马良友
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
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- 11S大豆抗原蛋白注射液及其制备方法
- 本发明公开了一种11S大豆抗原蛋白注射液，按照体积百分比计，其包括以下组分：纯化后的11S蛋白、白油、司班、硬脂酸铝，以每1mL11S大豆抗原蛋白注射液计，白油为0.41-0.51mL ，司班为0.021-0.035mL...
- 吴金节寇亚楠孙志阔王希春马良友徐述亮陈亮王勇樊海新李宝
- 文献传递
- 奶牛乳腺上皮细胞的体外培养及蛋白含量测定被引量：2
- 2014年
- 为建立稳定的奶牛乳腺上皮细胞系(BMEC),进一步研究乳腺上皮细胞体外蛋白的分泌情况,本试验首先采用组织块贴壁法获得奶牛乳腺上皮细胞,用胰蛋白酶纯化细胞,并运用SDS-PAGE进行鉴定。采用MTT分析细胞活力,瑞氏-吉姆萨染色法对细胞核进行分析,并测定细胞上清液中β-酪蛋白(β-CN)含量。结果显示:本试验成功培养出较纯化的奶牛乳腺上皮细胞;细胞生长曲线呈明显"S"型,用瑞氏-吉姆萨法染色细胞,细胞核形态多为卵圆形且呈现明显蓝紫色。原代乳腺上皮细胞可连续多次传代且未出现永生化,细胞呈单层贴壁生长,证明细胞活力良好;测定其β-CN含量为3.3 mg/L。
- 罗莹吴金节王希春马良友刘红梅张胜军
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞Β-酪蛋白细胞培养
- 大豆抗原蛋白对断奶仔猪细胞因子及肠上皮紧密连接蛋白Claudin-1 mRNA表达的影响被引量：6
- 2015年
- 选取70头24日龄"杜×长×大"断奶仔猪,随机分成7组,每组10头仔猪。对照组(A组)饲喂基础日粮,β-伴大豆球蛋白(β-Conglycinin,7S)(B、C、D组)和大豆球蛋白(Glycinin,11S)试验组(E、F、G组)分别添加500、2 000、5 000μg/kg质量的7S或11S。仔猪断奶时开始饲喂大豆抗原蛋白,分别于24、26、28、30日龄采集血液,测量血清中细胞因子含量。于试验结束时,每组选取5头仔猪放血致死,采集小肠各段,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小肠各段Claudin-1mRNA的相对表达量。结果显示,与对照组相比,随着7S和11S剂量的增加,血清中IL-2、IL-4、IL-6的含量升高,血清中INF-γ的含量降低。与对照组相比,7S与11S试验组中的D、G组各肠段Claudin-1mRNA的相对表达量均显著降低(P<0.01),C组的空肠前段、空肠中段和空肠后段均显著降低(P<0.01)。与7S试验组相比,除11SB、C组的回肠显著降低,其余各组均显著升高。试验表明,7S和11S均能够通过影响细胞因子的含量,引起断奶仔猪的体液和细胞免疫反应,降低断奶仔猪十二指肠和空肠Claudin-1mRNA相对表达量,引起仔猪肠道黏膜损伤,且7S比11S对仔猪的损伤程度更大。
- 李宝李玉马良友冯士彬丁红研王希春吴金节
- 关键词：Β-伴大豆球蛋白大豆球蛋白细胞因子
- 伏马菌素B_1人工抗原的制备及其鉴定被引量：2
- 2013年
- 为制备人工抗原FB1-OVA,采用戊二醛一步法将小分子半抗原-伏马菌素B1(FB1)与载体蛋白OVA进行偶联。分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)、紫外扫描法(UV)、免疫芯片法和质谱法(MS)来鉴定FB1与OVA的偶联效果。结果显示,凝胶电泳图中FB1-OVA的电泳条带迁移率比OVA的迁移率小,紫外扫描图谱FB1-OVA的波型与OVA的波型发生了明显的变化,免疫芯片检测可见偶联物与FB1McAb发生了特异性反应,初步证明偶联成功。质谱法检测得出FB1-OVA和OVA的相对分子质量分别是51 928.612和44 265.718,可计算出偶联比为10.6∶1,通过测定,偶联物的蛋白质浓度为0.99 mg/mL。
- 李复辉樊海新李寒松马良友孙垚吴金节王希春
- 关键词：伏马菌素B1人工抗原偶联
- 仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 【目的】研究并建立大豆抗原蛋白血清抗体间接ELISA检测方法。【方法】首先用大豆抗原蛋白对仔猪进行致敏,然后采用棋盘滴定法确定最佳抗原包被质量浓度及血清稀释倍数,并对其他条件进行优化,最终建立检测血清大豆抗原蛋白11S、7S抗体的间接ELISA方法,确立待测血清判定标准,并对建立的ELISA方法进行重复性、准确性和敏感性检测。【结果】建立的ELISA方法的最佳反应条件为:11S抗原蛋白最适包被质量浓度为2.0μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间15min。7S抗原蛋白的最适包被质量浓度为2.5μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间25min。11S和7S抗原蛋白间接ELISA检测方法的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好,灵敏度较高。【结论】建立了仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法,该法具有很强的特异性和敏感性,可用于大豆抗原蛋白11S、7S过敏反应的临床诊断。
- 寇亚楠马良友罗莹王希春吴金节
- 关键词：大豆抗原蛋白仔猪血清抗体
- 伏马菌素B_1胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：3
- 2015年
- [目的]建立用于快速检测伏马菌素B1(FB1)的胶体金免疫层析试纸条。[方法]首先制备了FB1单克隆抗体和FB1-OVA偶联抗原,然后将FB1单克隆抗体与胶体金制成金标抗体包被在金标垫上,将FB1-OVA抗原和羊抗鼠Ig G包被在硝酸纤维素膜(NC膜)表面分别作为检测线和质控线。采用间接竞争法检测待检样品中的FB1与NC膜上的FB1-OVA抗原竞争结合金标抗体中的FB1单克隆抗体情况,并以检测线和质控线显示检测结果。[结果]本试验优化了金标抗体、检测抗原及羊抗鼠Ig G的包被量,检测FB1的灵敏度可达到2 ng·m L-1,最佳判定质量浓度为40 ng·m L-1。[结论]本试验制备的检测试纸条具有较高的特异性和稳定性,操作简单,检测时间仅需10 min,且与高效液相色谱法检测结果一致,可作为检测玉米中伏马菌素B1残留的有效手段。
- 樊海新李寒松李复辉马良友朱平吴金节王希春
- 关键词：伏马菌素B1单克隆抗体胶体金免疫层析试纸条
- 大豆抗原蛋白对断奶仔猪血清中细胞因子的影响及肠道致敏作用
- 本试验将不同剂量纯化β-伴大豆球蛋白（7S）和大豆球蛋白（11S）添加到断奶仔猪日粮中，建立不同程度致敏仔猪模型，采用ELISA、石蜡切片、免疫组织化学以及实时荧光定量PCR方法，研究大豆抗原蛋白对断奶仔猪血清中细胞因子...
- 马良友
- 关键词：仔猪Β-伴大豆球蛋白大豆球蛋白
- 文献传递
- 7S大豆抗原蛋白注射液及其制备方法
- 本发明公开了一种7S大豆抗原蛋白注射液，按照体积百分比计，其包括以下组分：纯化后的7S大豆抗原蛋白40%~60%，氢氧化铝胶体40%~60%。其制备方法包括：将7S大豆抗原蛋白纯化，以AlCl<Sub>3</Sub>、N...
- 吴金节寇亚楠孙志阔王希春马良友徐述亮陈亮王勇樊海新李宝
- 文献传递
- 犬乳腺肿瘤的病理分析和标志物测定被引量：8
- 2013年
- 母犬乳腺肿瘤是我国犬肿瘤疾病中的高发类型之一。为了更好地对犬乳腺肿瘤进行临床诊疗,本文对临床接诊的8例犬乳腺肿瘤病例进行了临床病理分析和肿瘤标志物测定。结果显示,根据病理变化,8例病例中恶性肿瘤3例,原位癌2例,良性肿瘤1例,未界定肿瘤1例,普通型增生1例;与健康组相比,患病组犬血清癌胚抗原(CEA)和糖链抗原125(CA125)含量显著升高(P<0.05),糖链抗原15-3(CA15-3)含量极显著升高(P<0.01),而甲胎蛋白(AFP)含量差异不显著(P>0.05)。试验表明,病理切片和肿瘤标志物指标可以作为犬乳腺肿瘤疾病的判定依据,对犬乳腺肿瘤诊断具有一定的借鉴意义。
- 闫妮娜冯士彬杨雪艳马良友寇亚楠吴金节王希春
- 关键词：乳腺肿瘤病理切片肿瘤标志物
- 检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法
- 本发明公开了一种检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法：是以经纯化的大豆抗原蛋白作为抗原包被，用以检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法。上述大豆抗原蛋白包括大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白。本发明的优点在于该方...
- 吴金节王希春寇亚楠孙志阔徐述亮陈亮王勇马良友
- 文献传递
