邵改革
- 作品数：34 被引量：75H指数：6
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 转基因作物中常见Bt基因PCR检测方法的建立被引量：1
- 2017年
- 建立基于常见外源基因的转基因成分检测方法是开展转基因生物监测与检测活动的技术支撑,Bt基因作为目前商业化应用最广泛的一类外源基因,已成为转基因产品筛选检测的重要靶标。依据转基因作物中常见的6种Bt基因(cry1F、cry1C、cry1Ie、cry34Ab、cry35Ab、vip3A)的核苷酸序列设计特异性PCR引物,并经过特异性、灵敏度等一系列测试,建立上述6种Bt基因的定性PCR检测方法。结果显示,应用这些方法均可从含有相应Bt基因的样品中正确检测出预期转基因成分,方法的灵敏度可达0.10%。上述方法具有特异性强、灵敏度高等特点,适用于转基因作物中常见Bt基因的筛选检测。
- 邵改革闫伟夏蔚李葱葱龙丽坤李飞武
- 关键词：转基因作物BT基因
- 转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由6条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1~6所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×...
- 李飞武闫伟夏蔚邵改革龙丽坤李葱葱刘娜董立明邢珍娟张明
- 文献传递
- 抗除草剂Bar基因的优化及PAT蛋白的表达
- 2015年
- 利用生物信息学方法优化了适用于原核表达的Bar基因序列密码子,克隆了Bar基因序列并构建了p ET28a-Bar融合表达载体,并转入大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)。结果表明,融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式表达膦丝菌素乙酰转移酶(PAT蛋白质),并通过镍离子亲和层析纯化后获得了PAT蛋白质,该纯化蛋白质的获得为利用酶联免疫法定量检测和筛选转基因植物提供了必要前提。
- 李葱葱李飞武谭喜昌夏蔚邵改革龙丽坤
- 关键词：BAR基因原核表达分离纯化
- 转EPSPS基因大豆植株中蛋白的表达被引量：4
- 2009年
- 采用ELISA定量测定法研究了转EPSPS基因大豆不同生长时期不同器官中CP4EPSPS蛋白含量的变化。结果表明：转EPSPS基因大豆不同器官在不同生育期CP4EPSPS蛋白含量表现出较大的差异，R8期籽粒中的CP4EPSPS蛋白含量在所有时期和所有组织中蛋白含量最高；上位叶和下位叶中CP4EPSPS蛋白除V3～V5期和R8期外的表达趋势一致，茎上部和茎下部中CP4EPSPS蛋白存不同时期表达动态趋势基本一致，根中CP4EPSPS蛋白含量在V3～V5期下降，然后逐渐升高，R1～R8期有一个大幅度的下降过程。从V1期至R8期，随着植株的不断生长，各组织中CP4EPSPS蛋白的含量有明显的变化。
- 邢珍娟李飞武刘娜李葱葱康岭生宋新元邵改革张明
- 关键词：转基因大豆酶联免疫吸附测定
- 转基因玉米MON89034定性PCR检测技术研究被引量：1
- 2010年
- 根据转基因抗虫玉米MON89034外源插入片段3′端与植物基因组连接区序列设计特异性引物，建立MON89034玉米转化体特异性定性PCR检测方法，预期产物大小为493bp。对该方法进行特异性和灵敏度测试，结果显示：该方法能够特异性检测出MON89034玉米转化体，以100ngDNA为模板，该方法的检测灵敏度达到0．1％。复合PCR检测结果还表明，在同一PCR反应管中可实现zSSIIb基因和MON89034玉米特异性片段的同时检测。
- 李飞武董立明李葱葱闫伟邵改革赵宁张明
- 关键词：转基因生物抗虫玉米
- 应用单管巢式和半巢式PCR检测转基因玉米MON89034被引量：7
- 2016年
- 根据MON89034玉米的5’端和3’端边界序列分别设计1组转化体特异性的巢式PCR引物,采用中途进退式PCR策略建立MON89034玉米的转化体特异性检测方法,扩增产物分别为491 bp和188 bp。以转基因玉米MON89034及8种其他转基因作物为材料,证明此方法对MON89034玉米具有高度特异性。灵敏度测试结果表明,此方法的相对检出限达到0.01%,绝对检出限为4个单倍体基因组拷贝数,比普通PCR提高了5倍。建立的单管巢式和半巢式PCR方法可准确、高效地检测转基因玉米MON89034及其产品。
- 闫伟李葱葱夏蔚邵改革李飞武
- 关键词：转基因玉米巢式PCR
- 转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由6条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1~6所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×...
- 李飞武闫伟夏蔚邵改革龙丽坤李葱葱刘娜董立明邢珍娟张明
- 文献传递
- 转植酸酶基因玉米籽粒中植酸酶的提取与检测方法
- 一种转植酸酶基因玉米籽粒中植酸酶的提取与检测方法，其特征在于：提取液pH为5.50，料液比为1∶4，提取时间为15min；将上述提取物与浓度为0.1mmol/L的底物应用液在pH为5.50的乙酸缓冲溶液中反应30min。...
- 宋新元于壮刘娜李静张欣芳张明李飞武李葱葱邢珍娟邵改革康岭生董立明夏蔚赵宁
- 文献传递
- 转基因植物中cry34Ab基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因植物中<i>cry34Ab</i>基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由4条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1~4所示。检测试剂盒包括检测引物...
- 李飞武董立明闫伟夏蔚邵改革李葱葱邢珍娟刘娜
- 文献传递
- 四重PCR结合全自动电泳系统检测食品转基因成分被引量：2
- 2014年
- 根据转基因食品中最常见的四种外源元件(CaMV35S启动子、NOS终止子、cry1Ab/cry1Ac基因、bar基因)的核苷酸序列,设计特异性检测引物,扩增产物大小分别为101、180、301、430bp,通过引物浓度、退火温度的优化,特异性、灵敏度测试,并结合微流体芯片全自动电泳技术,建立了同时检测这4个参数的四重PCR方法。结果表明,该方法可特异性地从复杂样品中检测出预期转基因成分,检测灵敏度达到0.1%。本方法特异性好,灵敏度高,适用于食品中转基因成分的快速筛查。
- 邵改革闫伟董立明韩舜愈李飞武张明
- 关键词：转基因生物多重PCR
