刘蕾 作品数:4 被引量:7 H指数:1 供职机构: 昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
在叶绿体中过量表达AOD1和HPS-PHI创建光合甲醇同化途径增加烟草同化甲醇能力 2013年 最近的研究证明在叶绿体内过量表达甲基营养细菌RuMP中固定HCHO的关键酶6-磷酸己酮糖合成酶(HPS)和6-磷酸果糖异构酶(PHI)的融合蛋白HPS-PHI可以在转基因天竺葵中构建一条甲醛光合同化途径从而提高植物对甲醛的同化和脱毒能力。甲醇氧化酶(AOD1)是甲基营养型酵母甲醇代谢途径的第一个关键酶,可催化甲醇氧化为甲醛。在烟草叶绿体中过量表达AOD1或/和HPS-PHI产生过量表达AOD1(AO)、HPS-PHI(AB)、同时过量表达AOD1和HPS-PHI(AA)的转基因烟草。用2和6mmoL/L^(13)CH_3OH处理3种转基因烟草和野生型烟草(WT),^(13)CNMR分析表明AO植株中积累的H^(13)COOH最多,[U-^(13)C]Gluc和[U-^(13)C]Fruc的生成量在AO和WT间无显著差异,在AA和AB中的产生量显著高于AO和WT,且在AA中的生成量又高于AB,这种差异在6mmol/L^(13)CH_3OH处理植株中比2 mmol/L更为明显。这些结果证实在叶绿体中过表达AOD1增加烟草氧化甲醇为甲酸的能力,同时过量表达AOD1和HPS-PHI在烟草中成功地构建一个甲醇光合同化途径,提高烟草同化甲醇为糖类物质的能力。 刘蕾 孙振 宋中邦 肖素勤 陈丽梅关键词:转基因烟草 烟草GA合成调控转录因子RSG应答甲醇和乙醇刺激的分子机理初探 被引量:1 2014年 为了考察甲醇或乙醇促进植物生长与赤霉素(GA)的合成关系,该研究在MS固体培养基中培养并添加外源GA和GA合成抑制剂多效唑(PAC),分析其对2mmol/L甲醇或乙醇促进烟草生长的影响及GA合成调控转录因子RSG(for repression of shoot growth)应答甲醇或乙醇刺激的分子机理。结果显示:(1)外源添加GA可增强甲醇或乙醇对烟草生长的刺激作用,而添加PAC却抑制甲醇和乙醇对烟草生长的刺激作用。(2)14-3-3蛋白与RSG结合抑制RSG进入细胞核及其转录调控活性;甲醇和乙醇诱导烟草14-3-3基因的转录和表达,对RSG蛋白表达也有诱导作用。(3)甲醇和乙醇可降低14-3-3蛋白与RSG的相互作用,同时增强RSG与GA20ox1启动子的结合。研究表明,甲醇和乙醇刺激烟草的生长可能通过增加RSG表达,且减弱RSG与14-3-3蛋白的结合来增加RSG细胞核定位作用,从而增强RSG与GA20ox1启动子的结合,最终增加GA的合成,从而促进烟草的生长,这可能是甲醇和乙醇促进烟草生长的一种重要的分子机制。 刘蕾 杨志丽 陈丽梅关键词:烟草 甲醇 乙醇 外源甲醇对油菜种子萌发和幼苗生长的影响 被引量:5 2014年 以中国南、北2个主要栽培品种‘玉油二号’和‘秦油二号’油菜种子为供试材料,采用溶液培养方法研究了0~2 000 mmol·L-1甲醇溶液处理下,油菜种子萌发、幼苗生长特征及其相关生理生化指标的变化.结果表明:(1)10~1 000 mmol·L-1甲醇处理的油菜种子萌发指标(发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数)和幼苗生长指标(幼芽及幼根长度、鲜重、根冠比)均比对照显著增加,而甲醇溶液浓度为2 000 mmol·L-1时油菜种子萌发和幼苗生长受到显著抑制;两个油菜品种种子萌发和幼苗生长在甲醇溶液处理下均表现为相同的变化趋势,但也存在品种的差异,‘秦油二号’生长受影响程度低于‘玉油二号’.(2)随着甲醇溶液浓度的增加,油菜种子萌发指标和幼苗生长指标表现出先增加后降低的趋势,并在甲醇溶液浓度为100 mmol·L-1时均达到最大值,继续高于此浓度后促进作用即减弱以至消失,甚至产生抑制作用.(3)随着甲醇处理溶液浓度的增加,油菜幼苗叶片的叶绿素含量呈先增后降的趋势,而同期叶片的MDA和过氧化氢含量却呈先降后升的相反趋势,且均在相同的100 mmol·L 1浓度下分别达到最大或者最低值.研究认为,适宜浓度的甲醇溶液能够促进油菜种子萌发和幼苗生长. 赵艳 杨青松 刘蕾 曾智东 孙慧群 陈丽梅关键词:油菜 生理特性 种子萌发 幼苗生长 在烟草中过量表达大豆SGF14a增强转基因烟草对铝胁迫的耐受性 被引量:1 2015年 为了验证铝耐受型丹波黑大豆根尖14-3-3a基因(soybean 14-3-3a,SGF14a)在植物应答铝胁迫中的作用,本研究利用35S组成型启动子和大豆SGF14a的编码区构建植物表达载体pK-35S-SGF14a,在野生型(wild type,WT)烟草中过量表达SGF14a获得3个转基因株系(S11、S19和S23);并用50μmol/L铝处理WT和转基因烟草,分析过量表达SGF14a对烟草铝耐受性的影响.结果表明:过量表达SGF14a的转基因烟草经铝胁迫处理后根的相对生长量比WT高约30%-40%;此外,在没有铝胁迫的正常生长条件下,3株转基因烟草根中可溶性蛋白的含量都比WT高,而用50μmol/L铝胁迫24h后WT烟草和3株转基因烟草根中可溶性蛋白的含量都下降,但转基因烟草根中可溶性蛋白含量仍显著高于WT,并且过量表达SGF14a还可显著提高过氧化物酶、过氧化氢酶以及抗坏血酸过氧化物酶的活性,降低铝胁迫下烟草根中过氧化氢(H2O2)的积累以及氧化胁迫的水平;同时,转基因烟草在低酸土壤中的生长状况也明显优于WT.这说明过量表达SGF14a可增强烟草对铝胁迫的耐受性及其适应酸性土壤生长的能力. 杨志丽 郭传龙 刘蕾 武孔焕 王琳 李昆志 赵艳 陈丽梅关键词:转基因烟草 铝胁迫 耐铝性