邱文洪 作品数:58 被引量:245 H指数:10 供职机构: 江汉大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 湖北省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
慢病毒介导的shRNA靶向干扰I2PP2A胃癌稳定细胞株的建立 2015年 背景与目的:蛋白磷酸酶2A抑制剂-2(inhibitor 2 of protein phosphatase 2A,I2PP2A)在包括胃癌的多种肿瘤中过度表达,提示其可能在胃癌的发生中发挥重要作用。为进一步探讨I2PP2A的功能及其在胃癌发生中的作用,建立稳定抑制I2PP2A基因表达的人胃癌BGC823细胞株。方法:筛选出I2PP2A基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA并构建p GLV2_sh RNA_I2PP2A慢病毒载体,酶切和测序鉴定正确后,经病毒包装,感染BGC823细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株,通过实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)鉴定I2PP2A的表达。结果:重组慢病毒质粒经测序鉴定正确;RT-PCR和Western blot证实干扰I2PP2A后,BGC823细胞株中I2PP2A表达水平明显降低,抑制率约为90%。结论:成功构建了I2PP2A sh RNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制I2PP2A基因表达的人胃癌BGC823细胞株,为进一步研究I2PP2A在胃癌发生中的作用提供了可靠的细胞模型。 师海蓉 陈莹 李长雷 邱文洪关键词:胃癌 慢病毒 人Gal-9基因的克隆及在CHO细胞中的表达 被引量:1 2011年 目的:构建β-半乳糖苷结合凝集素-9(Gal-9)的真核表达载体,在CHO细胞中表达,并检测其表达。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Gal-9基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法检测Gal-9的表达,MTT法检测Gal-9对同种异体淋巴细胞增殖的影响。结果:DNA测序和酶切鉴定证明Gal-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法,在分子和蛋白水平证实Gal-9的表达,MTT法检测显示,Gal-9明显抑制同种异体淋巴细胞增殖反应,平均抑制率达85.43%。结论:成功构建pGal-9的真核表达载体,证实其在CHO细胞中可以成功表达,并抑制同种异体淋巴细胞增殖反应。 郭凯文 邱文洪 许楚娟 易路阳关键词:真核表达载体 Survivin特异性siRNA增强人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性 2008年 目的探讨Survivin特异性siRNA对人胰癌细胞株Panc-1顺铂敏感性的影响。方法体外将Survivin特异性siRNA表达载体pSurvivin-siRNA转染人胰癌细胞株Panc-1,应用RT-PCR、蛋白印迹法(Western blot)检测转染siRNA后Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达变化,应用MTT法检测干扰Survivin后Panc-1细胞对顺铂敏感性的变化。结果转染Survivin特异性siRNA后,Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达水平明显下降;顺铂对Panc-1细胞的半数抑制量从(11.9927±1.1470)μg/ml下降到(1.2382±0.0857)μg/ml,Panc-1细胞对顺铂的敏感性增加了9.69倍。结论Survivin特异性siRNA抑制Survivin表达,能增加人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性。 邱文洪 郭凯文 宋文剑 沈关心关键词:SURVIVIN 人胰腺癌 顺铂 癌细胞裂解物修饰的DC疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用 被引量:5 2003年 目的 观察经胰腺癌细胞裂解物修饰的DC疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用。方法 通过胰腺癌细胞裂解物修饰小鼠DC制成DC疫苗 ,研究其对小鼠抗胰腺癌的免疫保护作用 ,并评估了其对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗效果。结果 DC疫苗组的小鼠接种胰腺癌细胞 2 5d后未见移植肿瘤形成 ,其余各组在 3~ 9d后可见有移植肿瘤的生长。DC疫苗组的CTL对胰腺癌细胞有明显的细胞毒作用 ,但其余各组的CTL则缺乏明显的细胞毒作用。DC疫苗组小鼠的生存期 (5 6± 9)d比其余各组明显延长 ,且肿瘤重量 (1 4± 0 8)g明显低于其余各组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 癌细胞裂解物致敏的DC可诱导荷瘤小鼠产生高效的抗胰腺癌免疫应答反应。 唐朝晖 邹声泉 邱文洪 杨想平 裘法祖关键词:DC疫苗 胰腺癌 荷瘤小鼠 免疫治疗 顺应社会需求凝练全科医学办学特色 被引量:1 2019年 近年来,全科医生资源短缺的问题引起了社会各界的广泛关注,为促进紧缺专科医疗人才培养,学校在全省率先开展了临床医学全科医学生的培养,在教育教学过程中,不断探索全科医学教育模式,完善教学保障体系,培养符合社会需求并全面发展的全科医学人才,以缓解专科医疗人才紧张的局面。 付艾妮 朱书秀 邱文洪 舒细记关键词:全科医学 Survivin-siRNA增强人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性 被引量:1 2008年 目的探讨RNA干扰技术抑制survivin对人胰癌细胞株Panc-1细胞顺铂敏感性的影响。方法体外设计、合成针对survivin的小分子干扰RNA(siRNA),并转染人胰癌细胞株Panc-1,应用RT-PCR、蛋白印迹法(western blot)检测转染siRNA后Panc-1细胞survivin基因和蛋白的表达变化,应用MTT法检测干扰survivin后Panc-1细胞对顺铂敏感性的变化。结果转染针对survivin的siRNA后,Panc-1细胞survivin基因和蛋白的表达水平下降;转染survivin-siRNA后,Panc-1细胞对顺铂的半数抑制量从(11.9927±1.147)g/ml提高到(2.2049±0.0857)g/ml,Panc-1细胞对顺铂的敏感性增加了5.44倍。结论RNA干扰技术抑制Survivin能增加人胰癌细胞株Panc-1细胞对顺铂的敏感性。 邱文洪 郭凯文 宋文剑 沈关心关键词:人胰腺癌 顺铂 胰腺癌患者外周血中树突状细胞的分离、纯化与扩增 被引量:4 2003年 目的 探讨从胰腺癌患者外周血中分离、纯化与扩增树突状细胞 (DC)的有效方法。方法 分别从健康人(1 0例 ,对照组 )和胰腺癌患者(1 2例 ,实验组 )外周血中分离出单核细胞 ,而后将实验组的单核细胞与GM CSF及IL 4共同培养 ,用免疫荧光法和流式细胞仪检测培养前、后的DC数量及DC表面HLA DR及B7 2的表达水平 ,并与对照组比较。结果 与对照组相比 ,实验组DC表面HLA DR及B7 2表达水平较低 (P<0 .0 1 ) ;经GM CSF及IL 4联合培养 7天后 ,其单核细胞中的DC数较培养前明显增多 (P<0 .0 1 ) ,且DC表面HLA DR及B7 2表达水平较培养前明显增高 (P<0 .0 1 ) ,与对照组相比则无明显差异(P>0 .0 5)。结论 GM CSF与IL 唐朝晖 邹声泉 邱文洪 杨想平 裘法祖关键词:胰腺癌 树突状细胞 白细胞介素-4 Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究 被引量:2 2008年 目的观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响。方法体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果。采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶3(caspase3)的表达变化。结果p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期。随着survivin基因被沉默,caspase3表达升高(P<0.01)。结论靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡。 邱文洪 郭凯文 宋文剑 沈关心关键词:生存素 SIRNA 胰腺癌 细胞凋亡 借鉴结构主义教学理论构建新型医学免疫学理论教学模型的探讨 被引量:1 2012年 本文对结构主义教学模式在自然科学领域中的具体实施进行分析,并借鉴我国现行的教育状况,设置了更加合乎国情的新型医学免疫学理论教学模式,明确了结构主义教学模式在本科生医学免疫学理论教学中具有的良好作用。 郭凯文 邱文洪 艾永循 徐楚娟 宋文剑 陈朝霞关键词:教学改革 医学免疫学 本科生培养 医学免疫学课程思政育人体系的构建及其教学方法探究 被引量:1 2023年 课程思政是融合专业理论课中的德育元素与智育元素、发挥课堂协同育人作用的创新教育模式。医学生是国家未来医疗体系的栋梁之材,医学生的智育和德育素质直接关系国家大健康战略的实现情况。医学免疫学是一门重要的医学专业基础必修课,该文基于医学免疫学的学科特点以及医学生的人才培养目标,明确课程思政融入医学免疫学教学的重要性、融入途径和具体方法,以期培养医学生的家国情怀、人文素养、职业道德和科学精神。 史颖颖 施璐 孙宾莲 邱文洪关键词:医学免疫学