黄凤玲
- 作品数：22 被引量：76H指数：6
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学金属学及工艺更多>>
- 快速冷冻牛体外受精胚胎被引量：8
- 1994年
- 本文研究不同类型的防冻剂及其浓度对快速冷冻牛胚胎的效果。试验Ⅰ：７日龄囊胚先分别放入含１０％（Ｖ／Ｖ）甘油或１０％（Ｖ／Ｖ）乙二醇改良的磷酸盐缓冲液（ＰＢＬ）中，室温下平衡１０ｍｉｎ。然后，分别移入１．５ｍｏｌ／Ｌ，２．０ｍｏｌ／Ｌ甘油或２．０ｍｏｌ／Ｌ，３．０ｍｏｌ／Ｌ乙二醇＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖ＰＢＬ液中，１０ｍｉｎ后将胚胎放进冰箱的结冰层（约─２３℃），３５ｍｉｎ后直接投入液氮。冻后孵化率最高的处理组为１．５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖（８２．４％），其极显著（Ｐ＜０．０１）地高于２．０ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖（１５．４％），２．０ｍｏｌ／Ｌ乙二醇＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖（６３．９％），３．０ｍｏｌ／Ｌ乙二醇＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖（３８．７％）。试验Ⅱ：７日龄胚胎先在１０％（Ｖ／Ｖ）甘油中平衡１０ｍｉｎ，而后，分别移入１．５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０，０．２５，０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖，停留１０ｍｉｎ后快速冷冻。解冻后，胚胎分别用０．５，０．２５，０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖除甘油。结果表明：解冻液中的蔗糖浓度对胚胎的存活力无显著影响。当冷冻处理为１．５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖时，胚?
- 黄凤玲卢克焕
- 关键词：体外受精胚胎
- 不同发育阶段和质量的牛体外受精胚胎冷冻后的效果被引量：13
- 1994年
- 胚胎的冷冻是用二步降温法，将胚胎降至－２５℃，并直接投入液氮。试验Ⅰ，将６～８日龄的牛胚胎置于显微镜下，按发育期把胚胎分成桑椹胚、早期囊胚、囊胚、扩展囊胚四个阶段，然后分别平衡在１．５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖ＰＢＳ液中，２０ｍｉｎ后进行冷冻。解冻后，各阶段的胚胎孵化率分别为：２９．０％，７３．２％，７４．６％，６１．２％。桑椹胚的孵化率极显著（Ｐ＜０．０１）地低于其它三个阶段的胚胎，其它三个阶段之间无显著差异（（Ｐ＞０．０５）。试验Ⅱ，将７日龄的囊胚，在显微镜下鉴定质量并分为１～５级，仅１，２级胚胎用于冷冻。试验结果表明：每管装２枚胚胎时，有１枚胚胎以上孵化的细管数，１级的有９３．８％（４５／４８），２级的有７７．４％（２４／３１），它们之间差异显著（Ｐ＜０．０５）。每管装３枚胚胎时，有２枚胚胎以上孵化的细管数，１级的有８７．５％（４２／４８），２级的有６８．０％（１７／２５），二者间差异显著（Ｐ＜０．０５）。本研究结果表明：不同阶段和质量的牛体外培养胚胎冷冻后对存活率有显著的影响。
- 黄凤玲卢克焕
- 关键词：体外受精胚胎冷冻
- 利用TMT标记结合2D LC-MS/MS技术分析不同时期水牛睾丸曲精细管差异蛋白质组被引量：3
- 2014年
- 旨在采用TMT标记结合二维高效液相色谱/串联质谱联用的技术对不同时期水牛睾丸曲精细管的差异蛋白质组进行分析。分别提取不同时期(幼年期、老年期)水牛睾丸曲精细管总蛋白,TMT试剂标记后进行强阳离子交换柱分离多肽、nano LC分离,同时在线连接电喷雾串联(rbitrap质谱进行分析,通过SEQUEST软件搜库并对鉴定的差异蛋白数据进行生物信息学分析。结果表明:共筛选出定量差异倍数≥2倍的差异蛋白89个,以幼年期水牛睾丸曲精细管作为对照,上调蛋白质51个,下调蛋白质38个。生物信息学分析表明,TMT标记技术结合二维液相色谱串联质谱可以对不同发育时期水牛睾丸曲精细管蛋白进行有效地分离和鉴定。本研究结果为探索精子发生过程中蛋白质表达的变化规律提供了试验依据,找出可能与精子发生相关的标志性蛋白:谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)、过氧化氢酶(CAT)、热休克蛋白(HSP90AA1和HSPA)。
- 黄愉淋付强黄德伦潘宏黄凤玲梁贤威张明
- 关键词：蛋白质组
- 不同血清对常温和冷冻保存牛体外受精胚胎的影响被引量：14
- 2002年
- 本研究探讨了不同血清对常温和冷冻保存牛体外受精胚胎的影响。常温 (2 0℃ )保存胚胎的试验结果表明 :用添加 1 5 %胎犊血清 (FCS)和 1 5 %阉公牛血清 (SS)保存的胚胎所获得的孵化率无显著差异(80 .5 %和 82 .6% ,P>0 .0 5 ) ,添加这两种血清与添加 0 .4%牛血清白蛋白 (BSA)和不添加血清的比 ,胚胎的孵化率有极显著的差异 (80 .5 % ,82 .6% ,63 .5 %和 61 .7% ,P<0 .0 1 )。冷冻胚胎的试验结果显示 :冷冻液中加有 1 5 % FCS、 1 5 % SS和 0 .4% BSA与不含血清的单纯磷酸缓冲液 (PBS)比 ,解冻后胚胎的孵化率有极显著的差异 (81 .5 % ,76% ,73 %和 60 .5 % ,P<0 .0 1 )。而这 3种血清之间 ,胚胎的孵化率无显著差异 (P>0 .0 5 )。由上述两个试验的结果说明 :廉价而又易采集的阉公牛血清 (SS)
- 黄凤玲阳年生石德顺卢克焕
- 关键词：血清常温保存冷冻保存囊胚孵化率
- 牛体外受精胚胎移植后的怀孕率及双胎率被引量：13
- 1994年
- 为了测定牛体外受精胚胎移植到受体母牛后的怀孕率和双胎率，本研究共进行了３个胚胎移植试验。试验１，测定新鲜胚胎移植后的怀孕效果。将１６０枚新鲜胚胎移植到８０头受体母牛（每头受体接受２枚胚胎），移植后６０～９０ｄ的怀孕率为６５％（５２／８０），其中双胎率为５０％（２／５２）。试验２，测定经室温保存４～１８ｈ的胚胎移植后的怀孕效果。供试验用的６８头受体母牛均于移植前７ｄ（即发情当天）进行人工授精。移植时每头受体牛接受１枚胚胎。移植后４０～６５ｄ的怀孕率为７６．５％（５２／６８），其中双胎率为６５．４％（３４／５２）。试验３，测定冷冻胚胎移植后的怀孕效果。将４５４枚冷冻胚胎移植到２２７头受体母牛，每头接受２枚冻胚。移植后５０～６０ｄ的怀孕率为６１．７％（１４０／２２７），其中双胎率为２５％（３５／１４０）。本研究结果表明，用完全体外化技术生产的牛胚胎移植到受体母牛后可获得满意的怀孕率和双胎率，这一技术将为加速向用牛生产的发展开辟一条崭新的途径。
- 卢克焕黄凤玲阳年生
- 关键词：体外胚胎胚胎移植怀孕率双胎率
- 牛体外受精胚胎一步脱防冻剂冷冻方法的研究被引量：15
- 1996年
- 为了研究适合于牛体外受精胚胎的一步除防冻剂的冷冻方法，特进行两个试验。试验１分别用１．５Ｍ甘油＋０．２５Ｍ蔗糖、１．５Ｍ乙二醇和１．５Ｍ丙二醇作防冻剂冷冻体外受精后第７天，已发育至囊胚阶段的牛胚胎。使胚胎降温至－７℃后，植冰，然后以０．３℃／分的速率降温至－３０℃，立即将胚胎投入液氮中冷冻保存。在３７℃水中解冻胚胎后，使其直接在含１５％胎犊血清（ＦＣＳ）的磷酸缓冲液（ＰＢＳ）中脱去防冻剂。经体外培养７２ｈ后，３组胚胎的孵化率分别为７７．２７％（１０２／１３２）、７３．２４％（１０４／１４２）、４７．９０％（５７／１１９），第１、２组的孵化率极显著高于第３组（Ｐ＜０．０１），说明用１．５Ｍ丙二醇溶液冷冻的胚胎，在解冻后不宜直接在ＰＢＳ中脱防冻剂。试验２比较用不同浓度（１．０Ｍ０１．５Ｍ，２．０Ｍ）的乙二醇和不同投液氮温度（－２５℃，－３０℃，－３５℃）冷冻胚胎的效果。结果表明乙二醇浓度和投液氮温度对胚胎孵化率均无显著影响（Ｐ＞０．０５），各组胚胎的孵化率变动于７４．４４％－８５．４８％之间。
- 阳年生黄凤玲卢克焕
- 关键词：体外受精胚胎防冻剂繁殖
- 精品课程“动物繁殖学”的建设和实践被引量：4
- 2008年
- "动物繁殖学"2006年被评为广西大学校级精品课程,2007年被评为广西省自治区级精品课程,本文重点介绍该精品课程在学校的定位,教学条件、教学方法和教学手段和特色.
- 杨素芳蒋如明陆凤花黄凤玲卢克焕石德顺
- 关键词：动物繁殖学教学条件教学方法和教学手段
- 去除高丰度蛋白质后水牛卵泡液的双向电泳差异分析被引量：4
- 2014年
- 以广西沼泽型水牛卵泡液为研究对象,用试剂盒免疫去除成熟及未成熟水牛卵泡液高丰度蛋白质后,采用已建立并优化的双向电泳体系对卵泡液蛋白质样品进行分离。软件分析发现,21个差异表达蛋白质与成熟卵泡液相比,10个蛋白质点表达上调,7个蛋白质点表达下调,3个蛋白质点缺失,1个蛋白质点在水牛未成熟卵泡液中特异性表达。经质谱分析,最终鉴定出3个蛋白质点:硫酸化糖蛋白、转铁蛋白和触珠蛋白。该研究成功分离并鉴定的水牛卵泡液差异蛋白质,为揭示水牛卵母细胞发育的微环境及其成熟机制提供试验依据。其中转铁蛋白对于水牛卵泡液的发育成熟具有十分重要的促进作用,而其它2个蛋白质对水牛卵泡液的成熟相关机制还尚未清楚,有待于进一步的试验研究。
- 黄愉淋付强黄德伦陈富美黄凤玲梁贤威张明卢克焕
- 关键词：差异蛋白质组双向电泳质谱鉴定
- 利用TMT标记结合2D LC-MS/MS技术分析不同时期水牛睾丸曲精细管差异蛋白质组
- 引言/目的 睾丸内曲精细管是精子发生的重要场所,曲精细管组织中支持细胞对于精母细胞最终发育成具有完整形态的精子具有至关重要的作用.曲精细管中的多种蛋白在精子生成过程中发挥了重要作用,但究竟有哪些蛋白参与以及这些蛋白之间的...
- 黄愉淋付强黄德伦潘宏黄凤玲梁贤威张明卢克焕
- 牛体外受精胚胎一步细管冷冻解冻技术的研究被引量：1
- 2002年
- 本试验探讨 1.4M、1.0M或 0 .7M三个不同浓度的甘油冷冻牛体外受精胚胎 ,解冻采用 0 .5M或0 .2 5M蔗糖液细管内一步除甘油的方法。结果 6种组合中 ,以 1.0M甘油配 0 .5M蔗糖为最好 ,同 1.4M甘油配 0 .2 5M或 0 .5M蔗糖和 0 .7M甘油配 0 .5M蔗糖这三种组合比 ,胚胎的孵化率差异显著 (84 .35 %vs6 6 .6 7%、71.4 3%、73.98% ,P <0 .0 5 ) ;与另两个组合比 ,胚胎的孵化率差异不显著 (84 .35 %vs 75 .0 %、75 .4 % ,P >0 .0 5 )。三个甘油浓度之间 ,1.0M的冷冻效果最好 ,而 1.4M的效果最差 ,且二者之间胚胎的孵化率差异显著 (79.6 5 %VS 6 9.4 8% ,P <0 .0 5 )。以上结果表明 ,不同甘油浓度对冷冻牛体外受精胚胎有明显的影响。细管内的组合以含 1.0M甘油为冷冻液 ,两端装 0 .
- 黄凤玲石德顺卢克焕
- 关键词：体外受精防冻剂囊胚
