刘鹏刚
- 作品数：20 被引量：57H指数：4
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞HSP70 mRNA表达的影响被引量：4
- 2015年
- 本文主要研究了急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞热休克蛋白70(Heat stress protein,HSP70)表达量的影响。采用实时荧光定量PCR技术,以急性冷刺激10℃为典型研究环境,分析了HSP70 mRNA表达的变化规律。结果显示,乳腺上皮细胞在10℃分别冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,其HSP70 mRNA的表达量变化均不显著(P>0.05);分别在10℃冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,再复温培养4 h,HSP70 mRNA的表达量均极显著增加(P<0.01),于6 h达到峰值;在10℃先冷处理4 h,然后分别复温2 h、4 h、6 h和8 h,HSP70 mRNA的表达量亦均显著增加(P<0.01),并于4 h达到峰值。结论:急性冷应激诱导牦牛乳腺上皮细胞HSP70表达量的增加不是发生在冷处理过程中,而是发生在复温过程中,并且在一定范围内随冷处理时间的增长表达量增高。
- 景慕娴崔燕杨琨温泽星刘鹏刚申青峰余四九
- 关键词：牦牛乳腺上皮细胞HSP70冷应激
- 猪链球菌对食蚊鱼和斑马鱼致病后的病理学比较分析
- 2013年
- 以野生食蚊鱼和斑马鱼为动物模型,对4株猪链球菌分离株进行致病性比较分析,以确定其作为猪链球菌试验模型的可行性。对斑马鱼和食蚊鱼背部肌肉接种不同稀释度的猪链球菌分离株,连续观察96 h。统计死亡数并计算半数致死量。制作石蜡切片及冰冻切片,观察组织病变。结果显示:斑马鱼对于猪链球菌强毒株敏感,攻毒后出现病变、死亡,并伴有肝、肠和肾脏病变,半数致死量在8.79×103cfu至3.02×104cfu之间;对猪无致病力的菌株,不表现任何病变;而食蚊鱼对于猪链球菌不敏感,未出现病变。
- 刘鹏刚孙婕崔燕
- 关键词：食蚊鱼斑马鱼猪链球菌病变
- HSPA2在牦牛不同组织器官中的表达差异被引量：5
- 2014年
- 【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和睾丸)样本。(1)从牦牛不同组织器官中提取RNA,将RNA反转录成第一链cDNA,参照牦牛HSPA2和β-actin基因序列(登录号为KC790105.1和DQ838049.1)设计特异性引物,首先采用RT-PCR来验证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是否能应用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定;然后采用RT-qPCR测定牦牛不同组织器官中HSPA2相对表达量的差异。(2)将牦牛不同组织器官样本4%多聚甲醛固定,制成石蜡切片,免疫组织化学法测定HSPA2在不同组织器官中的分布。采用Image-Pro Plus 6.0软件进行免疫组化图像分析,测定HSPA2阳性反应物的积分光密度,进行吸光度分析;通过SPSS 19.0统计软件,用单因素方差分析进行差异显著性测定。【结果】(1)RT-PCR结果表明RT-qPCR法可用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA2在睾丸中的相对表达量,分别是在脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏中的83.33、97.09、111.11、133.33、222.22和285.71倍。(2)免疫组织化学结果显示,牦牛睾丸、肾脏、脑、心脏、肺脏、肝脏和脾脏中均有HSPA2的阳性表达。其中,在牦牛肾脏皮质肾小管、髓质肾小管,大脑皮质海马CA1区、小脑皮质,心肌细胞,肺泡上皮细胞,肝细胞,脾脏边缘区和红髓中有HSPA2阳性反应,着色深浅不等,大部分阳性反应位于细胞质,细胞核阳性反应极少;而在睾丸曲精小管中生精细胞细胞质和细胞核中均有HSPA2阳性反应,着色深浅不等;阴性对照组未观察到阳性反应。根据积分光密度值比较得出,HSPA2蛋白的阳性表达量在睾丸中最高,脑、肾脏、心脏、肺脏和肝脏次�
- 温泽星余四九翟羽佳杨琨刘鹏刚何俊峰崔燕
- 关键词：牦牛实时荧光定量PCR免疫组化
- 益生菌对断奶仔猪的健康作用被引量：1
- 2013年
- 益生菌是一种对动物有益的细菌，可直接作为食晶添加剂服用，改善宿主微生态平衡而发挥有益作用，达到提高宿主健康水平和健康状态的活菌制剂及其代谢产物。
- 李雪强刘鹏刚
- 关键词：益生菌断奶仔猪微生态平衡代谢产物活菌制剂
- LRP6和VEGFR2在牦牛肺的分布被引量：3
- 2018年
- 旨在探究LRP6和VEGFR2在不同年龄段牦牛肺组织中的表达和定位,以及两者对牦牛肺低氧适应性结构形成和可能的调控作用。选取新生(1~7日龄)、半岁(5~6月龄)、成年(3~6岁)和老年(7~10岁)健康牦牛肺组织样品各5头份,采用酶联免疫吸附试验、Western-blot和免疫组织化学方法对不同年龄的牦牛肺组织中LRP6和VEGFR2的表达量和准确分布位置进行研究。结果显示:LRP6和VEGFR2在初生和半岁牦牛组之间的表达量均差异不显著(P>0.05),初生、半岁与老年组牦牛的表达量均差异显著(P<0.05),成年和老年牦牛组之间的表达量差异显著(P<0.05)。LRP6主要分布于肺内支气管和其分支的上皮细胞以及肺泡Ⅱ型细胞,其表达较强;少量分布在肺血管内皮细胞和管壁平滑肌细胞,表达较弱;VEGFR2主要分布于肺内支气管及其分支的上皮细胞、管壁平滑肌细胞和肺泡隔细胞以及肺泡Ⅰ型细胞中,其表达较强;在肺血管内皮细胞和平滑肌细胞内也有分布,但表达较弱。综上表明,LRP6和VEGFR2不仅在不同年龄段的牦牛肺组织中表达量具有差异性,而且它们对高原环境下牦牛肺适应低氧适应性的结构形成和维持可能的调控具有重要的意义。
- 马俊兴何俊峰崔燕张倩刘鹏刚
- 关键词：牦牛VEGFR2适应性
- 成年牦牛汗腺和皮脂腺的组织学特征被引量：6
- 2018年
- 目的探讨青海健康成年牦牛汗腺和皮脂腺的组织学特征。方法从10头健康成年牦牛背部、肋部和腹部皮肤取样,运用HE、过碘酸-雪夫(PAS)和阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色法,对汗腺和皮脂腺组织学结构进行观察与分析。结果青海成年牦牛背部、肋部和腹部皮肤的汗腺为单管状腺,属于顶浆分泌型腺体,其分泌物为中性和酸性混合液,腺细胞胞质中含有糖原。皮脂腺呈葡萄状、多叶且分支的泡状腺,属于全浆分泌型腺体,其分泌物为中性黏液,腺细胞胞质中含有少量糖原。汗腺的密度、直径、长度和体积从背部到腹部呈递减趋势,但距离皮肤表面的深度呈递增趋势,且部位间差异显著(P<0.05)。皮脂腺的密度、导管部直径和长度、分泌部直径和长度及距离皮肤表面的深度从背部到腹部呈递减趋势,且部位间差异显著(P<0.05)。结论青海成年牦牛背部、肋部和腹部皮肤的汗腺和皮脂腺形态学结构相似,但其密度、大小和深度差异显著,且从背部到腹部存在渐变趋势。与其他牛类相比,牦牛汗腺和皮脂腺的密度高,但前者的分泌功能不发达而后者发达,这可能与其为了适应高原高寒环境有关。
- 曹迷霞崔燕何俊峰杨雪张倩刘鹏刚
- 关键词：汗腺皮脂腺组织学
- 不同年龄牦牛肾的组织学特征被引量：4
- 2017年
- 旨在探究牦牛肾的组织学特征及增龄性变化。选取新生(1~7日龄)、成年(3~6岁)及老年(7~10岁)牦牛肾为研究对象,各5头份,采用组织学方法对不同年龄牦牛肾的组织结构进行观察,通过图像分析软件分析并测量肾单位的相关数据。组织学观察显示牦牛肾包含表面的被膜和内部的实质。肾小体由肾小球和肾小囊构成,肾小囊壁层富含胶原纤维,肾小体基膜呈PAS阳性;肾小管包括近端小管和远端小管,其小管外围富含胶原纤维,上皮基膜呈PAS阳性。测量结果表明,单位视野(2.3×10~6μm^2)内肾小球数随年龄增长而减少;肾小球内细胞数和肾小球细胞核大小随年龄增长而增加;不同的是,肾小球和肾小体的最大切面面积,成年达峰值,老年次之,新生最低。另外,随年龄增长,单位视野(2.3×10~4μm^2)内肾皮质与髓质肾小管上皮细胞数,近端小管上皮细胞核的大小,远端小管上皮细胞核的大小分别与单位视野内肾小球个数、肾小球内细胞数和肾小球细胞核的大小、肾小球和肾小体的最大切面面积变化趋势一致。结果表明,牦牛肾的组织结构随年龄的增长出现差异性变化,推测这种变化可能与肾小球硬化、实质性细胞减少有关,具体机制还有待进一步研究。
- 王婷崔燕何俊峰刘鹏刚张倩杨雪
- 关键词：牦牛肾小球肾小管上皮细胞增龄性变化
- HSPs在牦牛和犏牛不同器官组织的表达及对睾丸发育的影响
- 【实验目的】牦牛/犏牛是长期生活在青藏高原地区的一类哺乳动物,对严寒及缺氧具有极好的适应性。犏牛又是牦牛和黄牛的杂交一代,其公犏牛的不育是困扰广大牧民牧畜业发展的难题。HSPs作为分子伴侣广泛参与动物机体的生长发育、代谢...
- 刘鹏刚
- 关键词：器官组织睾丸HSPS
- 文献传递
- 浅析我国肉牛的生态养殖被引量：1
- 2013年
- 随着中国畜牧业的大力发展,肉猪饲养和禽类的养殖数量已经达到世界第一位,肉牛生产也不甘示弱,近年来,中国牛肉数量仅仅少于美国和巴西,2009年我国牛肉产量已经达到635.5万t,并且呈逐年增长的趋势。但是环境专家研究数据表明,畜牧业养殖产生的温室气体排放量占世界温室气体排放总量的18%以上,所以引起越来越多的人更加关注畜牧业对环境的影响,畜牧业养殖给人们带来了巨大挑战:提高肉牛的养殖效率(饲料转化率),引进和培育优良的品种,进行合理的发展可持续生态养殖,解决当前阻碍畜牧业发展的疾病预防控制。
- 刘鹏刚
- 关键词：生态养殖品种选育疾病防治
- IL-17和HSP90在不同牛肝中的定位和定量研究被引量：1
- 2019年
- 本试验旨在比较研究不同牛肝组织中IL-17和HSP90的分布及表达差异。分别选取5例健康成年牦牛、犏牛及黄牛,取肝组织,采用HE染色、免疫组织化学染色及实时荧光定量研究肝组织学结构特点、蛋白阳性定位及基因定量表达。HE染色结果显示,肝细胞呈索状排列,肝索之间的肝血窦中有少量的淋巴细胞和枯否细胞;免疫组织化学染色结果显示,IL-17和HSP90在牦牛、犏牛及黄牛肝细胞的细胞质中表达;免疫组化半定量和实时荧光定量的结果一致,在犏牛肝表达量最高,牦牛次之,黄牛最低(P<0.01)。IL-17和HSP90基因在牦牛、犏牛和黄牛肝中表达的差异说明具有种属特异性;IL-17和HSP90蛋白半定量阳性结果说明相对于黄牛肝,犏牛和牦牛肝对温差变化等刺激具有更好的适应性。
- 赵凯崔燕刘鹏刚何俊峰宋亮丽廖博杨晓晴
- 关键词：IL-17HSP90
