赵春晖
- 作品数:5 被引量:12H指数:2
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- 二甲基亚砜对体外培养眼组织细胞的毒性作用被引量:3
- 2015年
- 背景 二甲基亚砜(DMSO)是常用的药物助溶剂,但DMSO体积分数较高时对细胞有毒性,可能影响对受试药物的正确评价,所以确定不同眼组织细胞对DMSO的敏感性十分重要. 目的 探讨DMSO对体外培养的多种眼组织细胞的最小毒性体积分数,为眼部药物的体外筛选提供依据. 方法 采集青紫蓝兔的视网膜色素上皮(RPE)细胞进行培养,并利用免疫组织化学法进行鉴定.分别对人视网膜色素上皮细胞株(ARPE19)、巩膜成纤维细胞(S75-Fron)、Müller细胞(MIO-M1)、人晶状体上皮细胞(HLEC)、人眼葡萄膜黑色素瘤细胞(OCM-1)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)进行体外培养.取160μl DMSO溶液和9.84 ml含体积分数2%胎牛血清(FBS)的RPM I1640或DMEM/F12或DMEM培养液配制体积分数分别为1.6%、1.0%、0.8%、0.4%、0.2%和0.1% DMSO的RPMI1640、DMEM/F12和DMEM培养液,在培养的各种细胞中分别加入不同体积分数的DMSO培养液作用96 h,采用MTS法检测各组细胞的吸光度(A)值. 结果 培养的兔原代RPE细胞对细胞角蛋白(CK)和HMB45呈黄绿色荧光,细胞质和细胞核内S100阳性反应呈红色荧光.随着DMSO体积分数的增加,各细胞活性(A值)逐渐降低,随着DMSO体积分数的增加,ARPE19、S75-Fron、HLEC、OCM-1、HUVEC和原代RPE细胞活性(A值)均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05),当DMSO体积分数≥0.8%时,RPE细胞活性均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),但MIO-M1细胞株活性的差异无统计学意义(F=0.830,P=0.547).DMSO对ARPE19、HUVEC、HELA、HLEC、MIO-M1、OCM-1、原代RPE细胞和S75-Fron细胞最低有毒体积分数分别为0.8%、0.1%、0.8%、>1.6%、>1.6%、0.2%、0.2%和0.2%,HUVEC对DMSO的毒性最敏感,在0.1% DMSO情况下即显示出毒性(P=0.02),而MIO-M1细胞在1.6% DMSO的情况下仍未显示出毒性作用(P=0.39).HUVEC和�
- 赵春晖兰碧菲侯江平程凌云
- 关键词:细胞毒性药物筛选
- 他克莫司在非感染性葡萄膜炎及实验性自身免疫性葡萄膜炎治疗中的应用及展望被引量:2
- 2012年
- 他克莫司为一种新型强效的免疫抑制剂,通过与内源性细胞内受体胞浆结合蛋白FKBP-12结合,阻断淋巴因子基因转录从而抑制T淋巴细胞活化。他克莫司口服给药对治疗非感染性葡萄膜炎效果显著,眼局部应用脂质体、控释药膜、植人体等制剂,局部给药治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎均有较好疗效。其中,FKS06缓释制剂经巩膜给药可能有良好的应用前景。这些制剂的临床应用及其效果,尚需更多的经验积累。
- 徐宇赵春晖程凌云
- 关键词:葡萄膜炎他克莫司结合蛋白质类药物作用
- 灰兔眼巩膜厚度测量被引量:2
- 2013年
- 目的测量灰兔不同部位巩膜厚度,了解巩膜部位与厚度变化关系,为经巩膜眼内给药实验研究提供诠释依据。方法实验研究。49只(98眼)成年青紫蓝灰兔经麻醉后,安乐液处死,立即摘去眼球.随后放人1-25%戊二醛和l%多聚甲醛固定液固定,制成石蜡切片后行常规苏木精一伊红(HE)染色。经生物显微镜观察拍照后用图像分析软件测量从角巩膜缘部到视神经部的巩膜厚度。对测量结果采用广义估计方程(GEE)及Tukev’sHSDPostHoeTest分析。结果下半部分兔眼巩膜比上半部分巩膜薄,分别是(342.9±91.3)μm和(400.4±67.6)μm(X2=43.57,P〈0.01,GEE)。上半部分巩膜厚度在赤道前后及后极部差异无统计学意义,平均为(366.8±56.3)μm。下半部分巩膜厚度在赤道前和赤道部为(340.9±72.5)μm和(340.8±76.3)μm,往后进一步变薄,赤道部后为(293.9±57.4)μm,后极部为(209.0±51.8)μm。上半部分和下半部分巩膜均在神经处最薄,分别为(273.5±90.5)μm和(187.7±60.1)μm,与其他部位相比,差异有统计学意义(P〈0.05,Tukey'sHSDPostHoeTest)。结论兔眼巩膜上半部分比下半部分厚,从部位和厚度关系分析,厚度在角巩膜缘与赤道部之间变化较大,在赤道部和后极部之间变化较小。
- 李杰兰碧菲赵春晖程凌云
- 眼部应用国产曲安奈德混悬液安全性的实验研究被引量:3
- 2014年
- 目的 评价国产曲安奈德及醋酸曲安奈德混悬液眼部应用的安全性.方法 实验研究.通过体外将曲安奈德和醋酸曲安奈德混悬液的上清液稀释成不同比例后,用MTT比色法评价其上清液中的防腐剂和赋形剂对3种人眼细胞株的细胞毒性;选取28只健康豚鼠,根据计算机(SAS软件)生成的随机数字均分为4组,分别在豚鼠右眼的玻璃体腔注射曲安奈德或醋酸曲安奈德的上清液18μl和混悬液6μl.给药前后通过裂隙灯、间接检眼镜、眼压计、眼电生理检查及组织学石蜡切片来评价其玻璃体腔应用的安全性.体外细胞毒性研究采用Dunnett-t检验,眼电生理数据采用配对t检验,眼压数据比较采用重复测量统计方法广义估计方程.结果 未经稀释的曲安奈德和醋酸曲安奈德上清液对人眼后巩膜成纤维细胞的MTT值分别为0.046±0.036和0.044±0.05,与其各自的标准品上清液对照组(0.367±0.106和0.413±0.128)和BSS空白对照组(0.368±0.106和0.441±0.137)相比,差异均有统计学意义(P值均<0.01).醋酸曲安奈德的上清液经1∶15或更高倍数的稀释后对人RPE细胞无细胞毒性(P>0.05),但1∶15稀释的上清液对人Müller细胞有细胞毒性(MTT值为0.366±0.062,BSS对照组和上清液对照组的MTT值分别为0.417±0.042和0.399±0.045)(P=0.03);曲安奈德的上清液经1∶15或更高倍数的稀释对RPE及Müller细胞均未显示细胞毒性.豚鼠玻璃体腔注射这两种制剂的混悬液6μl(含药物0.25 mg,相当于人眼玻璃体腔注射0.1 ml含4 mg曲安奈德的混悬液)或上清液18μl(相当于兔眼玻璃体腔注射0.1 ml含4 mg曲安奈德混悬液中含有的防腐剂浓度)均未见眼内毒性.结论 豚鼠玻璃体腔注射6μl曲安奈德和醋酸曲安奈德混悬液均是安全的,该剂量相当于人眼玻璃体腔注射0.1 ml(含4 mg)曲安奈德混悬液.
- 兰碧菲侯江平赵春晖孙树茂李杰程凌云
- 关键词:曲安奈德毒理学玻璃体内注射
- 增生性玻璃体视网膜病变药物治疗新进展被引量:2
- 2013年
- 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是一种常见的致盲性眼病,常发生于眼外伤、孔源性视网膜脱离和严重糖尿病性视网膜病变的患者。目前,玻璃体手术是治疗PVR的主要手段,但手术费用昂贵,术后视力恢复效果常不令人满意。研究表明,PVR发生时,玻璃体中的细胞生长因子和炎症因子、基质蛋白以及不同细胞之间相互影响与促进,导致增生膜的形成。对PVR发生机制的进一步认识,有助于选择合适药物,阻断参与细胞的反应进程,预防PVR的发生。本文主要对目前已知的PVR发病机制加以概述,着重对干扰PVR发生的最新药物、缓释系统治疗进行综述。
- 赵春晖王毓琴程凌云
- 关键词:药物疗法药物释放系统玻璃体内注射