陈启明
- 作品数:2 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 全基因组SHIV-KB9克隆的构建及其在人、猴外周血单核细胞中的复制(英文)被引量:7
- 2004年
- 将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过PCR , RT-PCR 和猴免疫缺陷病毒(SIV) gag p27 核心抗原滴度检测表明:感染性克隆SHIV-KB9可有效在人、恒河猴及食蟹猴的外周血单核细胞中复制。
- 吴颖运洪坤学陈佩陈启明耿运琪邵一鸣
- 关键词:克隆基因组质粒恒河猴食蟹猴外周血单核细胞
- 枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达(英文)被引量:3
- 2004年
- 利用PCR技术扩增得到来源于枯草芽孢杆菌的葡萄糖脱氢酶基因片段,并构建重组质粒pUC-T-GDH,然后将基因片段克隆于大肠杆菌表达载体pBV220中,得到表达质粒pBV-GDH.葡萄糖脱氢酶在含有表达质粒的基因工程菌株中得以诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描结果表明,经诱导表达的葡萄糖脱氢酶约占基因工程菌株总蛋白的45%.葡萄糖脱氢酶活力测试表明,基因工程菌株无细胞抽提液中葡萄糖脱氢酶的活力为7.8U/毫克,约为对照组的30倍.实验结果初步说明,广泛应用于工业化生产的葡萄糖脱氢酶可以在基因工程菌株中得以大量表达并维持较高活力.
- 乔建军路福平陈启明杜连祥耿运琪
- 关键词:枯草芽孢杆菌基因表达葡萄糖脱氢酶聚丙烯酰胺凝胶电泳