郭英
- 作品数：23 被引量：87H指数：6
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家奶牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理环境科学与工程更多>>
- 鸭主要组织相容性复合物（MHC）基因的筛选及物理图谱的初步构建
- ＜正＞引言主要组织相容性复合物（MHC）是普遍存在于脊椎动物中的一类基因家族,它不仅基因多,而且每个基因又高度变异,即存在高度的多肽性。MHC主要存在于脊椎动物的细胞表面,是与免疫相关的一类基因。MHC分子可以识别并结合...
- 任立明赵要风胡晓湘黄银花郭英费菁李宁
- 关键词：BAC文库物理图谱
- 文献传递
- 利用体细胞核移植技术生产表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)的转人溶菌酶基因(HLY)的猪克隆胚胎被引量：6
- 2008年
- 由于生理特性和器官大小的原因,猪在人类疾病模型和器官移植方面具有很大的应用潜力.正因如此,猪基因结构的修饰对农业生产和人类医学两方面都意义重大.研究用脂质体介导的方法转染了猪胎儿成纤维细胞,所用结构为双标的人溶菌酶质粒(pBC1-HLY-GFP-NEO).分别对包含两个品种(五指山猪、长白猪)的5个细胞系(sw7,sw8,slw3,slw6和slw9)进行了转染.经过14d,1000μg/mL浓度G418药物的筛选处理,sw7,sw8,slw3和slw6等4个细胞系的95以上细胞都表达绿色荧光蛋白,而细胞系slw9的转染效率只有49.3.用转染效率高的3个细胞系作为核供体构建猪克隆胚胎,通过电刺激方法进行融合和激活,然后在PZM3中体外培养.48h后,重构胚的平均卵裂率为76.7;经过7d培养后观察,有18.5的胚胎发育到囊胚阶段,其中93.3的囊胚在荧光显微镜下能够发出绿色荧光,但囊胚之间的荧光强度存在差异.研究结果表明,通过脂质体介导的方法可以获得高转染效率的转基因猪胎儿成纤维细胞系,但细胞系之间的转染效率不同;用转基因猪胎儿成纤维细胞构建的重构胚,能够成功发育到囊胚阶段,而且大多数为表达绿色荧光蛋白的阳性胚胎.
- 李秋艳卫恒习郭英李燕赵蕊于政权汤波张磊戴蕴平李宁
- 关键词：EGFP核移植胎儿成纤维细胞
- 北京奶业发展形势现状及问题对策被引量：8
- 2015年
- 奶业发展水平是衡量一个国家现代农业发展水平的重要标志。2014年,我国各地陆续出现生鲜乳生产过剩危机,产业结构不合理、进口乳制品强烈冲击等问题逐渐凸显,北京市奶业发展进入转型的关键时期。在此形势下,我市奶业亟需进行产业结构调整,提高饲养水平,建立产销一体化,布局合理、持续健康稳定发展的奶业市场。
- 王铜铜郭英任立明费菁李宁于政权孟庆勇
- 关键词：奶业
- 基于Java和MVC的果树病虫害信息发布WebGIS
- 随着人们对地理信息需求的不断增长和Internet技术的飞速发展,GIS技术与Internet技术相互融合形成了WebGIS技术.虽然目前WebGIS技术已越来越多地应用于各个领域,但国内农业病虫害领域的WebGIS并不...
- 郭英
- 关键词：WEBGISARCIMSMVC果树病虫害
- 文献传递
- 离子强度对于牛精蛋白在大肠杆菌中的表达的影响被引量：1
- 2003年
- 通过基因合成将大肠杆菌偏好的精氨酸密码子CGT取代野生型牛精蛋白基因中的稀有精氨酸密码子AGA和AGG ,得到密码子优化的牛精蛋白基因 ,并将其克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PS。将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株BL2 1中 ,经IPTG诱导 ,可得到一 33kD融合蛋白表达带 ,首次成功地将牛精蛋白在大肠杆菌中进行了表达 ,但其表达量很低 ,约为总菌体蛋白的 13%。增加表达菌株培养液的离子强度 ,可将蛋白表达含量提高到 2 8% ,且蛋白表达量与离子强度呈正相关。纯化后的牛精蛋白可在体外条件下与DNA发生结合。
- 张雅丽任立明郭英陈立栋杨国庆陈永福
- 关键词：离子强度大肠杆菌纯化
- 利用Cre／lox重组系统在转基因动物中筛选高效表达外源基因的“友好”基因座被引量：3
- 2004年
- 本实验的目的是利用Cre／lox重组系统进行“友好”基因座的筛选，即利用一个两端带有lox位点的标记基因去转染动物细胞或生产转基因动物，获得可以高效表达外源基因的“友好”基因座。一旦筛选到好的基因座，就建成了一个可以在动物体稳定地高效表达外源基因的技术平台。为此，利用野生型loxP位点和含有一个点突变的lox511位点分别构建两个载体pSL-loxGFP和pSL-loxIFN。首先将含有GFP和新霉素基因的质粒pSL-loxGFP DNA转染牛胎儿成纤维细胞，并用G418筛选，挑选出发绿色荧光的细胞克隆。经增殖培养之后，再将含有鸡γ-干扰素基因的质粒pSL-loxIFN和含有Cre重组酶基因的质粒pBS185 DNA共转染发荧光的细胞克隆，筛选出发生重组后不再发光的细胞克隆。用PCR法检测了两个不发荧光的细胞克隆及发荧光的细胞克隆，并使用质粒pSL-loxIFN、质粒pSL-loxGFP及牛基因组作为对照。检测结果显示，在Cre重组酶的作用下，两个不发荧光的细胞克隆中，一个发生了基因置换，另一个发生了基因删除。以上实验表明，巧妙地用Cm／lox重组系统，可以构建一套使外源基因在动物体内定点地高效表达的技术体系。
- 桑璐郭英任立明安晓荣候健关宏陈永福
- 关键词：细胞克隆IFN基因座共转染CRE/LOX
- 毛囊的周期性变化和分子调控及其在绒山羊上的研究进展被引量：21
- 2009年
- 毛囊是一个形态和结构较为复杂的皮肤附属器官,它控制着毛发的生长,具有自我更新和周期性生长的特点。毛囊的周期性变化依靠毛囊上皮细胞和真皮间充质细胞的相互作用,先是毛囊长出毛干为生长期,接下来是凋亡驱动的退行期,然后进入休止期。其变化过程是一系列信号分子相互作用形成的,包括启动信号、维持毛囊生长的信号及抑制毛囊生长的信号等。绒山羊初级毛囊和次级毛囊在出生后也表现周期性变化,次级毛囊由于光周期的影响而呈很强的季节性的周期变化,而初级毛囊则变化不明显。山羊绒是绒山羊次级毛囊的衍生物,次级毛囊的生长发育直接影响山羊绒的产量和品质。因此,研究皮肤毛囊周期性变化的规律及它们的分子调控机理不仅可揭示毛囊的发育规律而且对绒山羊的育种具有重要指导意义。
- 刘志红任立明郭英胡晓湘崔文涛李宁尹俊李金泉
- 关键词：绒山羊毛囊
- 体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用
- 李宁李秋艳卫恒习戴蕴平张运海潘登科张磊汤波娄彦坤李燕马育芳李俊郭英王莉莉张坤赵蕊
- 体细胞克隆猪技术属于现代生物学高新技术领域，它是通过特定的技术手段，将猪的体细胞核导入到去核的成熟卵母细胞中形成克隆胚胎，然后在特定阶段把克隆胚胎移植到代孕母体的子宫内完成发育，得到与供体细胞在遗传上完全一致的后代。体细...
- 关键词：
- 关键词：克隆猪体细胞克隆转基因
- 密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量：23
- 2002年
- 以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或AGG)替换掉 ,通过基因合成得到密码子优化的牛精蛋白基因 ,将其克隆入原核表达载体pGEX 2T ,组装成表达载体pGEX 2T PS。将这两个表达载体分别转化入大肠杆菌表达菌株BL2 1中 ,经IPTG诱导 ,同样条件下 ,野生型牛精蛋白基因无法得到表达 ,密码子优化的牛精蛋白基因能够得到良好的表达 ,表达产物约占细菌总蛋白的 18%。将表达蛋白纯化 ,进行DNA—蛋白结合实验 ,发现其能与DNA发生非特异性的结合。
- 张雅丽杨国庆郭英陈永福
- 关键词：密码子优化大肠杆菌基因表达
- 禽流感病毒M2胞外区(M2e)多拷贝片段的原核表达及其免疫原性分析被引量：1
- 2011年
- 目的:构建禽流感病毒M2基因胞外区(M2e)多拷贝片段的原核表达载体,并对表达、纯化的重组蛋白进行免疫原性的分析。方法:以含有全长M2基因的质粒19T-M2为模板PCR扩增获得M2e,通过PCR及同尾酶连接的技术构建一系列的M2e多拷贝中间载体,得到顺次连接的9个拷贝M2e(9c),将其克隆到原核表达载体pET-32a中,经酶切和DNA测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达情况。用纯化后的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取动物血清作ELISA检测M2e特异性抗体IgG并取脾脏细胞作ELISpot检测细胞分泌IFN-γ的情况。结果:结果显示,重组菌能够表达出一条相对分子质量(Mr)约为45 000的可溶性融合蛋白(M2e-9c),该蛋白表达量约占菌体表达量的37.2%。纯化蛋白免疫小鼠后,M2e特异性IgG滴度可达到1×104,M2e肽段能够刺激免疫组小鼠脾细胞分泌IFN-γ且具有一定的浓度依赖性。结论:M2e多拷贝重组蛋白可以诱导小鼠产生抗M2e特异性的抗体反应和细胞免疫反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性,为流感病毒广谱疫苗的进一步研发打下了基础。
- 石佳郑世军崔胜郭英任立明徐小宁
- 关键词：禽流感病毒M2原核表达免疫原性ELISPOT
