赵志武
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 供职机构：山西医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：山西省基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用被引量：1
- 2014年
- PAT家族蛋白包括perilipin、adipophilin、TIP47、S3-12和OXPAT 5种蛋白。研究发现这些蛋白定位于脂滴表面,介导脂质代谢,并与肥胖症、糖尿病等脂代谢疾病相关。RNA干扰是一种基因沉默技术,现已广泛应用到生物医药领域,若能通过此技术制备相关生物制剂调节脂质代谢,将为缓解甚至治疗脂代谢疾病提供新思路。本文旨在对RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用作一综述。
- 赵志武师磊马敏燕炯
- 关键词：RNA干扰脂质代谢
- SDG对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用被引量：6
- 2015年
- 目的探讨开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG)对雌性去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法雌性3周龄SD大鼠分为7组:假手术组,去卵巢组、再灌注组、SDG干预组(10、20、50、100 mg/kg),生化方法检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,心肌组织中caspase-3比活性;用伊文氏蓝和2,3,5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积;光镜观察心肌细胞病理变化;用DNA原位末端标记法检测心肌细胞凋亡变化。结果与去卵巢组比较,再灌注组大鼠血清中HDL明显降低(P<0.05),TC、TG、LDL明显升高(P<0.05);心肌病理损伤加重、心肌梗死面积增大;血清SOD水平降低、MDA含量增加(P<0.05);心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05);与再灌注组比较,50 mg/kg SDG组大鼠血清中HDL[(3.285±0.327)mmol/L]升高、TC、TG、LDL[分别为(5.508±0.479)、(0.535±0.129)、(3.290±0.358)mmol/L]降低(P<0.05);心肌梗死面积缩小、心肌组织病理损伤减轻;血清SOD水平[(285.786±31.287)U/m L]升高,MDA含量[(2.483±0.391)nmol/m L]降低(P<0.05);心肌细胞凋亡指数(17.57±0.84)明显降低(P<0.05);呈剂量效应关系。结论 SDG对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与SDG提高心肌组织抗氧化能力和减少心肌细胞凋亡有关。
- 马敏张娜娜师磊赵志武李秀花路健封启龙燕炯
- 关键词：卵巢切除术缺血再灌注植物性雌激素
- MCHR1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
- 2015年
- 目的构建有效针对小鼠黑色素浓集激素受体1(melanin-concentrating hormone receptor 1,MCHR1)的shRNA(small hairpin RNA)真核表达载体。方法设计合成3条小鼠MCHR1基因的shRNA序列以及1条无同源性的shRNA序列作为阴性对照,与质粒重组构建sh-MCHR1干扰载体,并进行菌液PCR和DNA测序鉴定;脂质体法转染小鼠3T3-L1细胞后观察MCHR1 mRNA和蛋白表达的变化。结果经菌液PCR及DNA测序鉴定表明各shRNA载体构建成功;转染3T3-L1细胞后,与空载体组相比,阴性对照组MCHR1 mRNA和蛋白的表达均无明显差异,但实验组3种干扰载体均能显著抑制MCHR1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05),且3种载体的抑制程度有一定的差异,以sh-MCHR1-1载体沉默效果最佳。结论 sh-MCHR1干扰载体构建成功,为进一步探究MCHR1与肥胖症之间的关系奠定了实验基础。
- 赵志武师磊陈显久王君实马敏燕炯
- 关键词：RNA干扰3T3-L1前脂肪细胞
- PI3K-Akt-eNOS信号通路在SDG抑制去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤中的调控作用被引量：4
- 2016年
- 目的:通过研究开环异落叶松树酯酚二葡萄糖苷(SDG)对心肌缺血再灌注去卵巢大鼠心脏组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)的影响,探讨SDG对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法:100只SD雌性大鼠随机分为去卵巢组、缺血再灌注假手术组、缺血再灌注组、雌二醇干预组和SDG干预组。SDG干预组以50mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量灌胃,雌二醇干预组以0.8mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量灌胃,其余组均以等量蒸馏水灌胃。伊文氏蓝和2,3,5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积,ELISA双抗体夹心法检测雌激素水平变化,Western blot法测定PI3K、Akt、eNOS以及三者磷酸化蛋白以及雌激素受体α(ERα)蛋白的表达。结果:SDG干预60d后,雌二醇干预组和SDG干预组雌激素水平显著高于缺血再灌注组,而心肌梗死区面积百分比显著低于缺血再灌注组(P<0.05)。此外,雌二醇干预组和SDG干预组中p-PI3K、p-Akt、peNOS和ERα4种蛋白的表达均显著高于缺血再灌注组(P<0.05)。结论:SDG可能通过激活雌激素受体α,活化PI3K-Akt-eNOS信号通路,从而对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤发挥保护作用。
- 王君实马敏赵志武张少华燕炯
- 下调Perilipin 1基因表达对3T3-L1细胞脂解的影响被引量：9
- 2016年
- 目的:研究下调围脂滴蛋白基因(PLIN1)表达对3T3-L1细胞脂解的影响。方法:采用RNA干扰技术,构建3组阳性及1组阴性sh-PLIN1重组载体,并进行菌液PCR和DNA测序鉴定。Western blot测定PLIN1A蛋白表达,评价载体下调效果。细胞转染有效载体2天后,Bodipy 493/503染色脂滴;酶学方法测定细胞中甘油三酯和甘油含量;Western blot检测甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)及其磷酸化蛋白(p-HSL)的表达。酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞中环磷酸腺苷(c AMP)和蛋白激酶A(PKA)的浓度。结果:各sh-PLIN1干扰载体构建成功,且3组阳性载体均能显著下调PLIN1A蛋白的表达(P<0.05)。转染有效载体后,与阴性转染组相比,sh-PLIN1转染组细胞中脂滴减小,甘油三酯含量降低,甘油含量升高,ATGL和HSL相对表达量显著升高(P<0.05),p-HSL相对表达量及c AMP、PKA的浓度无显著性差异(P>0.05)。结论:下调PLIN1基因表达可加快3T3-L1细胞脂解速率,其可能通过上调ATGL和HSL的表达而实现,c AMP/PKA信号通路对其无明显调节作用。
- 赵志武王君实马敏张少华燕炯
- 关键词：细胞转染3T3-L1前脂肪细胞脂解
- SDG对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤炎性相关因子影响
- 2016年
- 目的探讨开环异落叶松树酯酚二葡萄糖苷(SDG)对雌性去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用及机制。方法选取无特定病原(SPF)级健康SD雌性10周龄大鼠50只,按体重随机分为2组:去卵巢组、对照组,去卵巢组又分为假手术组、缺血再灌注组、雌二醇组、SDG组。SDG组以50 mg/kg剂量灌胃,雌二醇组以0.8 mg/kg剂量灌胃,其余组均以等量蒸馏水灌胃。结果与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠体重[(348.21±7.45)g]增加,子宫指数[(0.69±0.36)mg/g]降低,大鼠血清中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平[分别为(149.52±17.12)、(174.74±15.72)、(79.53±7.07)ng/L]升高,血清一氧化氮(NO)水平、心肌组织中结构型一氧化氮合酶(c NOS)活力[分别为(15.67±0.68)μmol/L、(0.255±0.069 0)U/mgprot]降低;与缺血再灌注组比较,SDG组大鼠体重[(275.42±3.40)g]下降,子宫指数[(1.53±0.31)mg/g]升高,大鼠血清中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6[分别为(86.10±2.91)、(127.66±8.86)、(46.63±4.13)ng/L]明显降低,大鼠血清NO水平、心肌组织中c NOS活力[分别为(46.49±1.32)μmol/L、(0.496±0.052)U/mgprot]升高。结论SDG干预对缺血再灌注损伤大鼠具有一定保护作用,其机制可能与降低血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,提高血清中NO含量、增加心肌组织中c NOS活力有关。
- 王君实马敏赵志武张少华燕炯
- 关键词：心肌缺血再灌注卵巢切除术
