于小娜
- 作品数：16 被引量：89H指数：5
- 供职机构：四川农业大学动物医学院禽病防治中心更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技攻关计划四川省重点科学建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因原核表达及其免疫原性研究
- 根据GenBank中人源大肠杆茵pilA基因序列,用OLIGO6．0设计PCR引物,对鸭源致病性大肠杆菌 pilA基因进行PCR扩增,原核表达及免疫原性检测,获得如下结果:对扩增的pilA基因进行pMD18-T载体克隆,...
- 于小娜汪铭书程安春李玲孙磊段泽钟传德陈孝跃
- 关键词：大肠杆菌I型菌毛原核表达免疫原性
- 文献传递
- 鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因原核表达及其免疫原性研究
- 本文根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,对鸭源致病性大肠杆菌pilA基因进行PCR扩增,原核表达及免疫原性检测,获得如下结果:对扩增的pilA基因进行pMD18-T载体克隆...
- 于小娜汪铭书程安春李玲孙磊段泽钟传德陈孝跃
- 关键词：大肠杆菌原核表达免疫原性
- 文献传递
- 鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因序列分析与原核表达产物免疫原性研究
- 本文根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列，用OLIG06.0设计PCR引物，对甘露糖敏感血凝试验(MSHA)检测阳性的鸭源致病性大肠杆菌pilA基因进行PCR扩增、序列测定及生物信息学分析;并对pilA基因进...
- 于小娜
- 关键词：致病性大肠杆菌PILA基因
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测鸭疫里默氏杆菌方法的建立和应用
- 根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌(RA)荚膜多糖蛋白基因序列(DQ151838),设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3．416X+ 39．492,相关系数1．...
- 段泽程安春汪铭书朱德康钟传德于小娜李玲仲崇岳陈孝跃
- 关键词：荧光定量PCR
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测鸭疫里默氏杆菌方法的建立和应用被引量：10
- 2008年
- 根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌(RA)荚膜多糖蛋白基因序列(DQ151838),设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3.416X+39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在100～108范围内检测曲线有良好的线性关系。该法的最适Mg2+、引物和探针浓度分别为4～5mmol/L、0.16～0.2μmol/L和0.16μmol/L,最低能够检测到RA的DNA模板为2.0copies/μL。1/10半数致死量的RA人工皮下注射感染7日龄樱桃谷鸭后2h即可在心、肝、肺、胸腺、食管中检测到RA核酸;感染后8h即可在心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、食管、气管、胸腺、法氏囊、十二指肠、直肠、血液和咽喉拭子检测到RA核酸,36～120h是RA在感染雏鸭除了咽喉、食管和气管各个组织器官繁殖数量最高峰期,其后逐渐下降。RA人工感染致死雏鸭的心、肝、脑RA分离和FQ-PCR检测符合率为100%。对临床送检具有典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭的肝脏、心血和脑组织的FQ-PCR检测的阳性率均为100%,而RA分离的阳性率分别只有74.3%(26/35)、82.9%(29/35)和91.4%(32/35)。FQ-PCR可用于鸭疫里默氏杆菌感染的快速诊断、流行病学调查和鸭产品的检疫等。
- 段泽程安春汪铭书朱德康仲崇岳钟传德于小娜李玲陈孝跃
- 关键词：荧光定量PCR
- 规模化鸭场鸭源致病性沙门氏菌的药物敏感性检测及耐药性分析被引量：17
- 2008年
- 钟传德程安春汪铭书李玲段泽于小娜仲崇岳陈孝跃
- 关键词：致病性沙门氏菌耐药性分析药物敏感性鸭源规模化猪霍乱沙门氏菌
- 雏鸭致病性大肠杆菌gyrA、parC和marOR基因与氟喹诺酮耐药性的研究
- 筛选临床分离的18株耐氟喹诺酮类药物的雏鸭致病性大肠杆茼,PCR扩增其gyrA的QRDR区、 parC的QRDR区和marOR基因片段,片断大小分别是205bp、462bp、409bp,并分别进行Hinf I限制性内切酶...
- 李玲汪铭书程安春于小娜钟传德段泽陈孝跃
- 关键词：致病性大肠杆菌氟喹诺酮类药物耐药性GYRAPARC
- 文献传递
- 猪链球菌病病原的生化分群鉴定和药敏试验被引量：26
- 2004年
- 对来自淇县、焦作、鹿邑等 2 4个地方的疑似链球菌病病料进行分离、纯化 ,并对分离的 13株典型链球菌做一系列的生化分群鉴定及药敏试验。结果证明 ,这 13株链球菌为 C群的有 3株 ,D群的有 4株 ,L 群、未知群的各 1株 ,E群的 4株。13株链球菌对所用 12种药物的敏感性也不同 ,而且同群的药敏结果也有差异。
- 杨霞卢中华张红英王亚宾金钺于小娜
- 关键词：链球菌病病原链球菌分群鉴定
- 我国部分地区规模化鸭场鸭源致病性沙门氏菌的药物敏感性检测及耐药性分析
- 采用WHO推荐的Kirby-Bauer法对我国16个地区规模化鸭场1999-2005年间感染沙门氏菌的患病和死亡鸭所分离到的175株鸭源致病性沙门氏菌进行了药敏试验。结果表明,菌株对37种抗菌药物的药敏结果令人吃惊,耐药...
- 钟传德程安春汪铭书李玲段泽于小娜仲崇岳陈孝跃
- 关键词：规模化鸭场致病性沙门氏菌耐药性
- 文献传递
- 鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因的原核表达及重组蛋白对强毒攻击的免疫保护作用被引量：9
- 2007年
- 根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,从鸭源致病性大肠杆菌GH1.2中扩增到pilA基因并将其克隆至pMD18-T载体,经PCR、酶切和DNA测序鉴定后,将鸭源致病性大肠杆菌pilA基因正向插入原核表达载体pET-32a(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点间,成功构建了重组表达质粒pET-32a-pilA。重组表达质粒pET-32a-pilA转化表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导,表达出了大小约为36kD的pilA重组蛋白。表达产物用镍柱亲和层析纯化,与等量弗氏佐剂混合制备pilA重组蛋白疫苗,分别在1日龄、8日龄时两次对雏鸭进行免疫,二免后2周测定鸭血清中的ELISA抗体效价,并以109PFU同源菌株GH1.2攻毒,根据攻毒后鸭的死亡率、E.coli分离率和各组织器官的病变等级来判定pilA重组蛋白的免疫保护效果。结果pilA重组蛋白免疫鸭的血清中ELISA抗体效价为1∶12800,全菌灭活苗免疫组的血清ELISA抗体效价为1∶200;同源菌株攻毒后,pilA重组蛋白免疫保护组鸭的死亡率、E.coli分离率和各组织器官的病变程度均比攻毒对照组下降且差异显著或极显著,与全菌灭活苗免组比较差异不显著。表明pilA重组蛋白对同源菌株GH1.2的感染具有一定的保护效果。
- 程安春于小娜汪铭书朱德康李玲孙磊陈孝跃
- 关键词：PILA基因原核表达
