赵善飞
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 抑癌基因RB1在小鼠不同发育阶段卵母细胞中的表达及甲基化状态的研究
- 2013年
- 目的研究抑癌基因RB1在小鼠不同阶段卵母细胞中的mRNA表达及DNA甲基化的状态,旨在探讨RB1基因在卵母细胞生长发育中的作用,为胚胎植入前肿瘤的诊断提供理论基础。方法采用改良的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测RB1在不同发育阶段卵母细胞[GV期(生殖泡期)、MⅠ期(第一次减数分裂中期)、MⅡ期(第二次减数分裂中期)]中的mRNA表达,即细胞裂解后直接逆转录+全转录扩增cDNA+荧光定量PCR扩增方法检测不同发育阶段卵母细胞的相对表达量。同时还进行DNA甲基化的研究:细胞裂解后直接进行亚硫酸盐处理,再进行半巢式PCR扩增出目的片段,把目的片段进行T载体(TA)克隆测序RB1在不同阶段卵母细胞中的甲基化状态。结果 RB1在小鼠GV期、MⅠ期、MⅡ期卵母细胞的表达量分别是:(0.054±0.004)、(0.080±0.005)、(0.101±0.005),RB1在MⅡ期中的表达量约是GV期的2倍,差别具有统计学意义(P<0.05)。RB1甲基化:MⅠ期和MⅡ期卵母细胞的24个CpG位点C完全变成T,所有CpG位点完全非甲基化。GV期偶见1～2个CpG位点甲基化,所有CpG位点基本完全非甲基化。结论 RB1 mRNA随着卵母细胞的生长发育表达量不断增加,RB1 DNA在卵母细胞(GV～MⅡ)中尚未发生甲基化。
- 黄品秀李蓉林洪波赵善飞刘波澜
- 关键词：胚胎植入卵母细胞RB1甲基化
- 小鼠单个不同阶段卵母细胞新抑癌印迹基因RB1的表达被引量：1
- 2012年
- 目的研究新抑癌印迹基因RB1在小鼠单个不同阶段卵母细胞中的表达。方法采用改良单细胞RT-PCR方法检测RB1在单个不同阶段卵母细胞中的mRNA表达。结果 RB1在小鼠单个卵母细胞GⅤ、MⅠ、MⅡ均有检测到正常表达,不同卵母细胞的RB1表达量不同,其中8个MⅡ期卵母细胞,3个卵母细胞明显表达,1个表达较弱,其余4个无明显表达。结论 RB1在小鼠不同阶段卵细胞中均有表达,但是不同细胞RB1存在明显表达的差异。新印迹基因RB1的研究有助于研究卵母细胞成熟及胚胎生长发育,尤其使用单细胞进行研究,更有利于对表观遗传学深入研究探讨。
- 黄品秀李蓉王俊豪林洪波赵善飞郭梁洁
- 关键词：胚胎植入遗传学卵母细胞
- 抗氧化剂半胱氨酸对小鼠卵母细胞体外成熟及发育潜能的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究抗氧化剂半胱氨酸对小鼠卵母细胞体外成熟及发育潜能的影响,为进一步优化卵母细胞体外成熟培养体系提供理论依据。方法对照组采用基础体外培养液,共培养101枚GV期小鼠卵母细胞;实验组采用基础体外培养液+0.6 mmol/L半胱氨酸,共培养115枚GV期小鼠卵母细胞。观察两组卵母细胞的成熟率、谷胱甘肽的含量和线粒体内膜电位。结果对照组和实验组卵母细胞的成熟率分别为68.3%和80.0%,差别具有统计学意义(P<0.05);对照组和实验组卵母细胞平均谷胱甘肽含量分别为0.48±0.6μg/L和0.51±0.5μg/L,实验组谷胱甘肽含量略高,但两者无统计学差异(P>0.05)。线粒体内膜电位,对照组与实验组分别为0.04±0.003△Ψm与0.39±0.020△Ψm,实验组线粒体内膜电位明显高于对照组(P<0.05)。结论抗氧化剂半胱氨酸对体外培养小鼠卵母细胞成熟有一定的促进作用,并可能会提高卵母细胞的发育潜能。
- 黄品秀李蓉林洪波刘波澜赵善飞
- 关键词：半胱氨酸小鼠卵母细胞体外培养谷胱甘肽
