黄蓬亮
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 供职机构：华南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金山东省教育厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大肠杆菌中融合表达人β防御素-3基因的研究(英文)
- 2007年
- 目的为了在大肠杆菌中融合表达人β防御素-3基因。方法根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏爱性,设计搭桥引物,并通过PCR扩增法合成了人β防御素的全基因序列,克隆进pGEX-4T-2中构建pGEX-4T-2-hBD-3融合表达载体。将表达载体转化E.coli宿主菌DH5α,进行IPTG诱导表达。将菌体反复冻溶使细胞膜穿孔,释放可溶性蛋白。融合蛋白GST-hBD-3经凝血酶切割。结果研究得到了重组人防御素蛋白,琼脂孔穴扩散抑菌法检测表明,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抗菌活性,抑菌效价为0.843 U。结论人β防御素-3基因在大肠杆菌中得到了融合表达。
- 赵亚华徐来祥张建军黄蓬亮许少鹏宋铭晶
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗菌活性
- 人β防御素3在大肠杆菌中可溶性表达及其生物活性的鉴定被引量：5
- 2005年
- 根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏好,设计引物并通过酶促法合成了人β防御素3(hBD-3)全基因序列,克隆进pGEX-4T-2中构建pGEX-4T-2-hBD-3融合表达载体.将表达载体转化E.coli宿主菌DH5α,进行IPTG诱导表达.控制诱导条件,提高可溶性蛋白的表达量.将菌体进行反复冻溶使细胞膜穿孔,释放可溶性蛋白.融合蛋白GST-hBD-3经凝血酶切割得到重组人防御素蛋白.用琼脂孔穴扩散抑菌法检测表明,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抑菌活性.
- 黄蓬亮赵亚华许少鹏
- 人β防御素3基因在大肠杆菌和酵母细胞中表达的研究
- 防御素是一种广泛存在于动植物界的抗菌多肽。人类防御素是一种存在于血液、肠道及表皮细胞的富含精氨酸的阳离子多肽。防御素分子具有特殊的空间结构，分子中含有6个半胱氨酸分别形成三对二硫键。根据分子中二级结构的不同和三对二硫键的...
- 黄蓬亮
- 关键词：人Β防御素3活性鉴定大肠杆菌酵母细胞基因表达
- 文献传递
- 人类防御素的结构与功能研究进展被引量：11
- 2006年
- 人类防御素是一种存在于血液、肠道及表皮细胞中具有特殊空间结构,富含精氨酸的阳离子多肽。对革兰氏阳性、阴性细菌,真菌以及被膜病毒都能产生较强的杀伤作用。是生物体天然免疫机制的重要组成部分,并与某些炎症性疾病有密切关系,是一种有前途的抗菌肽。本文就其在人体内的分布,生化特性,生物学活性及与某些疾病的关系作一概述。
- 赵亚华徐来祥黄蓬亮宋铭晶
- 关键词：防御素抗菌肽二聚体炎症反应
- 人β防御素3基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达被引量：4
- 2006年
- 根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏爱性和β防御素3全基因中G、C、A、T含量的平衡,设计搭桥引物,通过PCR法合成人β防御素全基因序列,克隆到真核表达载体pPICZα-A,测序确认.将重组体电击转化酵母GS115.转化子经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂孔穴扩散法检测抑菌活性.结果表明,目的基因在毕赤酵母中已得到表达,表达量为0.22 mg/mL,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抑菌活性.
- 赵亚华黄蓬亮徐来祥白云崔红高向阳
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗菌活性
