钱煦岱
- 作品数：61 被引量：147H指数：8
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- 转染miR-223对HEL细胞增殖和分化的影响
- 2011年
- 通过在体外将miR-223 duplex转染至红白血病细胞株(HEL),观察其对HEL细胞增殖作用的影响,来探讨miR-223对白血病细胞诱导分化及作用机理。以白血病HEL细胞株为靶细胞,采用MTT法和半固体集落法观察不同浓度的miR-223对HEL细胞增殖的影响;流式细胞术观察红系细胞分化的表面标志(CD71+、GPA+)表达;RT-PCR检测miR-223对LMO2转录因子表达的影响以及用免疫印迹反应观察相应蛋白的表达情况。结果表明:低浓度的miR-223(10nM、20nM)抑制HEL细胞增殖,且随浓度增加(50nM、100nM)时,抑制作用更明显(P<0.05或P<0.01)。半固体集落培养结果显示与MTT结果相一致。流式细胞术检测用不同浓度的miR-223转染HEL细胞中发现红系细胞表面标志GPA+表达随其浓度升高而增加,而CD71+在细胞中表达无显著差异。在miR-223作用前后提取RNA进行RT-PCR检测显示,LMO2基因表达随浓度增加而降低。对LMO2蛋白免疫印迹分析发现,经miR-223处理过的细胞中LMO2蛋白含量随浓度增加逐渐下降。结论:转染一定浓度miR-223至红白血病HEL细胞中,能够抑制细胞增殖,其作用机制有可能通过竞争性抑制LMO2转录因子表达,恢复与分化相关的转录因子的表达,来诱导红白血病细胞向成熟方向分化。
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇徐丹尹利明周郁鸿
- 关键词：HEL
- 三七皂苷对人骨髓造血细胞凋亡相关蛋白表达的影响被引量：16
- 2006年
- 本文研究观察三七皂苷(PNS)对造血细胞促进凋亡相关蛋白(Daxx、Fas)和抑制凋亡的核转录因子(NFkB、c-Rel)表达的影响,探讨PNS促进造血细胞增殖,支持生长存活的作用机制。采用半固体集落培养法观察PNS对人骨髓红系、粒系祖造血细胞(CFU-GM、CFU-E)的增殖作用,台盼蓝拒染法观察细胞的存活率,涂片染色法观察细胞形态学的变化,用流式细胞术分析细胞凋亡状况。同时,用PNS处理粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-014种细胞株后,提取胞浆蛋白和核蛋白,Western免疫印迹观察Daxx、Fas、NFkB和c-Rel蛋白的表达水平。结果发现:①PNS能够刺激人骨髓红系、粒系祖细胞和HL-60等4种细胞株增殖。②HL-60等4种株细胞经PNS和饥饿处理后,活性良好,镜下未观察到凋亡的形态学特征;AnnexinⅤ分析也未见凋亡的阳性细胞。③Westernblot结果显示,经PNS处理的4株细胞Daxx蛋白表达水平与对照相比,下降幅度分别为33.3%-61·5%;HL-60细胞本身表达Fas蛋白低下,PNS处理后也无明显下降,而K562、CHRF-288和Meg-01细胞Fas蛋白表达与对照相比,下降幅度分别为33.3%-71.4%。④NFkB、c-Rel蛋白除HL-60细胞对PNS诱导无明显变化外,其余细胞均出现不同程度地增加,分别提高了2.0-2.7倍和1.5-2.3倍。结论:PNS在某种程度上能够抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少造血细胞的凋亡,同时也能通过上调NFkB、c-Rel转录因子,促进细胞增殖,并阻止半胱天冬酶(caspase)连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡,这为PNS应用于临床治疗凋亡过度的疾病如再生障碍性贫血提供了可能性。
- 陈小红高瑞兰郑智茵钱煦岱徐卫红
- 关键词：三七皂苷造血细胞DAXXNFKBC-REL
- 红曲对大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:研究中药红曲对骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化的影响。方法:取SD大鼠60只,随机分为空白对照组,红曲低、中、高剂量组,普拉固组和倍美力组,分别予以蒸馏水、红曲水提液、普拉固水溶液、倍美力水溶液胃灌,10天后,制备含药血清;将从4-5周SD大鼠取材制备的骨髓基质细胞培养于含药血清培养液中,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色等方法观察红曲对骨髓基质细胞向成骨细胞分化、增殖、碱性磷酸酶表达及矿化结节形成的影响。结果:含红曲血清明显增加了骨髓基质细胞向成骨细胞分化、增殖、碱性磷酸酶的表达水平及矿化结节的形成(P<0.05或P<0.01)。结论:体外成功培养了骨髓基质细胞和成骨细胞;证实了含红曲血清可以呈剂量依赖性地促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化、增殖、矿化。
- 卢建华钱煦岱华江王维佳朱小飞
- 关键词：红曲血清药理学基质细胞成骨细胞
- 白花蛇舌草提取物对HL-60细胞系抑制增殖及作用机理的研究
- ＜正＞目的：通过观察白花蛇舌草提取物对 HL- 60细胞增殖抑制作用,探讨白花蛇舌草抑制白血病细胞克隆增殖及作用机理。方法：选 HL-60细胞作为靶细胞,采用 MTT 法观察不同浓度的白花蛇舌草提取物对 HL -60细胞...
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇
- 文献传递
- 活血化瘀利水消肿法促进骨折愈合
- 卢建华王维佳钱煦岱胡俊翔骆勇全
- 该研究成果课题分为实验和临床研究，实验研究取成年SD大鼠90只，大鼠双侧桡骨骨折造模，造模后大鼠随机分为9组，活血化瘀利水消肿方组(总称A组)、活血化瘀方组(总称B组)、模型组(总称C组)各Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。A、B、C组分别...
- 关键词：
- 关键词：骨折愈合
- 肿节风注射液对U937细胞的增殖抑制作用及CD_(80)、CD_(86)分子表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的：观察肿节风注射液（sarcandra glabra injection,SGI）对白血病U937细胞的增殖抑制作用及共刺激分子CD80、CD86表达的影响。方法：选用白血病U937细胞作为靶细胞,采用MTT法观察不同浓度的SGI对体外培养U937细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测药物处理前后细胞凋亡百分率及细胞表面共刺激分子CD80、CD86表达;激光共聚焦显微镜观察药物处理后U937细胞凋亡早、晚期的形态学变化;DNA凝胶电泳观察典型DNA梯形条带。结果：MTT显示不同浓度的SGI对白血病U937细胞均有不同程度的增殖抑制作用。与对照组比较,低浓度（1.83g/L）差异不明显,但随药物浓度（2.75-7.32g/L）的增加,抑制作用呈剂量依赖性（P〈0.05,P〈0.01）。流式细胞术检测结果显示药物处理48小时后,Annexin-V＋/PI-的百分率随SGI浓度增加而明显升高。激光共聚焦显微镜发现细胞凋亡早期,细胞膜上Annexin-V表达阳性（Annexin-V＋）,核阴性（PI-）;凋亡晚期两者均表达阳性。DNA凝胶电泳清晰可见典型的DNA梯形条带。对CD80、CD86表达检测显示,不同浓度的SGI处理24小时后,CD80表达分别为4.1%-16.5%;CD86则需要处理48小时后,随浓度增加而升高（2.5%-20.7%）,但两者均与时间无依赖性。结论：SGI在一定浓度下能抑制白血病U937细胞增殖,诱导细胞凋亡,在SGI的诱导下,表面共刺激分子CD80、CD86表达均有不同程度的增加。
- 陈小红高瑞兰沈一平钱煦岱尹利明王潇
- 关键词：U937细胞
- MIR-223对粒细胞性白血病细胞增殖影响及作用机理
- 目的:通过在体外将miR-223转染至粒系白血病细胞株(HL-60、NB4),观察其对粒系白血病细胞增殖作用的影响,来探讨miR-223对白血病细胞诱导分化及作用机理。方法:以白血病HL-60、NB4细胞株为靶细胞,采用...
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇徐丹尹利明周郁鸿
- 文献传递
- 急性髓系白血病(AML)中hsa_circ_0000254的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的:通过克隆环状RNA hsa_circ_0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础。方法:人工合成hsa_circ_0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到慢病毒过表达载体pLCDH-ciR中,测序验证。筛选阳性克隆,分别以pLCDH-circ254(C254)、NC(pLCDH-ciR)转染293T细胞,培养40 h后收集细胞进行PCR检测及产物测序验证。结果:pLCDH-circ254表达载体经测序验证,测序峰图正常,且无杂峰或叠带,序列对比吻合,表明hsa_circ_0000254成功插入环状RNA表达载体pLCDHciR,过表达载体构建成功,表达效率高达1万倍。结论:成功构建hsa_circ_0000254表达载体,可高效表达hsa_circ_0000254。
- 俞露李强邓刚李晓芳钱煦岱孙涛俞石芳
- 关键词：急性髓系白血病
- 三七皂苷在造血细胞内MAPK信号传递途径的研究
- 目的:研究三七皂苷(PNS)在造血细胞内信号传递途径,探讨其促进造血细胞增殖分化的作用机理。丝裂原激活的蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase Pathway,MAPK)信号途径主要包...
- 高瑞兰陈小红林筱洁钱煦岱周郁鸿徐卫红
- 关键词：三七皂苷造血细胞信号途径
- 三七总皂苷促血管内皮细胞增殖的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响。方法用不同浓度三七总皂苷对ECV304细胞进行干预培养,采用四唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;荧光定量聚合酶链反应法(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测VEGF、KDR mRNA的表达;Western blot法检测增殖相关蛋白ERK1/2和pERK1/2蛋白的表达。结果三七总皂苷在一定浓度范围(100、200、400、800mg/L)能够促进ECV304细胞增殖(P<0.05),呈明显的剂量依赖性,48h后作用最明显,细胞增殖率分别达112.44%±5.64%、117.20%±11.05%、134.34%±0.40%、141.45%±5.49%;与对照组比较,PNS组ECV304细胞VEGF、KDR mRNA表达量,增殖相关蛋白pERK1/2的表达均明显提高(P<0.05)。结论三七总皂苷能够促进ECV304细胞增殖,其机制可能与上调VEGF、KDR和pERK1/2有关。
- 王潇尹利明钱煦岱周郁鸿
- 关键词：ECV304细胞三七总皂苷增殖
