付晓岚
- 作品数：13 被引量：91H指数：5
- 供职机构：第三军医大学基础部全军免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种新的FR4剪切变异体的确认和鉴定
- 2009年
- 目的确认并鉴定一个新发现的小鼠FR4剪切变异体,并在mRNA水平检测其在小鼠脾淋巴细胞亚群中的表达。方法PCR克隆FR4CDS区时发现存在一个新的剪切变异体,酶切和测序予以鉴定,Western blot检测脾细胞中变异体的表达,流式分选脾细胞中CD8+、CD4+CD25-、CD4+CD25+T淋巴细胞,RT-PCR检测新的变异体在各细胞亚群中的表达。结果凝胶电泳显示存在一个CDS区碱基数大于野生型FR4的条带,测序表明此条带在野生型外显子基础上包含一个内含子成分,Western blotting证实新发现的剪切体在蛋白水平也存在,脾细胞中不同T细胞亚群均表达此新型变异体。结论mRNA和蛋白水平均证实存在一种新型FR4剪切变异体,不同T细胞亚群均表达此变异体暗示其在淋巴细胞摄取叶酸功能上不可或缺。
- 赵韧倪兵贾正才田易付晓岚吴玉章
- 关键词：叶酸受体T细胞亚群
- 血清游离精氨酸的快速检测被引量：1
- 2003年
- 建立快速、准确的精氨酸定量检测方法。采用 6 30 0黄金系统氨基酸分析仪 ,在锂柱生理体液分析方法基础上 ,建立血清游离精氨酸 (ARG)快速测定方法。血清样本经磺基水杨酸沉淀蛋白后取上清液进行色谱分析 ,色谱柱为Beckman公司阳离子交换柱 (12cm× 4 .0mm) ;流动相为 2 0mmol·L- 1 柠檬酸锂水溶液 ,流速为 2 0ml·h- 1 ;比色波长 5 70nm。该法检测精氨酸浓度的线性范围为 5mg·L- 1 ～ 5 0mg·L- 1 ,相关系数 0 .99834,最低检测限 1mg·L- 1 ,重复性 :日内RSD 0 .4 0 % ,日间RSD 0 .5 5 % ,回收率 97.6 7%～ 10 0 .6 7% (平均值 99.0 7% ) ;整个实验过程耗时 2 8min。该法简便、快速、准确、可靠 ,适用于临床和科研工作。
- 孙玮路鞠付晓岚苟俊尤忠义
- 关键词：精氨酸氨基酸分析仪血清
- 维甲酸诱导神经管畸形发生过程中神经干细胞的变化研究被引量：17
- 2003年
- 目的 了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法 分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin)间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色 ,以流式细胞术检测。结果 ①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8.5d时呈高峰 ,此后逐步下降 ,新生期仍保持较高水平 ;NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠 ,尤以E8.5d下降显著 ;出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0 G1 期细胞数百分比明显高于正常组 ,S期细胞数百分比则明显低于正常组。
- 李红丽蔡文琴杨忠李泽桂李巍付晓岚
- 关键词：维甲酸神经干细胞神经巢蛋白神经管缺陷NTD
- 慢性乙型肝炎患者HBV特异性细胞毒性T细胞PD-1的表达研究被引量：16
- 2007年
- 目的检测慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中HBV特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞表面细胞程序性死亡受体1(programmed cell death1,PD-1)的表达情况。方法采集慢性乙型肝炎患者外周血,直接离体情况下利用MHC-I-肽-五聚体技术标定HBV表位特异性细胞毒性T淋巴细胞以及荧光抗体标记细胞表面PD-1分子,经流式细胞仪检测分析。结果在慢性乙型肝炎患者,HBV核心抗原18-27特异性CTL表达PD-1上调,达(79.0±12.5)%,显著高于总CD8+T细胞(27.7±14.8)%,以及CMV特异性CTL(20.6±5.9)%。结论慢性乙肝患者HBV特异性CTL高表达PD-1分子,可能与慢性乙肝患者HBV特异性CTL功能低下密切相关。
- 谢谆怡陈永文付晓岚赵婷婷吴玉章
- 关键词：慢性乙型肝炎细胞毒性T淋巴细胞
- 乙型肝炎患者HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T细胞的研究被引量：20
- 2007年
- 目的对乙肝患者尤其是慢性乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T细胞(CTL)的分布频率及功能状态进行研究。方法应用多色流式分析结合HLA-A*0201限制性表位肽/五聚体复合物技术对乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性CTL进行精确定量,应用胞内细胞因子染色技术结合流式细胞分析技术研究HBcAg18-27表位特异性CTL穿孔素,颗粒酶B,干扰素-γ的分泌水平。结果在急性与慢性乙型肝炎患者外周血中均可测到HBcAg18-27表位特异性CTL,两者的分布频率存在显著性差异。慢性乙肝患者外周血中HBcAg18-27表位特异性CTL分泌穿孔素,颗粒酶B,干扰素的水平明显降低。结论HBcAg18-27表位特异性CTL在乙型肝炎病毒清除中起到重要作用,慢性乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性CTL存在功能缺陷。
- 张蓓付晓岚王靖雪韩俊峰吴玉章
- 关键词：乙型肝炎T淋巴细胞细胞毒性
- 慢性乙型肝炎患者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞的变化和意义被引量：17
- 2007年
- 目的观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的频率,特征性表型及与临床指标的相关性。方法采集44例慢性乙型肝炎,29例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的频率。所有病例均经酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量及肝功能的检测。结果慢性乙型肝炎组Treg的频率(5.02%±2.07%)显著高于正常对照组(3.35%±1.51%,P<0.05);Foxp3在Treg上特异性表达,慢性乙型肝炎组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的频率(2.05%±1.03%)显著高于正常对照组(1.30%±0.68%,P<0.05);慢性乙型肝炎组Treg的频率与病毒载量呈正相关。结论Treg在慢性乙型肝炎感染者中明显增高,并与病毒载量相关,提示Treg在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能是造成乙肝病毒感染慢性化的重要因素。
- 张蓓付晓岚王靖雪韩俊峰吴玉章
- 关键词：乙型肝炎CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫调节
- 慢性乙肝患者肝内IL-23/IL-17信号途径与Treg细胞之间的相互作用被引量：12
- 2011年
- 目的探讨慢性乙肝患者体内FOXP3蛋白与炎症因子IL-23/IL-17信号途径之间的相互关系。方法采用qPCR、流式细胞术分析了39例慢性乙肝急性发作(ACLF)、56例慢性乙肝(CHB)及32例健康对照(HC)肝组织及外周血中的FOXP3及IL-23/IL-17信号途径相关炎症因子的表达,免疫组化及荧光共聚焦检测FOXP3在肝组织内的表达,定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附试验检测HBsAg浓度,全自动生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)水平。结果 CHB患者外周血及肝组织内FOXP3 mRNA表达明显升高,肝内的FOXP3表达水平与患者血液中的HBV DNA水平及乙肝表面抗原(HB-sAg)浓度明显呈正相关。与健康对照组相比,慢性乙肝患者肝脏内的IL-23/IL-17信号通路相关的促炎因子也明显升高,且与FOXP3的表达水平升高呈正相关。结论 HBV感染的肝脏内IL-23/IL-17信号通路的活化并没有有效地被宿主的免疫机制如Treg细胞所抑制。因此,IL-23/IL-17信号通路可能是维持HBV病毒持续性感染的一个机制。
- 郑燕华王庆红田易黄泽民田志强付晓岚倪兵
- 关键词：TREG细胞FOXP3IL-23IL-17
- 慢性乙型肝炎患者外周血淋巴及单核细胞表面B7-H1表达研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达。结果在慢性乙肝患者,T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,与健康对照无差异;单核细胞表面B7-H1的表达率为(19.17±11.64)%,显著高于健康对照的(7.30±5.49)%(P<0.01),且B7-H1的表达与患者血浆ALT水平成正相关(r=0.423,P<0.01)。结论慢性乙肝患者外周血T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,单核细胞B7-H1表达上调,且与ALT水平正相关,提示B7-H1可能与乙肝病毒感染慢性化相关。
- 谢谆怡陈永文付晓岚杨承英吴玉章
- 关键词：B淋巴细胞单核细胞B7-H1
- CD4+CD25+调节性T细胞在慢性乙型肝炎中的免疫调节作用
- 目的:观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的频率,表型特征及对病毒特异性CTL的免疫调节作用。方法:采集53例慢性乙型肝炎,26例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4+CD2...
- 张蓓付晓岚吴玉章
- 文献传递
- 烟曲霉及其渗出物对人中性粒细胞呼吸爆发的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨烟曲霉及其渗出物(AfD)对肝移植患者和正常人中性粒细胞(PMN)O^-_2:爆发水平的影响,为进一步研究肝移植后患者易感烟曲霉的发生机制奠定基础。方法:用烟曲霉孢子悬液、烟曲霉孢子悬液+烟曲霉渗出物的混合液分别刺激正常人和肝移植后患者的PMN,1.5小时后流式细胞术测定其O^-_2(超氧阴离子)水平。结果:分离纯化获得的中性粒细胞纯度较高,其比例>98%,台盼蓝排斥法测活细胞>98%。相同条件下,孢子悬液、孢子与AfD混合液刺激正常人PMN产生的O^-_2呼吸爆发水平差异无统计学意义,但二者刺激肝移植患者PMN时,O^-_2爆发水平有显著差异(P<0.01)、正常人与患者的PMN所爆发O^-_2水平有显著差异(P<0.01)。结论:肝移植患者的PMN与混合液所爆发的O^-_2水平较正常人明显降低,提示这可能与肝移植患者易感烟曲霉菌有一定关系。
- 陈先华付晓岚郝飞
- 关键词：PMN流式细胞术
