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昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响: 2012年; 本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4～5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3～4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1～2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显著降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3～4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。; 张翠平邱小燕肖雄赵海龙邓玉金李跃民; 关键词：胚龄培养液 ICM 昆明小鼠

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响被引量：3: 2012年; 通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组(P>0.05),并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油(GL)组(P<0.05),且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清(FBS)+100mL/L DMSO+DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。; 肖雄邓玉金赵海龙吴有博李跃民; 关键词：冷冻保存小鼠

氯化锶对去透明带卵母细胞孤雌激活效果及孤雌胚胎体外发育体系的研究: 2012年; 本实验以昆明小鼠为研究对象,探讨了5 mmoL/L、10 mmoL/L及20 mmoL/L氯化锶(SrCl2)激活去透明带MⅡ期卵母细胞的效果,并比较了孤雌激活卵母细胞在普通DMEM培养液与添加有10 ng/mL有白血病抑制因子(LIF)的DMEM培养液中的体外发育率,旨在探讨去透明带卵母细胞适宜的SrCl2孤雌激活浓度及孤雌胚胎体外培养体系。结果表明:10 mmoL/L与5 mmoL/L SrCl2作用6 h所得激活率差异不显著(46.00%vs 40.38%,P>0.05),但显著高于20 mmoL/L SrCl2的激活率(46.00%vs 24.62%,P<0.05);将10 mmoL/L SrCl2激活处理6 h后得到的激活胚胎分别以DMEM培养液和LIF+DMEM培养液培养48 h,其桑葚胚分化率分别为44.00%及84.62%,组间差异显著(P<0.05)。因此,宜采用10 mmoL/L SrCl2激活去透明带MⅡ期卵母细胞,并移入到10 ng/mL LIF+DMEM培养液进行体外培养。; 何允肖雄邓玉金赵海龙李跃民; 关键词：孤雌激活氯化锶

羊血涂片五种染色方法的比较被引量：1: 2012年; 血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值[1-3]。近年来，随着血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器检查结果的简易方法。血涂片的制作是一个基本实验操作，制作出染色清晰、对比鲜明的血涂片是人们一直追求的目标。染色的好坏固然与涂片的好坏有关，但染色方法的诜择对染色效果县军关莺要的。; 张翠平肖雄赵海龙邓玉金李跃民; 关键词：血涂片显微镜检查血细胞分析仪染色效果

不同浓度链球菌溶血素O对小鼠胎儿成纤维细胞生长状态的影响: 2012年; 本研究比较了0、10、25、50 U或100 U链球菌溶血素O(SLO)处理下的小鼠胎儿成纤维细胞(MEFs)的细胞密度、存活率、贴壁率,并绘制了适宜浓度SLO下MEFs的生长曲线。结果表明:25 U SLO处理组的细胞密度与10 U SLO处理组间差异不显著(P>0.05),但极显著高于50 U和100 U SLO处理组(P<0.01)。0、10 U和25 USLO处理组的细胞存活率差异不显著(P>0.05),但显著高于50 U处理组(P<0.05)。25 U SLO处理组的贴壁率极显著高于50 U和100 U SLO处理组(P<0.01)。25 U SLO处理组MEFs具有正常分裂增殖生长模式。因此,为了既能达到SLO对MEFs细胞膜的渗透化效果,又尽可能减少对细胞的损伤,宜选用25 U SLO进行MEFs的渗透化处理。; 肖雄赵海龙邓玉金邱小燕王炜张翠平呼洁李跃民; 关键词：胎儿成纤维细胞小鼠

不同体细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响　　　: 2011年; 为研究小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、颗粒细胞及子宫内膜细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响,试验采用将小鼠体内受精2-细胞与这些体细胞共培养的方法。结果表明,第3代MEF共培养组的桑囊胚发育率、囊胚孵化率及囊胚细胞数显著高于第1或第6代MEF共培养组(P<0.05);颗粒细胞、子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的过2-细胞阻滞率和桑囊胚发育率均显著高于对照组(P<0.05);子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的囊胚孵化率和囊胚细胞数均显著高于颗粒细胞共培养组和对照组(P<0.05),但前两共培养组的上述指标差异不显著(P>0.05)。; 赵芳肖雄李跃民赵海龙邓玉金张建娜; 关键词：胎儿成纤维细胞颗粒细胞子宫内膜细胞共培养

小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞（ph ES cells）生殖潜能维持及其自噬相关机制的研究: 干细胞具有自我更新和特定条件下多向分化的特性,是研究生物发育和疾病的重要模型。大多数哺乳动物干细胞的染色体为二倍体结构,即细胞中有两套染色体,当一条染色体发生断裂或损坏,另一条染色体可以对其进行及时补偿。然而二倍体结构使...; 赵海龙; 关键词：SIRT1 自噬; 文献传递

维生素E和半胱氨酸对昆明系小白鼠体外受精胚胎发育的影响: 2011年; 为了研究不同浓度维生素E和半胱氨酸抗氧化剂对昆明系小白鼠体外受精胚胎发育的影响,试验将昆明系小白鼠的成熟卵母细胞经体外受精后,移入不同浓度抗氧化剂的常规CZB'体外受精培养液中。结果表明:添加100μmol/L维生素E试验组(2组)和添加0.05 mg/mL半胱氨酸试验组(1组)的2-细胞率、(4～8)-细胞率和桑囊胚胎发育率均明显高于其他浓度试验组和对照组。; 赵芳肖雄李跃民赵海龙邓玉金马腾; 关键词：维生素E 半胱氨酸体外受精

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赵海龙