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糖原合成激酶-3β在内质网应激调控胃癌细胞侵袭中的作用: 2016年; 目的:探讨糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)在内质网应激调控胃癌细胞侵袭中的作用。方法:以浓度为3μmol/L的衣霉素(Tunicamycin,TM)单独及联合运用浓度为10mmol/L的氯化锂(Lithium chloride,LiCl)处理胃癌SGC7901细胞24h,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,并应用Western blot检测GSK-3β蛋白Ser9位点的表达。结果:Transwell侵袭实验显示,联合运用TM+LiCl处理胃癌SGC7901细胞24h,可明显改善TM所诱导的内质网应激对细胞侵袭性力的影响;Western blot结果显示,相对于对照组,TM处理组Ser9-GSK-3β蛋白的表达明显降低,联合运用TM+LiCl,可明显升高Ser9-GSK-3β蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:抑制GSK-3β的表达,可通过降低内质网应激明显增强胃癌细胞的侵袭力。; 杜康马敏付政祺; 关键词：GSK-3Β 内质网应激胃癌

靶向ER-α36的vshRNA真核表达慢病毒载体的构建、鉴定及其对胃癌细胞增殖的影响被引量：1: 2014年; 目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测序鉴定。转染293T细胞,包装产生慢病毒,感染胃癌SGC7901细胞株。荧光显微镜下观察SGC7901感染后荧光表达情况,real-time PCR和Western blotting方法检测ER-α36的表达变化。用1×10-10mol/L的17β-雌二醇处理沉默ER-α36的SGC7901细胞,用细胞计数法观察细胞增殖能力的变化及检测相关下游信号通路分子Src、ERK1/2、cyclin D1表达的变化。结果:阳性克隆PCR及测序证明成功构建慢病毒载体LV-ER-α36-RNAi,倒置显微镜下观察LV-ER-α36-RNAi慢病毒载体感染率达80%以上。Real-time PCR和Western blotting方法证实四环素(Te T)诱导下LV-ER-α36-RNAi明显抑制SGC7901细胞内ER-α36 mRNA和蛋白质的表达。与对照组相比,沉默ER-α36的SGC7901细胞增殖能力减弱,Src、ERK1/2、cyclin D1蛋白表达明显降低,Src蛋白活化能力减弱(P<0.05)。结论:我们构建的Te T诱导靶向ER-α36的vshRNA慢病毒载体LVER-α36-RNAi,可明显沉默ER-α36的表达,为研究ER-α36蛋白的作用机理提供实验依据,ER-α36与胃癌细胞等肿瘤细胞的增殖有关。; 王绪明黄萱付政祺邹丰张尚昆王兆一刘丽江; 关键词：SGC7901细胞慢病毒载体

GSK-3β介导了内质网应激诱导的tau蛋白过度磷酸化及大鼠空间记忆障碍: 本文主要从以下几部分展开：　　第一部分　　内质网应激通过激活GSK-3 β诱导tau蛋白过度磷酸化及大鼠空间记忆障碍阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease，AD）是一种最常见的神经退行性疾病。以细胞...; 付政祺; 关键词：TAU蛋白过度磷酸化空间记忆障碍; 文献传递

读片窗答案: 2015年; 术前影像学诊断鞍区及鞍上池肿块并脑积水。考虑：（1）颅咽管瘤；（2）生殖细胞瘤。手术及病理术中见肿瘤质软，呈暗红色鱼肉样，血供一般，上部及外侧边界清楚，视神经向上方移位，肿瘤下部与下丘脑粘连，界限不清楚，镜下分块大部切除肿瘤。镜下见瘤组织由大量胞浆透亮、; 周杰杜柏林付政祺; 关键词：读片窗答案术前影像学诊断生殖细胞瘤颅咽管瘤大部切除鞍上池

蔗糖梯度离心技术方法在提取内质网的应用被引量：1: 2011年; 目的:通过蔗糖梯度离心方法提取内质网,探讨在内质网提取过程中质量控制的关键要素。方法:本文利用蔗糖建立连续的密度梯度,通过超速离心提取HEK293/wt细胞中的内质网,并利用Western blot技术、内质网特异性抗体Bip/GRP78对内质网所处位置进行检测,确定内质网所在层面,成功提取高浓度、高质量的内质网。结果:通过对HEK293/wt细胞的破膜方法和离心时间进行调整,经Western blot技术检测,内质网位于蔗糖梯度的第10、11、12层。结论:选择合适的破膜方法和离心时间是成功提取高浓度、高质量内质网的关键。; 付政祺杨莹田青; 关键词：梯度离心

糖原合成激酶3β在内质网应激诱导的tau蛋白过度磷酸化中所起的重要作用: 背景:内质网(endoplasmic reticulum,ER)是一种非常重要的亚细胞结构,是分泌性蛋白及膜蛋白在细胞内进行折叠、修饰和组装的场所。ER内任一生理功能发生障碍如基因突变或机体的状态改变包括氧化应激、缺血、...; 付政祺杨莹田青王建枝; 关键词：GSK-3Β TAU; 文献传递

IFN-γ通过非依赖STAT1途径对人胃癌组织中P53表达的调控机制被引量：1: 2011年; 目的:探讨胃癌中IFN-γ通过非依赖STAT1途径对P53表达调控的作用及机制.方法:SGC7901经IFN-γ及STAT1反义寡核苷酸处理,RT-PCR及灰度分析法检测STAT1和p53mRNA水平变化,应用Hoechest33258观察细胞凋亡.人胃癌组织经免疫组织化学染色检测STAT1和P53蛋白.各组平均吸光度值通过t检验分析.结果:SGC7901细胞经IFN-γ处理后,STAT1和p53mRNA表达上升(P<0.05).经不同浓度STAT1反义寡核苷酸处理后,STAT1mRNA表达下降,有浓度依赖性(P<0.05).p53mRNA表达量始终低于未处理组(P<0.05).经IFN-γ和不同浓度STAT1反义寡核苷酸联合处理后,STAT1mRNA和蛋白表达较IFN-γ单独处理逐渐下降,有浓度依赖性(P<0.05),p53mRNA表达量始终高于IFN-γ单独处理组(P<0.05).所有处理组中,STAT1mRNA与p53mRNA表达无关.人胃癌组织经免疫组织化学染色检测,STAT1和P53蛋白表达无关.经IFN-γ和STAT1反义寡核苷酸处理后细胞无明显凋亡.结论:IFN-γ可通过非依赖STAT1途径促进胃癌组织中P53的表达.; 邓昊镇鸿燕陈莹付政祺刘丽江; 关键词：干扰素-Γ P53基因胃癌

靶向SET的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定: 2011年; 目的:针对PP2A内源性抑制剂SET基因的不同部位,构建靶向SET的shRNA真核表达质粒,鉴定并筛选出最佳抑制效率的表达质粒.方法:针对SET基因的不同部位设计4对短发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸片段,克隆到真核表达载体pGPU6中,构建靶向SET的shRNA真核表达质粒pGPU6/GFP/Neo-SET-shRNA-1、2、3、4.利用脂质体转染人胃癌细胞株BGC-823,Western blot法检测并筛选最佳抑制效率的shRNA表达质粒.结果:4个靶向SET的shRNA真核表达质粒pGPU6/GFP/Neo-SET-shRNA-1、2、3、4经限制性酶切和测序证实基因已正确插入,荧光显示转染效率可达到80%以上.Western blot法证实pGPU6/GFP/Neo-SET-shRNA-3明显降低BGC-823细胞内SET蛋白的表达.pGPU6/GFP/Neo-SET-shRNA-3对SET蛋白表达的抑制效应在72h达到最强.结论:成功构建靶向SET的shRNA真核表达质粒pGPU6/GFP/Neo-SET-shRNA-1、2、3、4,并筛选出最佳抑制效率的表达质粒,为今后研究SET在胃癌中的作用机理奠定了基础.; 师海蓉付政祺邓昊王绪明镇鸿燕陈莹刘丽江; 关键词：SET 短发卡RNA 蛋白磷酸酶2A

雌激素在衣霉素诱导的内质网应激调控胃癌细胞侵袭力中的作用及机制被引量：1: 2014年; 目的:探讨雌激素在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的内质网应激对胃癌细胞侵袭力的影响及机制.方法:以浓度为3μmol/L的TM单独及联合运用浓度为10-9 m o l/L的1 7β-雌二醇(17β-estradiol,E2)处理胃癌SGC7901细胞24h,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,并应用Western blot检测pPERK和糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)蛋白Ser9位点的表达.结果:Transwell侵袭实验显示,联合运用TM+E2处理胃癌SGC7901细胞24 h,可明显改善TM所诱导的内质网应激对细胞侵袭性力的影响.Western blot结果显示,相对于对照组,TM处理组pPERK蛋白的表达明显升高,而Ser9-GSK-3β蛋白的表达明显降低.联合运用TM+E2,可明显降低TM所致的pPERK蛋白的表达,升高Ser9-GSK-3β蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:雌激素可通过改善内质网应激,升高GSK-3β的Ser9位点磷酸化,抑制GSK-3β活性,从而明显增强胃癌细胞的侵袭力.; 付政祺邹丰李艳刘丽江; 关键词：17Β-雌二醇衣霉素胃癌肿瘤侵袭

GRP78在胃癌生长中的作用被引量：3: 2014年; 目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利用Western blotting检测人体胃癌组织、癌旁组织(肿瘤旁1cm处)和正常组织(远离肿瘤≥10 cm处)中GRP78蛋白的表达情况。利用Western blotting检测人胃癌细胞SGC7901和过表达GRP78的SGC7901-H78细胞(稳定转染GRP78)中GRP78和生长相关蛋白cyclin D1的表达情况。结果:(1)免疫组织化学检测发现:人体胃癌组织中GRP78表达水平明显高于癌旁组织和正常组织,且与性别、分化程度相关(P<0.05);(2)Western blotting检测发现:胃癌组织中GRP78蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常组织;(3)Western blotting检测发现:相对于SGC7901细胞,SGC7901-H78细胞中GRP78蛋白的表达明显升高,同时检测生长相关蛋白cyclin D1的表达发现,随着GRP78表达的上调,cyclin D1蛋白表达增加。结论:GRP78蛋白的高表达可能参与了胃癌细胞的生长。; 付政祺镇鸿燕刘丽江; 关键词：胃肿瘤葡萄糖调节蛋白78 细胞周期蛋白D1

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付政祺

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