丁薇
- 作品数：7 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属华山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 脂肪分化相关蛋白真核表达载体的构建及其对H9c2心肌细胞增殖和凋亡的影响
- 2011年
- 目的:构建编码脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)基因全长序列的真核表达载体,探讨ADRP过表达对软脂酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡有何影响。方法:(1)RT-PCR扩增编码ADRP全长的DNA序列,重组入pEGFP-C1质粒表达载体中,酶切、测序鉴定后转化大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,扩增后提取质粒并进行鉴定;采用脂质体转染法将鉴定后的重组质粒稳定转染H9c2心肌细胞;荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达情况;RT-qPCR和Western blotting检测ADRP表达情况;(2)采用MTT比色法和流式细胞术检测不同浓度软脂酸对细胞增殖和凋亡的影响。结果:(1)成功构建了真核质粒表达载体pEGFP-C1-ADRP,转染H9c2细胞后,荧光显微镜下观察发现细胞内有绿色荧光蛋白表达;RT-qPCR和Western blotting显示重组质粒转染H9c2细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平明显高于空质粒转染组和正常对照组(P<0.01);(2)经不同软脂酸刺激后,重组质粒转染H9c2细胞增殖抑制率和凋亡率均明显低于空质粒转染组和正常对照组(P<0.05)。结论:(1)成功获得了稳定表达ADRP的H9c2心肌细胞株;(2)软脂酸可抑制H9c2心肌细胞增殖并可诱导其凋亡,而ADRP高表达可对抗软脂酸的这一作用,表明ADRP对高脂环境中心肌细胞可能具有一定的保护作用。
- 鲍苑苑方舟周丽诺胡仁明丁薇
- 关键词：H9C2细胞棕榈酸细胞凋亡
- 代谢综合征患者血浆氨基末端B型利钠肽前体水平的观察
- 目的:观察代谢综合征患者与非代谢综合征患者血浆NT-proBNP水平的差异,探讨影响代谢综合征患者NT-proBNP水平的可能因素。方法:回顾分析2005～2009年间在我院内分泌科收治的代谢综合征患者(230例)和非代...
- 鲍苑苑周丽诺胡仁明丁薇
- 文献传递
- 精氨酸添加调控骨骼肌脂肪沉积分布的机理研究
- 实验背景及目的精氨酸对瘦素通路的调控被证实在动物的脂质沉积和分布中具有重要作用,但其作用机理尚不清楚。本论文通过使用瘦素受体基因敲除的糖脂代谢异常模式动物——db/db小鼠进行饲喂实验,系统的讨论了精氨酸(Arginin...
- 胡声迪丁薇马曦李德发
- 文献传递
- 糖尿病心血管自主神经功能评估的方法学研究及临床科研应用
- 周丽诺唐子惠曹银祥曾芳芳程迪赫李忠涛丁薇
- 糖尿病心血管自主神经病变是危害广大患者的严重并发症，该病变常表现为QT间期延长、体位性低血压、对运动及一些药物耐受不良、手术过程中易发生心血管意外，甚至造成严重后果如无痛性心肌梗死、严重心律紊乱和猝死等，是糖尿病患者死亡...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病并发症心血管自主神经病变疾病治疗
- 代谢综合征患者血浆氨基末端B型利钠肽前体水平的观察
- 2011年
- 回顾分析2005-2009年间在我院内分泌科和心内科收治的代谢综合征（MS）患者和非MS患者的临床资料，采用多元线性回归分析Log（NT—proBNP）值与血压、血脂等指标的关系，并采用协方差分析各组间Log（NT—proBNP）值的差异。年龄、体重指数、收缩压、舒张压、胰岛素抵抗指数、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、肌酐、左房内径、左室舒张末期后壁厚度、左室射血分数为Log（NT-proBNP）值的独立预测因素；MS组患者Log（NT—proBNP）值明显低于非MS组患者（P〈0．05）；高甘油三酯和体重指数、正常收缩压、舒张压和空腹血糖的MS患者Log（NT—proBNP）值均明显低于非MS患者（P〈0．05）。表明MS患者NT—proBNP水平明品低于非MS患者，这可能与MS患者血脂代谢紊乱和肥胖有关。
- 鲍苑苑尚西亮周丽诺胡仁明张伟伟丁薇
- 关键词：代谢综合征X氨基末端B型利钠肽前体
- 脂肪分化相关蛋白对软脂酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:构建编码脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因全长序列的真核表达载体,探讨ADRP过表达对软脂酸诱导的H9 c2心肌细胞凋亡有何影响。方法:(1)采用PCR的方法,以成年SD大鼠心肌cDNA为模板扩增编码ADRP全长的DNA序列,重组入pEGFP-C1质粒表达载体中,酶切、测序鉴定后转化大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,扩增后提取质粒,进行酶切和测序鉴定;(2)采用脂质体转染法将鉴定后的重组质粒转染H9 c2心肌细胞株,经G418筛选获得抗性细胞克隆后扩大培养;荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白报告基因表达情况;RT-qPCR和Western blot检测转染细胞与正常细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平;(3)采用流式细胞术检测不同浓度软脂酸对上述细胞细胞凋亡率的影响。结果:(1)酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入表达质粒pEGFP-C1;(2)荧光显微镜观察细胞内有绿色荧光蛋白表达且传20代以上无消失;RT-qPCR和Western blot证明重组质粒转染H9 c2细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平明显高于空质粒转染组和正常对照组(P<0.01);(3)经不同软脂酸刺激后,重组质粒转染H9 c2细胞凋亡率明显低于空质粒转染组和正常H9 c2细胞组(P<0.05)。结论:(1)成功构建了H9 c2细胞真核质粒表达载体pEGFP-C1-ADRP,获得了稳定表达ADRP基因的H9 c2心肌细胞株;(2)ADRP能够抑制软脂酸诱导的H9 c2心肌细胞凋亡,表明ADRP对高脂环境中心肌细胞可能具有一定的保护作用。
- 鲍苑苑方舟周丽诺胡仁明丁薇
- 关键词：脂肪分化相关蛋白H9C2心肌细胞软脂酸凋亡
- 精氨酸添加调控骨骼肌脂肪沉积分布的机理研究
- 精氨酸对瘦素通路的调控被证实在动物的脂质沉积和分布中具有重要作用，但其作用机理尚不清楚。本论文通过使用瘦素受体基因敲除的糖脂代谢异常模式动物--db/db小鼠进行饲喂实验，系统的讨论了精氨酸的添加在调节骨骼肌肉质发育、脂...
- 胡声迪丁薇马曦李德发
- 关键词：动物饲养糖脂代谢异常精氨酸
