史毅
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 荧光标记的溶菌酶基因（Lyz-GFP）对苜蓿不同品种转化和表达的研究
- 苜蓿(Medicago sativa L.)是世界上分布最广的多年生豆科牧草之一，病害严重地威胁着苜蓿生产，病害的发生降低其生产性能，危害家畜健康，降低草品质量，严重时造成苜蓿大量死亡。本研究运用农杆菌介导法，将有荧光标...
- 史毅
- 关键词：苜蓿体细胞胚农杆菌介导转基因植株
- 文献传递
- 缩合单宁合成基因的分离克隆及其在紫花苜蓿中的遗传转化
- 马晖玲陈春艳姜寒玉姚拓曹致中刘强方强恩林栋安惠惠史毅王庭辉
- 紫花苜蓿具有饲用价值好、蛋白质含量高，易栽培、适口性好、适应性强等特点，在全世界广泛栽培。然而，反刍家畜采食新鲜的苜蓿会引起臌胀病而死亡，严重限制了这种优良牧草在畜牧业中的利用与营养潜力的发挥。因此，从红豆草中鉴定和分离...
- 关键词：
- 关键词：紫花苜蓿
- 基于漩涡振荡茎尖生长点转化法的Lyz-GFP双元基因在‘陇东苜蓿’中的转化和表达被引量：1
- 2012年
- 以‘陇东苜蓿’茎尖生长点为受体材料,利用农杆菌介导法并结合漩涡振荡,将双元基因溶菌酶(Lyz)与绿色荧光蛋白(GFP)导入其中,并对转化过程中的干扰因素和适宜条件进行了研究.结果表明:70mg/L的卡那霉素对陇东苜蓿转化植株的生长具有抑制效应;250mg/L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌LBA4404的生长;‘陇东苜蓿’茎尖生长点经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(D600值0.5～0.6)漩涡振荡侵染30min,培养4～5d后,转化材料生长良好,其转化率为24.47%.试验成功获得了含有该双元基因的‘陇东苜蓿’转基因植株,通过荧光检测和PCR扩增分析,转化植株有较强的荧光表达和GFP基因片段.
- 王庭辉马晖玲史毅安惠惠
- 匍匐翦股颖接种立枯丝核菌后基因表达变化的转录组学分析被引量：2
- 2017年
- 【目的】确定匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)接种立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)后基因种类和表达量在转录水平的变化规律,明确草坪草病原菌侵染响应的关键基因。【方法】匍匐翦股颖生长14 d后采用麦粒培养物接种立枯丝核菌,接种3 d后选取感病叶片和未接种叶片提取RNA,进行转录组高通量测序,然后利用生物信息学分析,用Trinity组装匍匐翦股颖转录组,以组装子为参考,以|log2(fold change)|>1,q-value<0.005为阈值选取感病和健康匍匐翦股颖叶片转录组的差异表达基因,并用i TAK软件分析其转录因子家族及表达变化,与植物R基因库进行blast分析R蛋白分类、利用Mapman软件分析生物胁迫信号通路相关基因的表达变化。【结果】高通量测序得到125 253 092条高质量待分析reads。经Trinity从头组装后,得到466 761条转录本。过半数的转录本长度为700 bp以上,组装结果 N50=1 100 bp。使用CD-HIT选择334 212条转录本(所有转录本的71.60%)作为Unigene,平均长度573 bp,N50=791 bp。接种后植物比接种前植物基因有7 937个上调表达,1 570个下调表达。上调基因中296个,下调基因有142个都可被定义为转录因子,分布在58个转录因子家族中,其中锌指蛋白包含转录因子C2H2最多,有54个,C3H次之,为22个。差异基因中451个可定义为植物R蛋白表达基因,可分为33类,其中包含NBS-LRR结构域的抗病蛋白、LRR受体蛋白激酶、ABC-2类型的转运蛋白、U-box结构域蛋白激酶和热激蛋白这5类基因变化最显著。差异基因中大量上调表达基因可富集在病原识别、活性氧消除、信号传导、细胞凋亡、病程相关蛋白等生物胁迫相关基因类别,下调基因显著富集在植物生长发育相关类别和通路。q RT-PCR验证了随机挑选差异基因的表达量变化,均与RNA-seq分析结果一致,其中包括12个C2H2转录因子基因,10个C3H转录因子基因,以及12个R蛋白基因。【结论】病
- 史毅牛奎举马晖玲
- 关键词：匍匐翦股颖立枯丝核菌转录组差异表达基因抗病机制
- 丁二醇诱导匍匐翦股颖抗病、耐热性及其分子应答研究
- 植物根际益生菌(Plant Growth Promoting Rhinoacteria,PGPR)产生的挥发性化合物(Bacteria volatile compound,BVC),可直接或间接影响植物的生长发育。人工合...
- 史毅
- 关键词：匍匐翦股颖丁二醇诱导抗病性内源激素
- 文献传递
- 低温对青海扁茎早熟禾活性氧代谢的影响和相关基因表达分析被引量：9
- 2017年
- 为研究青海扁茎早熟禾(BJ)在低温胁迫下活性氧积累、抗氧化酶防御与逆境相关基因表达的机制,以WY-2(草地早熟禾‘午夜2号')为对照,对这两种材料低温适应(10/5℃)3 d和冷冻胁迫(-10℃)24 h,测定了O_2^(-·)产生速率、H_2O_2含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性及其抗氧化酶相关基因、冷胁迫相关转录因子的相对表达量。结果表明,低温胁迫可引起BJ和WY-2叶片内的O_2^(-·)产生速率、H2O2含量和MDA含量的增加,BJ活性氧的积累程度和MDA含量均低于WY-2;低温胁迫可导致BJ的SOD、APX和GR活性的降低,CAT活性呈先升后降的趋势,但只有APX活性表现为BJ高于WY-2,同时,BJ和WY-2叶片内的Cu/Zn SOD、CAT、APX和GR基因的表达量在低温胁迫后被明显的上调,且BJ抗氧化酶相关基因的相对表达量普遍高于WY-2;BJ叶片内的DREB2是下调表达的,ERF、DREB1、CSP和HSP基因在低温胁迫后均表现出明显的上调表达,且ERF、CSP和HSP的相对表达量高于WY-2。从而得出结论,扁茎早熟禾在低温胁迫时有害物质的积累低于午夜二号,抗氧化酶相关基因表达上调幅度,以及一些与冷胁迫相关转录因子的表达调控均大于午夜二号。这些物质合成和基因表达的差异可能共同导致扁茎早熟禾的高耐冷性。
- 史毅牛奎举余倩倩刘文辉马晖玲
- 关键词：青海扁茎早熟禾草地早熟禾活性氧抗氧化酶
- 利用RNA-seq分析诱导性系统抗性(ISR)产生时匍匐翦股颖转录因子的表达变化被引量：1
- 2018年
- 研究发现经2,3-丁二醇的喷施诱导,匍匐翦股颖植株可产生对草坪草褐斑病病原立枯丝核菌的抗性,继而通过对匍匐翦股颖被诱抗剂2,3-丁二醇处理前后的转录组进行比较,发掘匍匐翦股颖ISR抗性相关转录因子,并研究其表达模式。结果表明:随着诱导时间的递增,差异表达基因增多,其中32个转录因子相关基因可归类为13个转录因子家族。抗病相关的转录因子27个可归类为bHLH,Bzip,C2C2-CO-like,C2H2,C3H,NAC,WRKY,MYB,AP2-EREBP和HSF共10个基因家族。呈持续上调的转录因子有bHLH,C2C2-CO-like,1个NAC和1个MYB转录因子,呈先上调再下调表达的有WRKY和3个AP2-EREBP家族转录因子。呈显著下调的是Bzip,C2H2,C3H,1个NAC和10个HSF转录因子。同时实时荧光定量PCR验证了转录组测序的准确性。这些转录因子的共同变化导致了匍匐翦股颖ISR抗性的产生。
- 史毅牛奎举马晖玲
- 关键词：匍匐翦股颖诱导系统抗性转录组转录因子
- 不同预处理及发芽床对红豆草种子萌发的影响被引量：8
- 2013年
- 研究不同预处理(机械处理、温水浸种、化学试剂浸种)和不同发芽床(滤纸床、沙床、毛巾床)对红豆草种子萌发的影响。结果表明:剥去种皮和50℃温水浸种对红豆草种子发芽率影响显著,分别比对照提高17.4%和9.7%;H2O2和H2SO4处理对种子萌发具有显著的抑制作用;不同发芽床中毛巾床效果最佳,去种皮和50℃温水浸种发芽率分别较滤纸床提高26.0%和22.7%。
- 史毅马晖玲
- 关键词：红豆草预处理发芽床发芽率
- 三个苜蓿品种植株高频再生体系的研究被引量：5
- 2014年
- 以适宜于西北地区生长的‘甘农1号’杂花苜蓿、‘甘农3号’紫花苜蓿,‘新疆和田大叶’紫花苜蓿3个品种的不同部位外植体为供试材料,进行了植株体外再生的研究.结果表明,苜蓿基因型、外植体来源、外源激素种类及浓度、激素处理时间、培养基蔗糖浓度等因素均影响细胞的生长发育和植株再生.‘甘农1号’苜蓿下胚轴愈伤组织诱导率和体细胞胚形成率最高,可达97.2%和70.9%,‘新疆和田大叶’苜蓿下胚轴次之,‘甘农3号’出愈率和体细胞胚形成率均最低；苜蓿愈伤组织诱导以2.0 mg/L 2,4-D单独处理或2.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT组合处理为最佳,在此激素组合处理下,下胚轴愈伤组织诱导率最高可达97.2%,激素处理时间以20 d为宜；体细胞胚的发育则以2 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA的激素组合处理为宜,在此激素组合处理下,体细胞胚形成率最高可达70.9%.适宜的生根培养基为1/2 MS＋1.0 mg/L IBA＋1%蔗糖＋0.7%琼脂.体细胞胚形成阶段培养基添加25~30 g/L的蔗糖有利于愈伤组织分化.
- 史毅马晖玲
- 关键词：苜蓿植株再生愈伤组织体细胞胚
