌对ETM、RFP、CAR、CV、SM、SD、DC耐药,并认为具有多重耐药性是浙江省甲型副伤寒发病率持续高发的主要原因。
- 褚佩英朱水荣陈恩富张政叶菊连莫顺堂
- 关键词:质粒图谱分析RFPSD电泳图谱基因定位
- 副溶血性弧菌交叉污染引起的食物中毒被引量:1
- 2004年
- 叶菊连林仁卫
- 关键词:食物中毒副溶血性弧菌交叉污染