郭鸿
- 作品数：6 被引量：41H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。该β-葡萄糖苷酶，是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或...
- 冯家勋郭鸿封毅莫新春段承杰唐纪良
- 文献传递
- 水牛瘤胃宏基因组的一个新的β-葡萄糖苷酶基因umcel3G的克隆、表达及其表达产物的酶学特性被引量：32
- 2008年
- 以木质纤维素为原料、应用同步糖化共发酵工艺发酵生产酒精时需要酸性中低温高活力纤维素酶包括β-葡萄糖苷酶。本工作分6次构建了水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库,获得1.26×10~5个克隆,文库含外源DNA的总长度约为4.8×10~6 kb。从文库中筛选到118个表达β-葡萄糖苷酶活性的独立克隆。发现其中8个克隆表达的β-葡萄糖苷酶在pH5.0、37℃条件下活性较强。对其中一个克隆进行了亚克隆,序列分析发现一个2223 bp的潜在的编码β-葡萄糖苷酶基因(umcel3G)的开放阅读框(ORF),其编码产物的氨基酸序列与来自于Bacillus sp.的一个β-葡萄糖苷酶同源性最高,具有60%的一致性和73%的相似性。该ORF在E.coli中的表达产物Umcel3G的分子量与预测大小相似,酶谱分析表明该表达产物具有β-葡萄糖苷酶活性,证实该基因为一个β-葡萄糖苷酶基因。测定了用Ni-NTA纯化的Umcel3G的酶学特性,其最适pH和最适温度分别为6.0～6.5和45℃。一些金属离子如Ca^(2+)、Zn^(2+)能显著提高该酶的酶活,而另外一些金属离子如Fe^(3+)、Cu^(2+)能抑制Umcel3G的活性。在pH4.5、35℃和5 mmol/L的Ca^(2+)存在的条件下,用Ni-NTA纯化的重组酶的比活为22.8 IU/mg,说明该酶在用SSCF工艺发酵生产酒精中有潜在的应用价值。
- 郭鸿封毅莫新春段承杰唐纪良冯家勋
- 关键词：未培养微生物宏基因组Β-葡萄糖苷酶
- 水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库的构建及纤维素酶基因的克隆和鉴定
- 本工作分6次从30个水牛瘤胃内容物中提取了未培养微生物的总DNA，用含2％酸洗PVPP的Sephadex G200凝胶层析纯化DNA后，再用电洗脱法纯化并回收30～50kb的。DNA片段。把回收片段末端修复后，以柯斯质粒...
- 郭鸿
- 关键词：未培养微生物宏基因组
- 一种β－葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。该β-葡萄糖苷酶，其氨基酸序列如序列表中序列3所示。在以纤维素为原料生产燃料酒精的同步糖化共发酵工艺中的发酵微生物酵母菌最适发酵条件下，该酶具有较高的酶活，可以应用于该工...
- 冯家勋郭鸿封毅莫新春段承杰唐纪良
- 文献传递
- 一种β－葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β－葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明提供的β－葡萄糖苷酶，是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...
- 冯家勋封毅段承杰庞浩许跃强张鹏郭鸿唐纪良
- 文献传递
- 造纸废水纸浆沉淀物中未培养微生物纤维素酶基因的克隆和鉴定被引量：11
- 2006年
- 提取纯化造纸废水纸浆沉淀物的宏基因组DNA并构建16S rDNA文库,系统发育分析显示该环境中存在大量的未培养细菌且具有种类的多样性。以柯斯质粒为载体构建了1个含10000个克隆的宏基因组文库,文库容量为3.53×108bp。筛选文库得到2个表达内切葡聚糖酶活性的克隆、3个表达外切葡聚糖酶活性的克隆和2个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆。从表达不同活性的克隆中分别挑选活性最强的进行鉴定,得到3个新的纤维素酶基因umcel5L、umcel5M和umbgl3D。umcel5L、umcel5M和umbgl3D分别编码产生内切葡聚糖酶、纤维糊精酶和β-葡萄糖苷酶,其编码产物与已报道的纤维素酶一致性最高的分别为43%、48%和46%。这是第一次采用未培养方法对造纸废水纸浆沉淀物中的细菌多样性进行分析并从中克隆纤维素酶基因的报道。
- 许跃强段承杰周权能唐纪良冯家勋庞浩封毅莫新春郭鸿张鹏
- 关键词：细菌多样性未培养微生物宏基因组文库纤维素酶
