刘卫
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
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- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目国家自然科学基金河南省自然科学基金更多>>
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- 来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
- 鲁毅徐萍李任峰李超英李学斌王三虎陈明艳刘卫邓佳霖
- 关键词：来航鸡FOXL2单克隆抗体表位
- FOXL2与脊椎动物性别决定研究进展被引量：2
- 2012年
- FOXL2是最早影响脊椎动物卵巢分化的转录因子,其与芳香化酶及SOX9基因相互作用,在脊椎动物的性别决定方面有很大影响。为此,阐述了FOXL2的结构及其生物学功能,并着重介绍了FOXL2与脊椎动物性别决定关系的最新研究进展。
- 鲁毅李任峰徐萍李学斌刘卫王三虎
- 关键词：脊椎动物芳香化酶SOX9基因性别决定
- 鸡新城疫病毒的分子生物学特性及应用研究进展
- 2011年
- 鸡新城疫是由NDV引起的一种高度接触性传染病,是危害养鸡业发展最为严重的疫病之一。NDV是负链RNA病毒,含有核衣壳蛋白NP、磷酸化蛋白P、基质蛋白M、融合蛋白F、血凝素-神经氨酸酶蛋白HN和大聚合酶蛋白L这6种结构蛋白。对NDV分子生物学特性的深入研究,为NDV在分子水平上进行特异性诊断奠定了坚实的基础。这些技术不仅可以用于新城疫病毒的检测、鉴定、特性研究和致病性的确定等,还能据此追踪病毒的来源及流行情况。
- 田献礼宁红梅银梅岳峰魏继涛郭东光刘卫
- 关键词：新城疫病毒分子生物学
- 猪瘟病毒E2蛋白抗原表位集中区的原核表达及鉴定被引量：2
- 2013年
- 为获得猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白抗原表位集中区原核重组目的蛋白,建立CSFV抗原和抗体快速检测方法。通过扩增CSFV E2蛋白抗原表位集中区基因,亚克隆至表达载pET-30a(+),构建重组原核表达载体pET-30a-E2-1,转化至宿主菌Rostta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示,出现与目的蛋白大小一致的蛋白条带,分子质量大小为31ku。对重组蛋白表达条件进行优化,最终获得其诱导表达的最佳温度为18℃,最佳IPTG浓度为0.1mmol/L。目的蛋白以包涵体形式存在,其表达量约占菌体总蛋白含量的46%。Western blot分析显示,目的蛋白不仅能与兔抗CSFV高免血清反应,还可以与载体特异性标签His单抗反应,表明融合蛋白具有良好的抗原性,为CSFV抗原和抗体检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 郭东光朱艳平银梅宁红梅潘耀谦刘卫陈明艳王选年
- 关键词：猪瘟病毒E2蛋白抗原表位原核表达
- 猪瘟病毒NS2-3抗原集中区基因的原核表达及鉴定
- 2013年
- 为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)NS2-3抗原集中区蛋白,并建立CSFV抗体快速检测方法。本研究以CSFV全长基因组质粒为模板,PCR扩增NS2-3抗原表位集中区,利用扩增片段和克隆载体,构建重组表达质粒,命名为pET32a-NS2-3-1。重组表达质粒转化Rosetta(DE3)细胞,利用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定重组表达产物。结果表明,重组质粒pET32a-NS2-3-1在28℃诱导5h得到高效表达,重组蛋白能够与兔抗CSFV阳性血清发生反应。获得CSFVNS2-3抗原集中区蛋白,并且获得的重组蛋白具有抗原性,能够作为CSFV抗体检测的抗原。
- 刘卫朱艳平宁红梅银梅郭东光鲁毅王选年
- 关键词：猪瘟病毒抗原表位原核表达免疫印迹
- 新城疫病毒xx08毒株血凝素-神经氨酸酶基因主要抗原区原核表达及鉴定被引量：1
- 2012年
- 利用基因工程技术构建新城疫病毒HN基因抗原表位集中区HNI175-K367基因片段(523-1101位)的重组表达质粒pET32-HNI175-K367。将该质粒转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定表明,HNI175-K367蛋白得到高效表达,其分子量约为38kD。Western-blot分析证实,HNI175-K367蛋白与鸡新城疫病毒高免血清发生特异性反应,表明利用原核表达系统获得的重组蛋白具有良好的反应原性。
- 朱艳平田献礼李鹏岳锋贾文科张艳芳孙国鹏郭东光刘卫王选年
- 关键词：新城疫病毒原核表达
