郭志鸿
- 作品数：85 被引量：225H指数：8
- 供职机构：中国科学院寒区旱区环境与工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- DRE顺式作用元件dsDNA芯片制备被引量：2
- 2009年
- DRE顺式作用元件能与DREB转录因子特异结合,在诱导逆境(干旱、高盐、低温)基因表达过程中起重要作用。dsDNA(double strand DNA)微阵列芯片技术能够有效地检测序列特异性DNA结合蛋白质(转录因子)与大量DNA靶点(顺式作用元件)的特异性结合,可有效分析生物分子结合作用。根据DRE顺式作用元件核心序列设计并化学合成含发夹结构的单链DNA探针,采用TaqDNA聚合酶在片延伸,并对其在片延伸体系的反应温度、Mg2+浓度以及单链探针是否变性等条件进行了优化。结果表明,50℃的反应温度,2.5mmol/L的Mg2+浓度和单链不变性是TaqDNA聚合酶在片延伸的最佳条件。优化方法制备的dsDNA芯片将更有利于DRE顺式作用元件与DREB抗逆转录因子相互作用的研究。
- 张玉宝郭志鸿李同祥王亚军谢忠奎
- 关键词：DREB转录因子
- 一种百合隐症病毒和百合斑驳病毒复合胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法
- 一种百合隐症病毒和百合斑驳病毒复合胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法，该试剂卡包括试剂卡槽、衬板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸，其中胶体金结合垫上含有复合金标探针，衬板固定于试剂卡槽中，样品垫、胶体金结合...
- 张玉宝王亚军谢忠奎郭志鸿王若愚何玉惠
- 文献传递
- 细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建CTxB-Eg95(TP)融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95(TP)融合蛋白。方法采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95(TP)并鉴定。分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建pET-CTxB-Eg95(TP)重组质粒。将鉴定为阳性的重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果测序结果表明已成功构建CTxB-Eg95(TP)融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果显示,转染pET-CTxB-Eg95(TP)的E.coliBL21(DE3)菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果一致。结论CTxB-Eg95(TP)融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础。
- 王志力王亚军谢忠奎郭志鸿张玉宝
- 关键词：霍乱毒素B亚单位融合基因原核表达
- 一种特异性检测百合斑驳病毒的试剂盒及其检测方法
- 一种特异性检测百合斑驳病毒LMoV的IC‑RT‑LAMP试剂盒及其检测方法，试剂盒主要包括特异性LMoV抗体IgG、特异性RT反向引物LMoV‑R、特异性LAMP引物组、第一链cDNA合成试剂、LAMP扩增反应试剂、荧光...
- 张玉宝王亚军谢忠奎杨果郭志鸿邱阳何玉惠
- 文献传递
- 利用ihpRNA介导的基因沉默培育抗冷糖化马铃薯被引量：4
- 2007年
- 为培育抗冷糖化的转基因马铃薯材料,克隆了368 bp的马铃薯酸性转化酶(AcInv)基因3′端非翻译区(3′UTR)和281 bp的马铃薯VP1-ABI3-like protein基因的第一内含子,构建了内含子连接的马铃薯AcInv基因3′UTR的发夹型RNA(ihpRNA)载体pBIV;采用微束激光穿刺技术转化马铃薯品种,得到了149个转基因株系,其中139个转基因株系在低温贮藏35 d时块茎还原糖含量低于亲本材料。RT-PCR分析表明还原糖含量降低的转基因植株中检测不到AcInv基因mRNA的积累。本研究结果表明以3′UTR作为RNAi载体的干涉片段可以有效地抑制靶标基因mRNA的积累,通过对AcInv沉默可获得抗低温糖化的马铃薯育种材料。
- 郭志鸿张金文王蒂陈正华
- 关键词：马铃薯酸性转化酶
- 东方百合低温打破休眠期间碳水化合物及呼吸代谢变化被引量：4
- 2012年
- 以东方百合"西伯利亚"为试材,对不同温度(25℃和4℃)处理下百合外部及内部鳞片的碳水化合物含量和呼吸代谢途径的关键酶进行了测定。结果表明,随着储藏时间的延长,百合淀粉含量不断下降,可溶性糖含量在低温处理中期较高,且外部鳞片变化较内部鳞片变化剧烈,4℃低温处理糖化比25℃明显;在百合休眠期间,3条主要呼吸代谢途径的关键酶——糖酵解(EMP)途径的丙酮酸激酶(ATP)、三羧酸循环途径(TCA)的琥珀酸脱氢酶(SDH)和磷酸戊糖途径(PPP)的葡萄糖六磷酸脱氢酶(G6PDH)呈现不同的变化趋势。根据不同途径关键酶的变化趋势判断,处理前30d,3条主要呼吸途径变化较剧烈,EMP占绝对优势且不断升高,TCA和PPP呈不断下降过程,且内部鳞片变化比外部鳞片明显;其后随着休眠处理时间的延长,EMP不断下降,而TCA和PPP不断得到活化;呼吸强度变化趋势与碳水化合物自然休眠解除的进程基本一致。
- 张亚娟谢忠奎高宏安丽萍郭志鸿张玉宝
- 关键词：东方百合休眠碳水化合物呼吸代谢
- 用免疫捕获双重RT-PCR同步检测百合隐症病毒和斑驳病毒的方法
- 本发明提供了一种免疫捕获双重RT?PCR同步检测百合隐症病毒和百合斑驳病毒的方法，其步骤包括在同一个PCR反应管中用LSV和LMoV的多克隆抗体特异性捕获LSV和LMoV粒子、利用LSV和LMoV的特异性引物进行双重反转...
- 张玉宝王亚军谢忠奎王若愚杨果郭志鸿王乐
- 文献传递
- 一种兰州百合椰子饮料及其制备方法
- 本发明涉及食品制备技术领域提供了一种兰州百合椰子饮料及其制备方法，兰州百合椰子饮料的制备方法包括如下制备步骤：百合浆液榨取：将经沸水预煮后沥水过的新鲜兰州百合加入其质量1～3倍的沸水中打浆得粗浆液，将粗浆液采用胶体磨细磨...
- 邱阳谢忠奎王亚军郭志鸿何玉惠张玉宝
- 文献传递
- 一种百合草莓潜隐环斑病毒SLRSV半定量检测金标卡的制备方法
- 一种百合草莓潜隐环斑病毒半定量检测金标卡及制备方法，为了提高胶体金免疫层析检测方法的使用效率和田间普及率，实现对百合病毒的快速且半定量检测，将检测线增加至三条，再将已知量的有浓度差异的抗体分别包被于检测线，研制能快速半定...
- 张玉宝陈延王亚军谢忠奎王若愚王乐郭志鸿
- 文献传递
- 内源IAA、GA_3调控对百合试管苗生长的影响研究被引量：3
- 2016年
- 以东方百合‘Sorbonne’试管苗为对象,对不同浓度IAA及其抑制剂(TIBA)添加后试管苗茎叶和根的生长情况进行了研究,测定了试管苗中内源激素(IAA,GA_3,Zeatin)的变化。数据显示10 mg·L^(^(-1))IAA促进试管苗茎叶、根生长的效果最佳而40 mg·L^(^(-1))IAA抑制试管苗的生长,TIBA抑制试管苗茎叶、根生长的效果显著。内源激素测定结果表明外源IAA及TIBA处理影响了内源激素的变化,IAA对生长的影响可能是通过调节内源激素的变化而实现的。结合生长情况及内源激素变化的分析结果表明:过高浓度的IAA、过低浓度的GA_3都不利于试管苗生长,内源IAA和GA_3在适宜浓度下才能发挥促进生长的作用;内源Zeatin在试管苗的生长调控中可能不发挥作用。本实验为百合种植中外源激素的合理使用提供了依据,有助于提升百合种植者的经济效益。
- 杨柳王乐谢忠奎郭志鸿张玉宝
- 关键词：百合内源激素
