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呼吸内科下呼吸道感染病原菌及耐药性分析被引量：4: 2014年; 目的探讨呼吸内科下呼吸道感染患者的病原菌分布与耐药性，为医院感染控制与治疗下呼吸道感染提供参考依据。方法采取回顾性方法对医院呼吸内科2011年1月一2012年12月70例下呼吸道感染患者痰标本进行病原菌检测及耐药性分析，数据采用SPSS18．0进行统计分析。结果70例下呼吸道感染患者痰标本共检出80株病原菌，检出革兰阴性菌、革兰阳性菌及真菌分别占60．00％、31．25％及8．75％；革兰阴性菌对头孢他啶、环丙沙星、替卡西林、庆大霉素的耐药率为90．00％～100．00％，对亚胺培南和哌拉西林的耐药率最低；革兰阳性菌对青霉素G、利福平、庆大霉素、左氧氟沙星、四环素、红霉素、环丙沙星的耐药率在66．70％～100．00％，对万古霉索、磺胺甲嘌唑／甲氧苄啶、利奈唑胺耐药率最低。结论呼吸内科下呼吸道感染患者主要以革兰阴性菌为主，并且存在较广泛的耐药性，临床中应加强抗菌药物的管理，减少耐药菌株的产生，提高临床治疗效果。; 刘波宋卓宋铁友; 关键词：呼吸内科下呼吸道感染病原菌药敏试验

基于TaqMan探针的荧光定量PCR技术在PCV2检测中应用研究被引量：4: 2015年; 目的针对猪圆环病毒（PCV2）特点,利用TaqMan探针建立一种能够快速、准确并具有临床应用价值的PCV2检测方法。方法参照GenBank已收录PCV2ORF2,利用软件设计合成1对特异引物以及与之相匹配的特异性TapMan探针,采用PCR对PCV2衣壳蛋白部分基因进行克隆并鉴定,将纯化回收产物连接至pMT19-T载体,然后转化至大肠杆菌DH5a感受态细胞,涂布至Amp＋琼脂平板,筛选阳性克隆并扩大培养,进行2%琼脂糖凝胶电泳鉴定并测序。采用矩阵法确定引物和探针最佳浓度。对基于TapMan探针的实时荧光定量PCR循环进行优化,筛选最佳退火温度。以100-109倍稀释的标准品为模板,进行敏感性试验。提取CSFV、PRRSV、PRV和PCV1的DNA（CSFV和CSFV在提取RNA后反转录成cDNA）作为模板,进行TapMan荧光定量PCR,检测其特异性。采用105-108倍稀释的标准品为模板进行重复性实验,其中批内和批间均重复4次,根据所得值计算变异系数。结果 PCR产物经20g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定后大小为114bp,与预期相符;测序分析PCR产物序列与参考序列同源性为100%。优化的PCR条件为：引物和探针浓度为10μmol/L,退火温度60℃。建立了PCV2TaqMan实时荧光定量PCR检测标准曲线,起始模板拷贝数为38.403,斜率为-3.69,相关系数R2为0.998,曲线呈线性。检测方法的敏感性为102拷贝/μl质粒标准品,是常规PCR检测敏感性的100倍。特异性检测显示,CSFV、PRRSV、PRV和PCV1扩增反应均阴性。重复性检测显示,PCR扩增循环阈值平均值基本一致,其变异系数均小于2%。采用TaqMan荧光定量PCR方法检测40份样品14份阳性,阳性率35.0%;普通PCR检测11份阳性,阳性率27.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论建立的PCV2TaqMan实时荧光定量PCR检测方法具有以下优点：1）敏感性高,能够用于精确计算PCV2病毒载量;2）特异性强,适用于检测PCV2与其他病原混合感染;3）用时短且可靠性强,可用于; 刘波郭红艳; 关键词：PCV2 TAQMAN 荧光定量PCR 病毒检测

骨科手术患者医院感染病原菌分布与危险因素分析被引量：4: 2014年; 目的分析医院骨科手术后住院患者医院感染的状况,医院感染的病原菌及其耐药性,并对感染发生的危险因素进行分析,以降低感染率。方法选取2011年1月-2012年12月在骨科进行手术治疗的987例患者,将其进行分组,其中感染组105例、未感染组882例,对感染患者的病原菌进行耐药性分析,数据采用SPSS 18.0进行处理。结果 987例骨科手术后住院患者发生医院感染105例,感染率10.60%,对感染患者送检标本进行分离培养,分离出病原菌112株,革兰阳性菌47株占41.96%,革兰阴性菌65株占58.04%;主要革兰阳性菌对乙酰唑胺和替考拉宁的耐药率较低,革兰阴性菌对美罗培南和阿米卡星的耐药率较低,均<5.00%;患者年龄大、住院时间长、合并有其他疾病、应用呼吸机和导尿管以及未进行预防性应用抗菌药物等,是医院骨科手术住院患者医院感染的危险因素。结论骨科手术患者医院感染的发生率高,临床应根据骨科手术患者医院感染发生的危险因素,分离培养病原菌并进行药敏试验,选用耐药率低的抗菌药物进行及时的治疗,控制感染的发生。; 于德军刘丽晶刘波; 关键词：骨科病原菌

新型重组高效复合干扰素对卵巢癌细胞的生长抑制及促凋亡作用被引量：5: 2011年; 目的:探讨新型重组高效复合干扰素对卵巢癌HO8019细胞的作用,并与同类型复合干扰素、普通重组Ⅰ型干扰素、化疗药物对比。方法:应用新型重组高效复合干扰素、复合α干扰素、干扰素α-2b和顺铂以0.156ug/m l、0.625ug/m l、2.5ug/m l及10ug/m l浓度作用于体外培养的HO8019细胞72小时后,MTT法检测并计算细胞抑制率并比较。应用新型重组高效复合干扰素、复合α干扰素、干扰素α-2b和顺铂以0.156 ug/m l、0.625 ug/m l、2.5 ug/m l浓度作用于体外培养的HO8019细胞72小时后,以流式细胞仪检测HO8019细胞的凋亡率并进行比较。结果:几种干扰素及顺铂均能导致HO8019细胞生长抑制及促进细胞凋亡。相同浓度条件下,新型重组高效复合干扰素和顺铂对HO8019细胞的抑制及凋亡作用强于复合α干扰素和干扰素α-2b的作用,尤以顺铂的作用最强。结论:重组高效复合干扰素对体外培养的卵巢癌HO8019细胞的生长有抑制作用,并能促进HO8019细胞凋亡;作用虽然不及化疗药物顺铂,但较同类型干扰素、普通重组Ⅰ型干扰素的作用强。; 谭秀梅何凯高德红刘波; 关键词：干扰素卵巢癌基因重组

子宫腺肌病40例临床误诊原因分析被引量：5: 2011年; 子宫腺肌病为妇科的常见病,且近年来发病率逐年增高,日益受到人们的重视。该病术前误(漏)诊率较高。现对40例术后病理诊断为子宫腺肌病的临床资料进行误(漏)诊分析。临床诊断与病理诊断符合率45.28%,误(漏)诊率54.71%。; 梁庆华史枫真酌刘波谭秀梅; 关键词：子宫腺肌病子宫肌瘤误诊

蛋白激酶SGK3过表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231影响的研究被引量：9: 2016年; 目的血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-inducible protein kinase 3,SGK3)参与细胞增殖、分化和物质转运等生命活动,在某些肿瘤形成中担任重要角色。本研究设计观察SGK3过表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖和存活的影响,并初步探讨其作用的分子机制。方法免疫组化方法检测乳腺癌组织中SGK3蛋白的表达;通过GenEscort TMⅠ介导用重组质粒pEGFPN1-SGK3瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,荧光显微镜和蛋白质印迹法鉴定转染细胞中融合蛋白SGK3-GFP的表达;细胞增殖实验观察转染细胞的生长增殖情况;流式细胞术分析转染细胞的细胞周期时相变化;蛋白质印迹方法检测细胞增殖与存活相关基因的表达。结果 SGK3在乳腺癌组织中的表达量明显高于癌旁组织和正常乳腺组织(F=29.672,P<0.001),与二者组间比较,均P<0.01。荧光显微镜下可见转染细胞因外源基因的表达而发出绿色荧光,且蛋白质印迹法检测可见融合蛋白SGK3-GFP的表达;过表达SGK3的MDA-MB-231细胞,其细胞生长速度加快,细胞倍增时间缩短(F=19.557,P=0.001),与亲本细胞及转染空载体细胞组间比较均P<0.01。与亲本细胞和转染空载体组比较,SGK3过表达使细胞凋亡比例明显下降(F=12.156,P=0.008),与前两者组间比较P值分别为0.019和0.030;细胞内源性Bad的表达量降低(F=11.152,P=0.010),与前两者组间比较P值分别为0.008和0.005;而Bcl-xL(F=8.810,P=0.016,与前两者组间比较P值分别为0.014和0.009)以及p-GSK3β(F=42.253,P<0.001,与前两者组间比较P值分别为<0.001和0.009)的表达量均升高。结论乳腺癌组织高表达SGK3,SGK3过表达可促进MDA-MB-231细胞的增殖与存活,影响细胞增殖与存活相关基因的表达可能是其发挥作用的主要分子机制。; 郭红艳孙晓杰刘秀财刘波李淑艳张冬梅; 关键词：乳腺肿瘤存活

慢性阻塞性肺疾病患者呼出气一氧化氮浓度变化及其临床意义被引量：18: 2015年; 目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者呼出气一氧化氮(FENO)浓度变化,并探讨其临床意义。方法选取齐齐哈尔医学院第三附属医院呼吸科2013年3月—2014年3月收治的住院COPD患者120例,根据2009年慢性阻塞性肺疾病全球创议(GOLD)分为GOLDⅠ级组、GOLDⅡ级组、GOLDⅢ级组、GOLDⅣ级组,每组30例;选取同期在齐齐哈尔医学院第三附属医院体检健康者100例作为对照组。检测各组受试者肺功能及FENO浓度,计算第一秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC),FEV1占预计值百分比。结果 GOLDⅠ级组、GOLDⅡ级组、GOLDⅢ级组、GOLDⅣ级组患者FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比低于对照组,FENO浓度高于对照组,GOLDⅡ级组、GOLDⅢ级组、GOLDⅣ级组患者FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比低于GOLDⅠ级组,FENO浓度高于GOLDⅠ级组,GOLDⅢ级组、GOLDⅣ级组患者FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比低于GOLDⅡ级组,FENO浓度高于GOLDⅡ级组,GOLDⅣ级组患者FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比低于GOLDⅢ级组,FENO浓度高于GOLDⅢ级组(P<0.05);Spearman等级相关分析结果显示,FENO浓度与GOLD分级呈正相关(r=0.776,P<0.01)。结论 COPD患者FENO浓度明显升高,且FENO浓度与COPD严重程度密切相关,检测FENO浓度对判断COPD患者病情严重程度及预后具有重要意义。; 刘波宋铁友宋卓石寒冰刘宏; 关键词：一氧化氮呼吸功能试验

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刘波

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