辛殿旗
- 作品数：40 被引量：156H指数：8
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三种人工半合成的酸性粘多糖对水草酸晶体表面zeta电位影响的研究
- 辛殿旗曹履诚
- 关键词：粘多糖晶体电位测定
- 正常人和结石病人尿中不同分子量的分离物对草酸钙晶体的影响被引量：2
- 1994年
- 尿中不同分子量的大分子分离物，由于分子量、化学结构、化学性质的不同，对尿石形成的作用也不相同。而分子量相同的大分子分离物，正常人和病人也有明显的差异。作者认为这种差异是结石形成的一个重要因素，也是我们进一步探讨尿石症发病机理的一个新突破口。
- 辛殿旗冯陶窦长琪沈绍基
- 关键词：尿结石晶体
- TGF-β_1及其受体在两种人肾癌细胞系中的表达被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)及其受体在人肾癌细胞系和正常肾细胞中的作用。 方法 应用免疫细胞化学 (LSAB)和RT PCR方法 ,检测二种人肾癌细胞系 (GRC 1和RCC 949)和一种原代培养肾纤维母细胞 (PRF)TGF β1及其Ⅰ和Ⅱ型受体的表达情况。 结果 三种细胞均表达TGF β1和I型受体 ,其中RCC 949表达Ⅱ型受体量较原代培养肾纤维母细胞减少 ,而GRC 1则不表达。 结论 由于人肾癌细胞系表达Ⅱ型受体量减少或丢失 ,因而对TGF β1抑制作用减弱 ,这可能是肾癌细胞系呈侵袭性生长的部分原因。
- 郭宏骞薛兆英庄立岩丁义辛殿旗张志文李钟郭应禄
- 关键词：肾肿瘤TGF-Β1受体
- 应用抑制性消减杂交技术克隆鉴定肾癌特异表达基因被引量：12
- 2000年
- 应用抑制性消减杂交技术（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），成功地构建了高消减效率的人肾癌细胞与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库，从中随机挑取２００个克隆进行酶切分析，结果显示其中１９０个均得到５０～４００ｂｐ插入片段，１０个无插入片段。对其中１０个插入的ｃＤＮＡ片段进行测序后经ＧｅｎＢａｎｋ检索表明１０个片段均为未知新序列。
- 张强张志文龚侃辛殿旗那彦群郭应禄
- 关键词：肾肿瘤抑制性消减杂交特异表达基因肾癌克隆
- 应用抑制消减杂交技术筛选人肾癌差异表达新基因被引量：8
- 2002年
- 背景与目的:认识肾癌差异表达基因有助于阐明肾癌发生、发展的分子机制,但至今有关肾癌差异基因尤其肾癌特异相关基因的研究仍不令人满意。本实验应用抑制消减杂交技术筛选人肾癌组织与正常肾组织间差异表达的新基因,以期克隆出新的肾癌特异相关基因。方法:以肾癌组织mRNA为检测对象(Tester),正常肾组织mRNA为驱赶者(Driver),构建cDNA消减文库。随机挑取文库克隆进行酶切及测序,所得结果在GenBank中做同源性比对分析,对感兴趣的片段进行电子定位确定其在染色体的位置。用Northernblot、半定量RT-PCR方法检测新基因在肾癌组织与正常肾组织中的差异表达。结果:文库包含414个阳性克隆;随机挑取280个克隆提取质粒并酶切分析,其中265个有插入片段;将其中80个克隆进行测序,初步显示28、158、170、249号4个克隆为新基因片段,电子定位表明上述4个基因分别位于染色体21q22、4p15.3、9q34、22q11.2,已在GenBank中登录(BM181083,BI784487,BI863835,BI863386)。对其中28、170号克隆用Northern杂交、半定量RT-PCR检测,证实新基因在肾癌组织中表达较正常肾组织显著增高。结论:抑制消减杂交技术是筛选、克隆肾癌差异表达新基因的有效手段;筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础。
- 艾军魁黄啸王雨娟白银吕英谦叶雄俊辛殿旗那彦群张志文郭应禄
- 关键词：抑制消减杂交肾肿瘤基因
- 一水草酸钙与二水草酸钙结石形成机理的研究被引量：9
- 2000年
- 目的 探讨一水草酸钙（ＣＯＭ） 与二水草酸钙（ＣＯＤ） 结石形成的机制。 方法 应用红外光谱仪对２５８ 块尿结石成分进行检测，同时检测３０ 例患者２４ｈ 尿液生化指标，对测定结果利用ＳＰＳＳ软件进行ｔ 检验。 结果 （１） 尿钙：ＣＯＭ 组（４．８３ ±１ ．９８）ｍ ｍｏｌ／２４ｈ，ＣＯＤ 组（９．８８ ±４ ．２８）ｍｍｏｌ／２４ｈ，Ｐ＜ ０ ．０１ ；（２） 尿磷：ＣＯＭ 组（１９ ．４０ ±９．６９）ｍ ｍｏｌ／２４ｈ，ＣＯＤ 组（２９．２０ ±１２．００）ｍ ｍｏｌ／２４ｈ，Ｐ＜ ０．０５，两组尿钙、尿磷差异有显著性。 结论 二水草酸钙结石患者尿钙、尿磷高于一水草酸钙结石患者，表明二水草酸钙的形成与高钙尿及磷酸盐异质成核有关，而一水草酸钙的形成可能与尿中抑制物缺乏有关。
- 付杰辛殿旗殷延林张蓓姜丽郭应禄
- 关键词：尿结石草酸钙
- 肾癌相关基因克隆——肾癌cDNA消减文库的构建被引量：9
- 2000年
- 应用抑制性消减杂交技术 ,构建人肾癌与正常肾差异表达的cDNA消减文库 .分别从肾癌及正常肾细胞系中提取 poly (A) +RNA ,依次合成单链及双链cDNA ,经酶切成平均大小为 4 0 0～ 60 0bp的片段 ,将肾癌cDNA分为两组 ,分别与两种不同的接头衔接 ,再与正常肾cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后 ,将产物与T/A载体连接构建成功cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 .构建成功具有高消减效率的人肾癌cDNA消减文库 ,非特异性cDNA片段被有效地消减 ,特异表达的cDNA得到富集 .文库扩增后得到 650 0个克隆 ,随机挑取 3 50个制备质粒 ,酶切分析均得到 4 0 0～ 60 0bp插入片段 .所构建的人肾癌cDNA消减文库为进一步大批量筛选。
- 张强毛泽彬张志文辛殿旗郭应禄
- 关键词：抑制性消减杂交肾癌CDNA消减文库基因克隆
- T细胞因子4在肾癌中的表达及其意义被引量：11
- 2000年
- 目的 研究Wnt/Frizzled信号通路在核内的转导及其主要信号分子T细胞因子 4(TCF4)在肾癌发生发展中的作用。 方法 采用RT PCR及NorthernBlot的方法检测了TCF4基因在肾癌组织及正常肾组织 ,肾癌细胞系GRC I和正常肾小管上皮细胞系HK 2中的表达。 结果 TCF4在肾癌组织及细胞系中强表达 ,且存在剪接性突变 ,形成了 30 0bp左右的突变基因。 结论 TCF4作为Wnt/Frizzled信号通路的核内信号分子 ,在肾癌发生和发展中具有重要作用 ,其致病机理与TCF4的剪接性突变有一定关系。
- 林桂亭藏桐张志文辛殿旗郭应禄
- 关键词：基因表达肾肿瘤TCF4基因调控
- 肾癌差异表达基因的克隆及意义(英文)被引量：3
- 2001年
- 目的 克隆并鉴定肾癌与正常肾之间差异表达的基因 ,为研究肾癌发生发展的分子生物学机制奠定基础。方法 应用抑制性消减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH) ,构建人肾癌组织与正常肾组织差异表达的cDNA消减文库 ,并从中克隆鉴定出肾癌差异表达的基因。结果 构建成功高消减效率的人肾癌组织cDNA消减文库 ,对其中 10个克隆插入的cDNA片段进行测序后经GenBank检索表明 10个片段均为未知新序列 ,其中RCC18为 5个拷贝 ,这提示以上 10个cDNA片段可能来自 6个新基因。Northernblotting分析显示RCC18在肾癌组织中有明显表达 ,而在正常肾组织中无表达 ,这证明RCC18是肾癌特异表达的新基因。应用SMARTRACE技术获得RCC18基因的全长。结论 人肾癌cDNA消减文库的建立为进一步大批量筛选、克隆肾癌特异性表达的未知新基因奠定了基础。初步筛选出的新基因为研究肾癌发生发展中的分子生物学机制提供了重要线索。
- 张强辛殿旗那彦群郭应禄张志文
- 关键词：肾肿瘤抑制性消减杂交文库克隆
- hTCF_4酵母双杂交载体的构建
- 2002年
- 目的 研究Wnt Frizzled信号传导通路上的主要信号分子T细胞因子 (TCF4)在细胞核内转导的辅激活物和辅阻遏物。方法 通过PCR法以真核表达载体pCDNA TCF4为模板 ,扩增获得了15 0 0bp的TCF4基因的末端及DNA结合域片段 ,经过SalI ,NotI酶切后 ,基因重组的方法定向克隆于酵母双杂交载体pPC86和pDBleu中 ,构建形成pDBleu TCF4和pPC86 TCF4真核表达载体。结果 经转化 ,提取质粒酶切鉴定表明构建成功。结论 hTCF4酵母双杂交载体的构建成功为Wnt Frizzled信号通路的深入研究奠定了基础。
- 林桂亭张志文藏桐辛殿旗郭应禄
- 关键词：酵母双杂交亚克隆
