史伟伟
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目NSFC-广东联合基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 血管瘤禽白血病病毒FJ0610株的分离与鉴定
- 2012年
- 为了解禽白血病病毒在商品蛋鸡中的流行情况,试验采用病理剖检、聚合酶链式反应(PCR)以及间接免疫荧光试验(IFA)等方法对送检的疑似禽白血病病毒感染的商品蛋鸡进行了病毒分离与鉴定,并对分离株的致瘤相关基因gp85基因进行测序,与国内外各亚群禽白血病病毒进行对比。结果表明:分离、鉴定到1株J亚群血管瘤禽白血病病毒,命名为FJ0610;分离株gp85基因核苷酸序列同源性在11.5%～94.5%之间,其中与血管瘤禽白血病毒株ZH-08株同源性最高,而与E亚群毒株同源性最低;基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明FJ0610株的gp85序列与ZH-08株的亲缘关系最近。
- 刘红波冯少珍史伟伟梁艺瑜王小芬李育豪廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：J亚群禽白血病病毒
- 血管瘤病变型相关禽白血病病毒HB-0911株的分离与鉴定
- 前言禽白血病(avian leukosis,AL)是由反转录病毒科α肿瘤病毒属禽白血病病毒/肉瘤病毒群病毒(ALV/RSV)引起的禽类多肿瘤性疾病的总称。根据病毒囊膜糖蛋白的抗原差异,宿主范围,中和活性和不同毒株的感染干...
- 刘红波史伟伟李育豪罗开健廖明曹伟胜
- 文献传递
- 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较被引量：7
- 2010年
- 从ALV-J中国地方分离株SCAU-HN06株（血管瘤病变型）、NX0101株和JS-nt株（骨髓瘤病变型）病毒的细胞培养物提取前病毒DNA,通过PCR扩增各毒株的LTR并克隆,随后进行测序分析。与国内外ALV-J参考毒株LTR序列比较发现：国内地方分离株与英国ALV-J原型株HPRS-103和美国ALV-J原型株ADOL-7501的LTR核苷酸序列相似性为88.0%~97.2%;LTR中的U5区及R区具有较高的保守性,而U3区内存在较大差异。将不同病变型ALV-J的LTR片段分别插入pCAT-basic载体CAT报告基因5＇端。用所得的重组报告基因表达质粒转染DF-1细胞,48h后通过测定转染细胞中的CAT表达量来评价LTR启动子的活性。结果表明,SCAU-HN06株与骨髓瘤病变型ALV-J（JS-nt株,NX0101株）LTR启动子活性差异不显著。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘红波曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒长末端重复序列启动子活性
- 血管瘤相关J亚群禽白血病病毒ZH-08株的分离与全基因组序列测定被引量：11
- 2010年
- 本研究从临床表现为典型血管瘤型禽白血病病例的广东某肉种鸡场的病鸡中,分离到1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为ZH-08。利用ELISA抗原检测、PCR和间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定,结果都呈阳性。依据ALV-J原型株HPRS-103前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示该分离株基因组序列全长7 597 bp,与已公开的全基因组序列大小比较略有差异,但符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因。将该分离株的亚群特异性gp85基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较,发现ZH-08与YZ9901株相似性最高(93.7%)。基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明:ZH-08株与SD07LK1株的亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病机制研究奠定了基础。
- 张小桃史伟伟刘红波张贺楠廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：血管瘤J亚群禽白血病病毒全基因组序列
- 禽网状内皮增殖病病毒GD1007株的分离与鉴定
- 前言禽网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)是由禽网状内皮组织增生症病毒(Retieuloen-dotheliosis Virus,REV)引起的以网状细胞增生为主要特征的一组综合征。RE...
- 史伟伟刘红波徐成刚辛朝安曹伟胜
- 文献传递
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒E元件缺失突变体的构建
- 2010年
- 为构建血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒E元件缺失突变体病毒,本研究利用融合PCR方法将E元件缺失,获得含有缺失性突变体病毒前病毒全基因组的重组质粒pSCAU-HN-△E。将该重组质粒纯化后转染DF-1细胞,并连续传代,最终获得缺失病毒rSCAU-HN-△E。该毒株感染的DF-1细胞可被ALV-J特异性单克隆抗体JE9所识别,并且体外增殖性能稳定。该缺失性病毒的获得为E元件功能的研究奠定了基础。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘洪波张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒血管瘤感染性克隆
- J亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备被引量：6
- 2011年
- J亚群禽白血病病毒(ALV-J)在中国普遍存在,严重危害养禽业,暂时尚无有效预防、治疗禽白血病的措施,只能通过净化控制。因此,研究一种低成本、易推广的检测方法对防控此病非常重要。用DF-1细胞接种病毒,以细胞基因组为模板,通过巢式PCR方法扩增出941bp的含酶切位点的ALV-J特异性基因gp85基因序列,连接于pET32a(+)载体上,实现gp85蛋白在宿主菌BL21的表达,以切胶回收方式纯化蛋白,成功获得约52ku的重组融合蛋白,免疫新西兰兔,制备gp85单因子抗血清,Dot-ELISA检测抗体效价。结果显示,纯化所得蛋白质具有良好抗原性,制备的抗血清效价高于1.024×105。本试验通过较简便、低耗的方法获得高效单因子血清,为抗血清的制备提供参考,为ALV-J gp85蛋白的研究、ALV-J特异性检测方法的研制打下基础,对ALV-J的净化有重要意义。
- 梁艺瑜冯少珍史伟伟刘红波王小芬李育豪廖明曹伟胜
- 关键词：J亚群禽白血病病毒GP85基因蛋白表达
- A亚群禽白血病病毒GD08株的分离与全基因组序列测定被引量：4
- 2010年
- 通过DF-1细胞培养、ELISA抗原检测和特异聚合酶链式反应(PCR)从疑似禽白血病感染的黄羽肉种鸡中,分离并鉴定出1株A亚群禽白血病病毒(ALV-A),命名为GD08。依据A亚群原型株RAV-1前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,首次完成了ALV-A中国分离株的全基因组序列测定。测序结果显示GD08株基因组序列全长7 704 bp,其中gp85全长为1 018 bp,预计编码339个氨基酸。序列分析发现GD08株的gp85与国内外各参考毒株的相应核苷酸序列相似性在44.2%～89.4%之间,其中与A亚群MAV-1株相似性最高(89.4%),与J亚群原型株HPRS-103相似性最低(44.2%)。基于ALVgp85核苷酸序列的系统发育进化树表明:GD08株与MAV-1株的亲缘关系最近。结果表明,在J亚群禽白血病普遍流行的情况下,ALV-A引起禽白血病病例在我国华南地区依然存在,提示了我国华南地区地方品种鸡禽白血病的流行呈现复杂化趋势。
- 张小桃辛欢欢张贺楠史伟伟刘红波廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：全基因组序列
- 禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序被引量：2
- 2011年
- 从广东某鸡场送检的疑似禽网状内皮组织增殖病的病鸡中采集病料,处理后经接种DF-1细胞,经聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离并鉴定出1株禽网状内皮组织增殖病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV),命名为GD09。依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示,该分离株基因组序列全长8295bp,符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因。将该分离株的亚群特异性gp90基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较分析,结果表明,GD09分离株与中国分离株HA9901亲缘关系最近,核苷酸相似性最高。
- 史伟伟刘红波徐成刚廖明曹伟胜
- 关键词：禽网状内皮组织增殖病禽网状内皮组织增殖病病毒
