冯子煜
- 作品数：13 被引量：27H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省卫生厅医学科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 长链非编码RNA染色体失活特异转录本靶向调控微小RNA-106a-5p影响肾癌细胞增殖和凋亡的研究被引量：3
- 2020年
- 目的探讨长链非编码RNA染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)靶向调控微小RNA(miRNA,miR)-106a-5p对肾癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人肾癌ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞和正常肾脏上皮细胞HK-2中XIST的表达水平。将体外培养的Caki-2细胞分为Empty组(转染空白载体)和XIST组(转染XIST过表达载体),采用RT-qPCR检测各组细胞中XIST和miR-106a-5p的表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测各实验组细胞增殖和凋亡。采用双荧光素酶报告基因实验检测XIST和miR-106a-5p的靶向结合关系。将miR-106a-5p激动剂与XIST过表达质粒共转染后观察上调miR-106a-5p表达对XIST过表达的Caki-2细胞增殖和凋亡的影响。多组间比较使用单因素方差分析,组间多重比较采用学生纽曼·基尔斯(Student-Newman-Keuls,SNK)-q,两组间比较采用独立样本t检验。结果与HK2细胞比较,ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞中XIST的表达水平明显降低(相对表达量分别为0.516±0.031、0.605±0.021、0.241±0.024、0.355±0.042,t=11.666、11.321、20.321、12.992,P均<0.05)。与Empty组比较,过表达XIST组细胞中XIST的表达水平升高(相对表达量为175.829±1.021,t=20.471,P<0.05)、细胞增殖能力降低(为对照组0.759倍,t=6.388,P<0.05)、细胞凋亡增加(为对照组1.304倍,t=11.371,P<0.05),而细胞中miR-106a-5p的表达水平明显降低(相对表达量为0.415±0.035,t=13.717,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-106a-5p可与XIST靶向结合。转染miR-106a-5p激动剂成功上调miR-106a-5p表达后,过表达XIST对Caki-2细胞增殖的抑制作用及促凋亡作用明显逆转。结论过表达XIST可通过靶向调控miR-106a-5p抑制肾癌Caki-2细胞增殖并促进其凋亡。
- 王淑娟武玉东武新超冯子煜
- 关键词：肾癌
- 后腹腔镜肾癌根治性切除术52例临床体会被引量：5
- 2009年
- 目的探讨后腹腔镜肾癌根治性切除术的手术治疗方法和临床体会。方法回顾研究后腹腔镜肾切除术的临床资料。肾脏肿瘤共52例。结果手术均获成功。所有患者均未输血,无腹腔脏器损伤、膈肌损伤、皮下气肿等并发症。手术时间70～180min,平均100min;术中出血50～200ml,平均90ml;引流管拔除时间24～72h;术后12～24h进流食;术后1～2d下床活动;术后6～8d出院。随访1年,患者无肿瘤种植及复发。结论后腹腔镜肾癌根治性切除术具有创伤小、恢复快、出血少、对腹腔脏器干扰少、住院时间短等优点,在手术器械改进和手术技巧熟练的情况下,疗效优于开放手术。具有良好的临床应用前景。
- 冯子煜杨锦建徐海亮
- 关键词：后腹腔镜肾癌根治性切除术
- 白细胞介素-37通过调控红细胞膜蛋白带4.1类似物4a的反义RNA1/微小RNA-106b-5p轴降低肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力
- 2021年
- 目的:探讨白细胞介素(IL)-37对肾癌细胞786-O增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:将肾癌细胞786-O分为对照组、不同剂量(12.5、50.0、200.0 ng/ml)重组IL-37蛋白组、pcDNA组、pcDNA-红细胞膜蛋白带4.1类似物4a的反义RNA1(EPB41L4A-AS1)组、200 ng/ml IL-37+si-NC组和200 ng/ml IL-37+si-EPB41L4A-AS1组,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell检测细胞侵袭,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测EPB41L4A-AS1和miR-106b-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证EPB41L4A-AS1和miR-106b-5p调控关系。两组间比较行t检验;多组间比较采用单因素方差分析,组间进一步两两比较行LSD-t检验。结果:12.5、50、200 ng/ml IL-37组786-O细胞吸光度(A)值(0.58±0.02、0.43±0.03、0.29±0.02比0.69±0.06,F=207.113,P<0.05)、克隆形成数[(114.33±6.61)、(87.33±5.22)、(51.33±4.92)个比(139.44±9.49)个,F=277.041,P<0.05]、划痕愈合率[(69.03±0.35)%、(54.9±1.84)%、(38.81±2.73)%比(85.08±0.91)%,F=1191.221,P<0.05]和侵袭数[(91.44±5.68)、(70.89±2.85)、(48.78±6.00)个比(112.44±6.62)个,F=223.386,P<0.05]均低于对照组,差异均有统计学意义,细胞中EPB41L4A-AS1表达高于对照组(1.39±0.15、1.71±0.18、2.18±0.20比1.01±0.10,F=84.386,P<0.05),差异均有统计学意义,miR-106b-5p表达低于对照组(0.82±0.06、0.60±0.09、0.40±0.06比1.00±0.12,F=82.545,P<0.05),差异均有统计学意义,且呈剂量依赖性。pcDNA-EPB41L4A-AS1组786-O细胞(0.23±0.02比0.69±0.05,t=25.626,P<0.05)、克隆形成数[(45.33±3.32)个比(137.78±7.01)个,t=35.757,P<0.05]、划痕愈合率[(35.01±3.27)%比(85.11±1.29)%,t=42.757,P<0.05]和侵袭数[(44.56±4.48)个比(109.44±8.59)个,t=20.091,P<0.05]均降低,差异均有统计学意义。EPB41L4A-AS1可靶向负调控miR-106b-5p。200 ng/ml IL-37+si-EPB41L4A-AS1组786-O细胞中EPB41L4A-AS1表达低于200 ng/ml IL-37+si-NC组(1.14±0.13比2.49±0.19,t=17.5
- 毕建朋顾朝辉冯子煜贾占奎杨锦建杨艳芳张潍平
- 关键词：肾癌微小RNA
- 后腹腔镜肾输尿管全切加腹膜后肾周区域淋巴结清扫与开放手术治疗UUT-TCC疗效比较被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨后腹腔镜技术与开放手术治疗上尿路移行细胞癌（upperurinarytracttransitionalcellcarcinoma，UUT—TCC）的效果及优势。方法：回顾性分析2009年11月～2012年12月间，我院采用后腹腔镜下肾输尿管根治性切除术加腹膜后。肾周区域淋巴结清扫术治疗肾盂输尿管癌患者23例（腹腔镜组），并与同期14例行传统开放性肾输尿管切除术患者（开放术组）的手术时间、出血量、肿瘤学预后等指标进行比较。结果：腹腔镜组患者经术后病理检查，肾盂癌24例，输尿管癌10例，输尿管癌伴膀胱癌3例，其中腹腔镜组和开放组淋巴结转移各1例。同时研究发现：①腹腔镜组与开放术组比较，手术时间缩短，出血量明显减少，术后肠胃功能恢复快，术后住院时间短，差异有统计学意义（P〈0．05）；②两种术式肿瘤学预后在远处转移方面，腹腔镜组更少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：后腹腔镜下肾输尿管全长切除加经尿道膀胱袖状切除并腹膜后肾周区域淋巴结清扫治疗UUT—TCC具有创伤小、痛苦少、术后恢复快等优点，可能有更好的肿瘤学预后。
- 孙科贾占奎顾朝辉金志波冯子煜姚文诚曾甫清杨锦建
- 关键词：上尿路移行细胞癌腹膜后淋巴结清扫术
- 微小RNA-93靶向大型肿瘤抑制因子2对肾癌细胞GRC-1增殖及凋亡的影响被引量：6
- 2017年
- 目的观察微小RNA（miRNA，miR）-93靶向大型肿瘤抑制因子2（LATS2）对肾癌细胞GRC-1增殖及凋亡的影响。方法选取人肾癌细胞GRC-1，双荧光素酶报告基因实验验证miR-93与LATS2的靶向关系。分别转染Neg-miR、pre-miR-93、anti-miR-93至肾癌细胞GRC-1，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测miR-93表达，Western blot检测LATS2蛋白表达，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果miR-93与LATS2存在结合位点。与转染Neg-miR比较，共转染pre-miR-93与LATS2-wt可使GRC-1荧光素酶活性降低（P＝0.000）。与Neg-miR组比较，pre-miR-93组miR-93表达上调，LATS2蛋白表达降低（P＝0.000）；anti-miR-93组miR-93表达降低，LATS2蛋白表达增高（P＝0.000）。与Neg-miR组比较，pre-miR-93组细胞增殖活性增高，同时凋亡率降低（P＝0.000）；anti-miR-93组细胞增殖活性降低，同时凋亡率增高（P＝0.000）。结论miR-93可通过靶向LATS2调控肾癌细胞增殖及凋亡。
- 冯子煜顾朝辉李帅张学冲兰东阳刘秉乾王义昆贾占奎杨锦建武玉东
- 关键词：肾癌脱噬作用
- 后腹腔镜手术治疗重复肾重复输尿管畸形(附9例报告)
- 贾占奎杨锦建冯子煜金志波黄镇
- FLOT1基因小干扰RNA联合姜黄素在体外诱导肾癌细胞凋亡的机制被引量：3
- 2018年
- 目的探讨FLOT1基因小干扰RNA（siRNA）联合姜黄素对肾癌细胞凋亡的影响及其机制。方法以LipofeetamineTM2000为载体，将FLOT1-siRNA转染人肾癌786-0细胞，Westernblot检测转染siRNA后的细胞中FLOTl的蛋白表达。后续研究分FLOT1-siRNA组、姜黄素组和FLOTl-siRNA＋姜黄素组进行细胞干预，并设置空白对照组，细胞计数试剂盒（CCK-8）及流式细胞仪分别检测4组细胞活力及凋亡率；H2DCFHDA探针检测4组细胞ROS含量；Westernblot检测4组细胞磷酸化信号转导与转录激活因子-3（p-STAT3）及信号转导与转录激活因子-3（STAT3）信号通路下游增殖细胞核抗原（PCNA）和B细胞淋巴瘤／白血病-2相关X蛋白（bax）的蛋白表达。结果FLOT1-siRNA转染786-0细胞后FLOTl的表达（0．087±0．010）明显受到抑制，与空白对照组（0．454±0．038）比较差异有统计学意义（t=16．177，P=0．000）。si-FLOT1（0．491±0．053）或姜黄素（0．542±0．058）均可抑制786．0细胞活力，诱导786-0细胞凋亡（18．22±1．07）％、（12．39±0．86）％及ROS产生（189．5±8．2）、（147．7±7．1），下调p-STAT3（0．118±0．014）、（0．110±0．012）和PCNA（0．229±0．025）、（0．302±0．034）表达，上调bax（0.206±0．021）、（0．123±0．014）表达，与NC组比较差异均有统计学意义（0．792±0．065）、（1．62±0．25）％、（57．7±3．5）、（0．202±0．023）、（0．577±0．049）、（0．069±0．010）（t=6．736、7．378、12．796、10．112、7．186、2．832，P=0．0130、0．000、0．000、0．000、0．000、0．022），联合使用si-FLOT1和姜黄素对786．0细胞活力（0．378±0．044）抑制、细胞凋亡（24．18±1．22）％及ROS产生（249．3±9．4）诱导、p-STAT3（0．054±0．008）和PCNA表达（0．135±0．016）下调及bax表达（0．411±0．038）上调作用更明显，且与单一的si-FLOT1或姜黄素比较差异均有统计学
- 李帅顾朝辉冯子煜兰东阳姚文诚刘秉乾贾占奎杨锦建武玉东
- 关键词：肾癌姜黄素脱噬作用
- 微小RNA-149-5p调控丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1基因对肾癌细胞侵袭、迁移的影响被引量：4
- 2020年
- 目的探讨肿瘤抑制因子微小RNA(miRNA,miR)-149-5p对肾癌细胞转移潜能的影响及机制。方法GRC-1细胞分成miR-149-5p组(转染miR-149-5p mimics)、miR-NC组(转染mimics control)、miR-149-5p+丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)组(共转染miR-149-5p mimics、pcDNA3.1-SRPK1)、miR-149-5p+vector组(共转染miR-149-5p mimics、pcDNA3.1)。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-149-5p水平,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白水平。利用在线靶基因预测软件发现SRPK1可能是miR-149-5p的靶基因,双荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。应用SPSS 21.0统计软件分析。结果miR-149-5p组的GRC-1细胞中miR-149-5p(2.69±0.27比1.01±0.08)和E-cadherin(0.81±0.09比0.42±0.05)水平显著高于miR-NC组,侵袭数目[(70.81±6.35)个比(110.64±9.67)个]、迁移数目[(108.46±9.27)个比(162.76±12.71)个]、N-cadherin(0.46±0.05比0.79±0.11)和SRPK1(0.45±0.06比0.92±0.08)蛋白水平显著低于miR-NC组,差异均有统计学意义(FmiR-149-5p=95.385,F侵袭数目=20.216,F迁移数目=22.010,FN-cadherin=15.100,FE-cadherin=31.331,FSRPK1=31.785,P<0.05)。共转染SRPK1野生型质粒的miR-149-5p组细胞荧光素酶活性(0.37±0.04比1.00±0.11)显著低于miR-NC组,差异有统计学意义(t=16.150,P<0.05)。共转染SRPK1突变型质粒的miR-149-5p组细胞荧光素酶活性(0.99±0.10比1.00±0.09)与miR-NC组比较差异无统计学意义(t=0.220,P>0.05)。miR-149-5p+SRPK1组的GRC-1细胞中E-cadherin(0.45±0.04比0.80±0.08)水平显著低于miR-149-5p+vector组,侵袭数目[(99.51±7.48)个比(71.84±5.37)个]、迁移数目[(145.06±11.14)个比(107.63±10.20)个]、N-cadherin(0.86±0.10比0.47±0.04)和SRPK1(0.89±0.06比0.50±0.07)蛋白水平显著高于miR-149-5p+vector组,差异均有统计学意义(tSRPK1=7.327,t侵袭数目=5.205,t迁移数目=4.292,tN-cadherin=6.272,tE-cadherin=6.778,P<0.05)。结论�
- 毕建朋顾朝辉冯子煜贾占奎杨锦建杨艳芳
- 关键词：肾癌
- 长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8通过靶向微小RNA-224-3p调控肾癌细胞增殖、侵袭迁移以及顺铂敏感性
- 2021年
- 目的探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8(lncRNA SNHG8)对肾癌细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SNHG8和微小RNA(miR)-224-3p表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和多药耐药基因1(MDR1)蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率和顺铂半数抑制浓度(IC50);Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光素酶报告实验检测SNHG8和miR-224-3p的靶向关系。两组比较采用t检验。结果肾癌细胞系ACHN、786-O和A498中SNHG8高表达(1.05±0.09比4.58±0.47、6.19±0.52、5.37±0.48,t=22.130、29.219、26.538,P<0.05),miR-224-3p低表达(1.02±0.08比0.53±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08,t=13.829、18.300、14.584,P<0.05)。与si-con组相比,si-SNHG8组,肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低,cleaved Caspase-3表达升高,细胞存活率降低[(69.86±6.37)%比(96.42±9.26)%,t=7.089,P<0.05],迁移和侵袭数[(175.64±12.20)个比(292.70±20.45)个、(92.81±8.38)个比(147.24±15.93)个,t=14.748、9.072,P<0.05]降低,凋亡率升高[(19.48±2.28)%比(4.28±0.64)%,t=19.256,P<0.05],顺铂IC50值降低(1.47±0.14比7.81±0.22,t=19.454,P<0.05)。过表达miR-224-3p后,肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低,cleaved Caspase-3表达升高,细胞存活率降低[(67.36±8.65)%比(98.24±9.53)%,t=7.198,P<0.05],迁移和侵袭数[(155.81±16.67)个比(274.73±28.61)个、(72.96±8.35)个比(156.61±14.28)个,t=10.774、15.170,P<0.05]降低,凋亡率升高[(18.49±2.28)%比(4.67±0.63)%,t=17.527,P<0.05],顺铂IC50值降低(1.79±0.15比6.72±0.26,t=49.273,P<0.05)。结论沉默SNHG8可抑制肾癌细胞786-O增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,增强其对顺铂的敏感性;其机制可能与miR-224-3p有关。
- 毕建朋顾朝辉冯子煜贾占奎杨锦建杨艳芳张潍平
- 关键词：肾癌增殖顺铂敏感性
- 甲状腺激素和前列腺癌的孟德尔随机化研究
- 2024年
- 目的进行孟德尔随机化(MR)研究来阐明促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)和膀胱癌、肾癌和前列腺癌之间的因果关系。方法为了进行研究,构建一个遗传工具,通过全基因组关联研究确定分别与TSH和FT4相关的51个和25个单核苷酸多态性(SNPs)(P<5×10^(-8))。这些遗传标记来自甲状腺组学协会GWAS数据。膀胱癌、肾癌和前列腺癌的数据基于UK Biobank和Kaiser Permanente关于成人健康和衰老队列的遗传流行病学研究(GERA)。使用负方差加权(IVW)方法来估计遗传预测的甲状腺功能和泌尿系统肿瘤风险之间的因果关系。结果在膀胱癌的MR分析中,共包括48个与TSH相关的SNPs和19个与FT4相关的SNPs,其中一个SNP(rs1157994)在膀胱癌的数据集中不可用。MR分析显示,没有观察到遗传预测的TSH[比值比(OR)=0.975,95%可信区间(CI):0.807~1.177,P>0.05]或FT4(OR=0.812,95%CI:0.631~1.045,P>0.05)对膀胱癌风险的因果影响。在肾癌的分析中,MR分析中总共包括49个与TSH相关的SNPs和19个与FT4相关的SNPs。结果表明,遗传预测的TSH(OR=0.919,95%CI:0.747~1.130,P>0.05)或FT4(OR=1.247,95%CI:0.928~1.675,P>0.05)对肾癌风险没有因果影响。在前列腺癌的分析中,共有49个与TSH连锁的SNPs和19个与FT4相关的SNPs被纳入MR分析。IVW方法的应用表明,TSH和前列腺癌的低风险之间存在因果关系(OR=0.927,95%CI:0.861~0.998,P<0.05)。结论TSH和前列腺癌的低风险之间存在因果关系,而FT4与TSH在其他泌尿系肿瘤不存在因果关系。
- 张学冲金吉秀李帅冯子煜武玉东
- 关键词：促甲状腺激素甲状腺素甲状腺激素
