刘恺鸣
- 作品数：11 被引量：33H指数：4
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- 辛伐他汀对不同氧供条件下大鼠脑微血管内皮细胞跨内皮电阻及MMP-9表达的影响
- 2008年
- 目的:观察在常氧、短暂缺氧、持续缺氧及复氧条件下,辛伐他汀对大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)跨内皮细胞电阻(TEER)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:原代分离培养SD大鼠BMECs,随机分为常氧组、短暂缺氧组、持续缺氧组、复氧组,各组均实施辛伐他汀0.1μmol/L、1.0μmol/L、10μmol/L3种浓度预处理。观察各组细胞形态学及增殖活性变化;采用TEER评估各组通透性;免疫细胞荧光化学法测定MMP-9蛋白表达。结果:短暂缺氧、持续缺氧及复氧条件下大鼠BMECs细胞受损逐渐加重,MMP-9表达逐渐增加,TEER及细胞增殖活性逐渐下降。辛伐他汀干预能不同程度提高TEER并抑制MMP-9蛋白的表达,使细胞增殖活性提高。但这种抑制MMP-9的作用对短暂缺氧大鼠BMECs的TEER值及细胞增殖活性无显著改善。结论:辛伐他汀能通过抑制MMP-9蛋白的表达来提高持续缺氧及复氧条件下大鼠BMECs的TEER,而对短暂缺氧后TEER的改善作用不明显。
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 关键词：大鼠脑微血管内皮细胞MMP-9辛伐他汀氧供BRAIN
- 大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养被引量：20
- 2007年
- 目的 建立稳定的大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMECs）体外培养模型，并对其生物学特性进行初步研究。方法取Sprague—Dawley大鼠脑组织，通过匀浆、酶消化和梯度离心获得纯化的脑微血管段后，接种于涂布明胶的培养瓶进行原代培养；培养的细胞采用相差显微镜形态学观察、Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学鉴定；采用跨内皮电阻（transendothelial electrical resistance，TEER）检测单层细胞通透性；CellCountingKit-8（CCK-8）方法测定细胞生长曲线。结果细胞从贴壁的脑微血管段周围长出．呈短梭形和多角形，区域性单层生长，5—7d细胞融合，经Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学检测证实培养的细胞是血管内皮细胞，原代培养的脑微血管内皮细胞表现出很强的屏障特性，随着传代次数的增加脑微血管内皮细胞的跨内皮阻抗减弱。结论 提示该方法能成功进行纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养．原代培养的脑微血管内皮细胞是研究脑部微血管和血脑屏障的可靠技术手段。
- 刘恺鸣迟路湘鲁向辉何国祥
- 关键词：微血管内皮细胞细胞培养
- 大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注模型的建立及他汀的保护作用被引量：5
- 2008年
- 目的建立大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注模型,并观察辛伐他汀、洛伐他汀的保护作用。方法原代分离培养SD大鼠脑微血管内皮细胞,以无糖Krebs溶液再复氧复糖模拟体外缺血再灌注损伤,并实施辛伐他汀、洛伐他汀预处理干预。观察各组细胞形态,测定各组细胞上清中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,利用CCK-8检测各组细胞增殖活性。结果氧糖剥夺(Krebs液)缺氧12h再复氧复糖4h模型可成功模拟大鼠脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤。辛伐他汀、洛伐他汀预处理后,脑微血管内皮细胞eNOS活性增强i、NOS活性降低,细胞增殖活性提高。结论辛伐他汀、洛伐他汀具有显著的脑缺血再灌注损伤保护作用。
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 关键词：脑微血管内皮细胞缺血再灌注洛伐他汀
- 缺氧条件下脑微血管内皮细胞与间充质干细胞的相互影响
- 研究背景： 骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSC)是来源于骨髓的成体干细胞，具有多潜能分化性，已证明MSC修复和分化为多种组织的能力，尤其在修复和重建血管方面成为缺血性疾病治疗研究的热点。脑...
- 刘恺鸣
- 关键词：缺血性脑血管疾病血脑屏障脑微血管内皮细胞间充质干细胞通透性
- 文献传递
- 缺氧条件下脑微血管内皮细胞与间充质干细胞的相互影响
- 目的探讨在缺氧条件下脑微血管内皮细胞(BMEC)与间充质干细胞(MSC)的相互影响。方法分离、培养和鉴定原代大鼠BMEC和人骨髓MSC,分别将直接和间接共培养的细胞在正常和缺氧条件下培养5天,采用流式细胞术和免疫荧光细胞...
- 刘恺鸣迟路湘郭梁鲁向辉罗春霞张善春何国祥
- 文献传递
- 辛伐他汀对缺氧复氧后大鼠脑微血管内皮细胞MMP-9表达及通透性的影响
- 目的观察辛伐他汀对缺氧复氧后大鼠微血管内皮细胞通透性增加及基质金属蛋白酶-9蛋白表达的影响。方法原代分离培养SD大鼠脑微血管内皮细胞,随机分组:空白对照组、单纯缺氧组、缺氧复氧组、MMP-9抑制剂Ⅰ组、辛伐他汀组(0.1...
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 文献传递
- 大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注模型的建立及他汀的保护作用
- 目的建立大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注模型,并观察辛伐他汀、洛伐他汀的保护作用。方法原代分离培养SD大鼠脑微血管内皮细胞,以无糖Krebs溶液再复氧复糖模拟体外缺血再灌注损伤,并实施辛伐他汀、洛伐他汀预处理干预。观察...
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 文献传递
- 大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注模型的建立及他汀的保护作用
- 近年来他汀类药物的非调脂性作用日益受到重视,被广泛应用于缺血性脑血管病中。本实验通过酶消化加梯度离心法分离大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs），以无糖Krebs溶液再复氧复糖模拟缺血再灌注损伤，并实施辛伐他汀、洛伐他汀预处...
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 关键词：脑缺血再灌注脑微血管内皮细胞他汀类药物
- 文献传递
- 辛伐他汀对缺氧复氧后大鼠脑微血管内皮细胞MMP-9表达及通透性的影响
- 当前他汀类药物的非调脂性作用日益受到重视,可减轻产生于脑缺血和再灌注期脑血管和脑实质内的许多病理生理过程。本实验旨在通过观察缺氧复氧及辛伐他汀干预后BMECs的MMP-9表达及单层通透性的变化,探讨辛伐他汀对BMECs缺...
- 鲁向辉迟路湘刘恺鸣
- 关键词：辛伐他汀复氧脑微血管内皮细胞通透性
- 文献传递
- 缺氧条件下大鼠脑微血管内皮细胞对共培养的人间充质干细胞分化的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨缺氧条件下大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)对人间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化的影响。方法分离、培养并鉴定人骨髓MSCs和大鼠BMECs,在正常和缺氧两种条件下,分别以间接和直接共培养两种方式对MSCs进行诱导分化,用流式细胞术和免疫荧光细胞化学法观察和分析诱导后MSCs的胎肝激酶-1(fetal liver kinase-1,Flk-1)和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达。结果正常间接共培养未能诱导MSCs表达vWF和Flk-1蛋白,缺氧间接共培养和正常条件下的直接共培养均能诱导MSCs开始表达Flk-1蛋白,而vWF染色仍为阴性,缺氧条件下直接共培养表达Flk-1蛋白的MSCs比正常条件增多,而且部分Flk-1阳性细胞开始同时表达vWF蛋白。结论BMECs能够通过细胞直接接触诱导共培养的MSCs开始向内皮分化,缺氧条件下的直接共培养BMECs能诱导更多的MSCs更彻底地向内皮分化。
- 刘恺鸣迟路湘鲁向辉
- 关键词：间充质干细胞缺氧共培养分化脑微血管内皮细胞
