刘军发
- 作品数：18 被引量：202H指数：8
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划国家自然科学基金湖北省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 引物组、环介导等温扩增试剂及引物组在制备检测鸡毒支原体产品中的应用
- 本发明提供一种可用于鸡毒支原体LAMP检测方法的引物组、环介导等温扩增试剂及所述引物组在制备检测鸡毒支原体产品中的应用，所述鸡毒支原体LAMP检测方法可以鉴别诊断前述混合“感染”情况下的鸡毒支原体强毒株和弱毒疫苗株F株。...
- 胡思顺刘洋洋毕丁仁李自力刘军发张海燕周文舒晓倩
- 文献传递
- 猪伪狂犬病和传染性胸膜肺炎混合感染的诊断与防制被引量：2
- 2004年
- 王贵平何启盖刘军发刘正飞吴斌陈焕春石勇冷光敏
- 关键词：胸膜肺炎伪狂犬病病毒阿氏病病毒新生仔猪
- 胸膜肺炎放线杆菌PCR定向突变系统的初步建立及胸膜肺炎放线杆菌OmlA-ELISA检测方法的建立
- 猪传染性胸膜肺炎/(Porcine Contagious Pleuropneumonia，PCP/)是由胸膜肺炎放线杆菌/(Actinobacillus pleuropneumoniae，APP/)引起的猪的一种高度接触...
- 刘军发
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌动物回归试验血清学检测
- 文献传递
- 胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及毒素apxⅢA基因的克隆和表达
- 该试验用LMFA-1培养基培养胸膜肺炎放线杆菌LZ02-1株,并对LZ02-1株进行了染色镜检、NAD依赖试验、溶血实验和脲酶试验等生理生化特性试验,结果与文献中的描述一致.另外从湖北、湖南、河南、江西、上海、广东、浙江...
- 刘军发
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌PCR检测
- 文献传递
- 致病性猪沙门菌四环素耐药基因tetB的PCR检测被引量：8
- 2007年
- 目的检测临床分离猪源致病性沙门菌四环素的耐药基因,确定沙门菌四环素耐药基因类型。方法用KB法测定分离株对四环素等21种抗生素的耐药情况,用PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG及tetK,并对扩增产物进行测序。结果临床分离株全部对四环素耐药,33株沙门菌中有29株扩增出tetB特异性片段,基因序列与参考菌的同源性为99%,tetB检测与药敏试验阳性符合率为87.9%。结论tetB的PCR检测对四环素耐药性具有较高的特异性,tetB基因是决定本试验中临床分离株四环素耐药的主要基因,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了依据。
- 刘维红徐引弟郭爱珍贾爱卿刘军发陈焕春
- 关键词：沙门菌四环素耐药基因PCR
- 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅢA基因的克隆、序列分析及原核表达被引量：12
- 2003年
- 因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的 ,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列 (GenBankL1 2 1 4 5)设计了一对特异性引物 ,用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长 3 466bp的片段 ,然后将其克隆到pMD 1 8T中 ,经酶切鉴定和序列分析表明克隆是成功的 ;再将apxⅢA插入到原核表达载体pET 2 8b后 ,转化BL2 1 (DE3) ,在IPTG诱导下获得高效表达 ,经Westernblotting检测证实表达产物有活性。以表达产物包被ELISA板 ,建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。
- 陈汉阳刘军发何启盖肖少波陈焕春
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌克隆原核表达
- 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87～ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板 ,建立了检测毒素I血清抗体的ELISA方法。临床应用表明 。
- 刘建杰何启盖陈焕春吴斌徐晓娟刘军发唐先春贝为成
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌毒素ELISA检测
- 用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌
- 本试验设计合成了1对引物,序列分别为:上游引物5′CCgACTTTTAAATCCgT 3′;下游引物5′gAACAgTTgTTCgCTAA3′,将胸膜肺炎放线杆菌生物Ⅰ型血清2,4,6,9,10型标准菌株在合适的培养基上...
- 刘军发何启盖陈焕春吴斌曹胜波徐引弟王革非刘正飞逯忠新
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌PCR
- 文献传递
- 猪伪狂犬病和传染性胸膜肺炎混合感染被引量：9
- 2004年
- 王贵平何启盖刘军发刘正飞吴斌陈焕春石勇冷光敏
- 关键词：伪狂犬病传染性胸膜肺炎
- 猪环状病毒2型的PCR检测方法的建立及应用被引量：96
- 2001年
- 根据国外已发表的猪环状病毒 2型 (PCV 2 )的全基因组序列 ,设计一对 2型特异性引物 ,对可疑病料进行PCR扩增。将扩增产物连接到pMD 18 T载体上并克隆到大肠杆菌DH5α中 ,经提取质粒进行PCR、酶切、测序鉴定 ,证明扩增出了PCV 2的目的片段。将测序结果与GenBank收录的PCV 2序列进行比较 ,发现同源性均在90 %以上。用该PCR方法在 43份可疑病料中检测到了 12份PCV 2阳性病料 。
- 曹胜波陈焕春肖少波何启盖徐引弟刘军发
- 关键词：聚合酶链反应
