马鹏飞
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
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- siRNA沉默Mcl-1基因对胃癌SGC7901细胞株生物学行为的影响
- 2013年
- 目的探讨siRNA抑制Mcl-1基因表达后对胃癌细胞株SGC7901生物学行为的影响。方法化学合成针对Mcl-1的靶向siRNA(Mcl-1 siRNA组),同时以转染阴性对照siRNA(阴性对照组)、转染脂质体转染试剂(脂质体对照组)和空白细胞(空白对照组)作为对照。MTT检测Mcl-1 siRNA对SGC7901细胞增殖能力的影响,AnnexinV-FITC和PI双染观察细胞各组凋亡情况;PI单染观察各组细胞周期变化情况;转染48 h后应用Transwell小室及Matrigel胶,通过计数细胞数目分析细胞侵袭迁移能力的变化。结果 MTT检测结果显示用Mcl-1 siRNA转染胃癌细胞SGC7901 24、48和72 h后Mcl-1 siRNA组与空白对照组、脂质体对照组、阴性对照组相比增殖能力显著下降(P<0.05);转染48 h后Mcl-1 siRNA组S期细胞明显增多,同时,G0/G1期、G2/M期比例相应减少,与各对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);侵袭、迁移结果显示Mcl-1 siRNA组SGC7901细胞在转染后48 h穿膜细胞数均较各对照组明显下降(P<0.05)。结论 Mcl-1在胃癌的发生、发展及侵袭转移中发挥重要作用,RNAi抑制Mcl-1是胃癌基因治疗的一个潜在有效的方法。
- 刘金禄王震陈俊强崔希刚马鹏飞黎伯培
- 关键词：胃癌SIRNAMCL-1
- 胃癌细胞Mcl-1基因有效siRNA序列筛选的实验研究
- 2014年
- 目的：检测髓样细胞白血病-1基因（myeoidcellleukemin-1，Mcl-1）在胃癌细胞SGC7901及MGC-803中的表达．并筛选出最有效的siRNA序列。方法：RT—PCR检测胃癌细胞中Mcl-1基因的表达；设计针对Mcl-1的4对干扰序列（Mcl—lsiRNA1-4）及1对阴性对照（Mcl—lsiRNANC）。瞬时转染胃癌细胞，荧光定量PCR和Westernblot分别检测转染24、48、72h后细胞中Mcl-1含量。结果：2种胃癌细胞均存在Mcl-1基因的表达。综合分析．SGC7901及MGC-803细胞转染48h后达到最佳抑制效果；以Mcl-1siRNAl为最好，Mcl-1mRNA的抑制率分别为73．8％、67．6％；蛋白抑制率分别为79.3％和96．1％。结论：本研究成功设计并筛选出能够同时有效抑制2种胃癌细胞Mcl-1表达的siRNA1序列。
- 刘金禄王震陈俊强崔希刚马鹏飞黎伯培
- 关键词：胃肿瘤SIRNAMCL-1
- 胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803的细胞周期分布及侵袭能力之比较研究
- 2012年
- 目的体外培养胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803,并比较两种细胞周期分布情况及侵袭能力。方法采用流式细胞术观察两株细胞的周期分布情况;采用涂有Matrigel胶的Transwell小室对胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803进行体外侵袭实验,通过检测穿过小室的相对细胞数量比较两株细胞的侵袭能力。结果SGC-7901在G0/G1期、S期、G2/M期的分布百分比分别为(63.74±3.40)%、(30.23±2.70)%、(6.03±0.70)%;MGC-803在G0/G1期、S期、G2/M期的分布百分比分别为(62.94±6.13)%、(28.67±7.76)%、(8.39±1.69)%,两胃癌细胞株对应的周期时相分布百分比差异无统计学意义(P>0.05);检测SGC-7901和MGC-803穿过涂抹有Matrigel胶的聚碳酸酯膜的细胞数分别为65.67±6.03和94.5±3.68,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MGC-803细胞的侵袭能力明显强于SGC-7901,而两株细胞在对应的周期时相分布情况则无明显差异。
- 马鹏飞陈俊强刘金禄王震
- 关键词：胃癌细胞细胞周期
- siRNA抑制Mcl-1基因表达对胃癌细胞MGC-803生物学行为的影响
- 2014年
- 目的探讨siRNA抑制Mcl-1基因表达后对胃癌细胞MGC-803生物学行为的影响。方法合成针对Mcl-1的靶向siRNA(Mcl-1 siRNA组),以空白细胞(空白对照组)和分别转染脂质体试剂(脂质体对照组)及阴性对照siRNA(阴性对照组)作为对照组。噻唑蓝(MTT)实验检测Mcl-1 siRNA对MGC-803细胞增殖能力的影响;流式细胞术观察各组细胞凋亡及周期变化情况;转染48 h后应用Transwell小室分析细胞侵袭、迁移能力的变化。结果 Mcl-1 siRNA组转染后24 h、48 h、72 h的A值低于3个对照组(P<0.05),其细胞增殖抑制率分别为8.9%、21.6%和18.8%。转染48 h后,Mcl-1 siRNA组细胞凋亡率高于空白对照组、脂质体对照组和阴性对照组(%:19.61±1.66 vs3.69±0.37 vs 3.54±0.47 vs 3.68±0.55,F=12.230,P<0.05)。Mcl-1 siRNA组G0/G1[(41.03±1.86)%]、G2/M期[(1.80±0.46)%]比例均低于3个对照组,S期比例[(57.17±1.72)%]高于3个对照组(均P<0.05)。Mcl-1 siRNA组侵袭、迁移实验中的穿膜细胞数(分别是42.00±4.00、76.33±3.51)均低于空白对照组(分别是79.33±3.51、108.00±3.61)、脂质体对照组(分别是74.67±2.52、110.67±4.04)和阴性对照组(分别是77.33±3.06、109.33±4.51)。以上指标在3个对照组间差异均无统计学意义。结论抑制Mcl-1表达可有效降低胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,并促进肿瘤细胞凋亡。
- 刘金禄王震陈俊强崔希刚马鹏飞黎伯培
- 关键词：细胞侵袭细胞迁移
