亓英芳
- 作品数:7 被引量:25H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技基础性工作专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析被引量:6
- 2011年
- 以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯度的重组蛋白pdhA,为深入研究其功能奠定了基础。
- 王华南亓英芳朱婷于申业刘慧芳司微杨盛王加明冯拥军李素兰于秀婷王春来刘思国
- 关键词:结核分枝杆菌原核表达
- 牛分枝杆菌细胞壁相关蛋白表达及免疫原性分析
- 牛结核病是由牛分枝杆菌引起的严重危害奶牛业的人畜共患病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,对人类的健康也造成了威胁.传统的BCG苗保护力低,因此研究更加特异准确的结核病新型诊断方法并加快新型疫苗的...
- 亓英芳杜艳芬刘慧芳赫明雷司微倪洪波王春来刘思国
- 关键词:牛分枝杆菌OMPAWESTERN-BLOT免疫原性
- 文献传递
- 禽多杀性巴氏杆菌PCR诊断方法的建立被引量:18
- 2008年
- 亓英芳刘家森张在平刘思国曲连东
- 关键词:PCR技术禽多杀性巴氏杆菌现代分子生物学病原检测禽巴氏杆菌
- 结核分枝杆菌csdA基因的原核表达及其免疫原性
- 2010年
- 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 690 bp的csdA(cold-shock dead-box protein A)基因,经限制性酶切后,与pET28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中后,重组菌经0.2 mmol/L IPTG诱导表达了csdA蛋白及Ni-His-resin纯化蛋白,经Western-blot分析,鉴定了目的蛋白的反应原性。试验结果表明,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在64 ku处获得一目的条带,具有很好的免疫原性。证实,成功构建了重组表达质粒pET28a-csdA,获得了高纯度的重组蛋白,为深入研究csdA蛋白的功能奠定了基础。
- 王华南亓英芳杜艳芬刘慧芳司微于申业王加明杨盛李素兰冯拥军倪洪波王春来刘思国
- 关键词:结核分枝杆菌原核表达
- 两种基因型结核分枝杆菌的比较蛋白组学分析
- 背景:牛结核病不仅对奶牛养殖业造成了巨大的经济损失,而且严重威胁公共卫生安全。近年来出现的人结核病与牛结核病相互传染的情况,给结核病的彻底根除造成了巨大的困难。本实验室从西北一牛场中分离到2株结核分枝杆菌XB07001和...
- 亓英芳
- 关键词:牛分枝杆菌结核分枝杆菌蛋白质组学双向电泳质谱
- 文献传递
- 牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA的原核表达及免疫活性分析被引量:1
- 2009年
- 为验证牛分枝杆菌外膜蛋白A是否具有免疫活性,以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板扩增牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA,采用DNA重组技术将此基因片段连于表达载体pGEX6p-1,构建重组质粒pGEX6p-1-ompA,并将其转化到大肠杆菌中BL21(DE3)中,IPTG诱导(终浓度为0.1mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析。用glutathione sepharose4B纯化蛋白和Western blot分析该蛋白的免疫学活性。结果表明:pGEX6p-1-ompA以可溶形式表达,蛋白分子量大小为60kDa,与预计大小相符,纯化的蛋白具有良好的免疫学活性。
- 亓英芳黄瑛杜艳芬刘慧芳赫明雷司微倪洪波王春来刘思国
- 关键词:牛分枝杆菌原核表达纯化WESTERNBLOT
- 比较蛋白组学分析两株不同基因型的结核分枝杆菌
- 本文应用双向电泳技术,对来源于同一牛群的这2株不同基因的结核分枝杆菌的胞内蛋白进行了分离,挑选了26个有表达差异的蛋白进行解析,利用串联质谱技术鉴定出21个差异蛋白。其中,15个蛋白与生物体的多个关键代谢过程有关,包括小...
- 亓英芳王春来刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳赫明雷司微尹录欧阳凤菊倪洪波
- 关键词:结核分枝杆菌基因表达双向电泳技术
- 文献传递