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PCR-SSCP分析参数的研究被引量：19: 2005年; 目的:聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是一种快速、简便、较灵敏的检测基因变异的方法,但其影响因素很多,本文对凝胶浓度、上样量、PCR产物稀释倍数、甘油浓度、电压、电泳温度几个重要的因素进行探讨。方法:通过应用PCR-SSCP方法结合核苷酸序列分析检测成都汉族群体98个个体人类补体第8成分(C8A)基因型频率分布。结果:凝胶浓度为8%,PCR产物稀释4倍,上样量为4μl,不加甘油,电压为200V,恒温电泳时,SSCP分析可得到满意的结果。结论:PCR-SSCP分析对不同的研究对象,其分析参数不同,需要对其分析条件进行最大优化,才能获得实验的成功。; 杨志惠周斌贾静王闯张林; 关键词：PCR-SSCP

EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备被引量：6: 2005年; 目的表达和纯化EB病毒的重组融合蛋白谷胱氨肽S转移酶(GST)-Rta185和GST-Rta150,并制备特异性多克隆抗体。方法质粒表达载体pGEX-R185I、pGEX-R150I和pGEX-5X-3分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化目的蛋白。将纯化后的GST-R185、GST-R150和GST蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清。结果在细菌裂解液中检测到高表达量的融合蛋白,经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-Rta融合蛋白。应用Westernblot和ELISA方法检测证实,用纯化的GST-Rta蛋白免疫家兔得到了特异性的多克隆抗体。结论通过上述方法制备出来的融合蛋白纯度较高,免疫家兔获得的多克隆抗体具有良好的特异性,为研究EB病毒Rta蛋白及与EB病毒相关疾病的诊断和治疗提供了重要的条件。; 徐永春梁伟波苟航陈文婕朱银华贾静张林; 关键词：融合蛋白多克隆抗体 EB病毒

小鼠IL-18真核表达质粒的构建及其生物学活性的鉴定被引量：1: 2005年; 目的构建小鼠白细胞介素18(interleukin18,IL-18)的真核表达质粒,并检测其表达的IL-18的生物学活性。方法采用RT-PCR获得小鼠IL-18基因,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及连接反应,构建pEGFP-mIL-18真核表达载体,重组载体经过限制性内切酶、PCR及DNA序列测定等证实连接片段的正确性后,转染HEK293细胞系,荧光显微镜观察GFP-mIL-18融合蛋白的表达,收集转染后72h的上清液,MTT法检测上清液中IL-18表达产物的生物学活性。结果酶切分析、PCR鉴定、DNA测序表明成功地构建了pEGFP-mIL-18真核表达载体,MTT法证明表达产物有刺激小鼠脾细胞增殖的功能。结论所获pEGFP-mIL-18真核表达载体能在体外表达具有生物学活性的IL-18,为进一步研究IL-18的功能和运用奠定了基础。; 贾静李虹李明远吕梅励杨志惠陈文捷贾怡蒋中华张林; 关键词：白细胞介素18 融合蛋白真核表达

成都东部新区土地征收新政实施中的问题及对策研究: 近年随着中国经济发展，为保障基础设施、公共服务设施、产业项目及城市居民用地需求，科学合理推进城镇化发展，我国大量的农村集体土地被征收变更为城镇建设用地。但因为中国土地独有的城乡二元结构原因，集体土地被限制不能改变其用途，...; 贾静; 关键词：土地征收征收程序社会保障

PCR-SSCP法检测人类补体第八成分C8ADNA多态性研究: 2006年; 目的建立一种检测人类补体C8ADNA多态性的新方法。方法C8A多态性的分子基础是C8A基因在第三外显子碱基发生了C→A的突变,通过特异性扩增C8A基因第三外显子,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法结合DNA序列分析检测成都地区98份无血缘关系样本DNAC8A基因型。结果共发现3种基因型,C8A*AA、C8A*BB和C8A*AB,观测到的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。结论PCR-SSCP检测C8A多态性快速、简便、可靠、成本低,适用于大样本的筛选,在群体遗传学及法医学实践中有较好的应用价值。; 杨志惠张林周斌王闯贾静; 关键词：多态性

EB病毒GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的制备和鉴定: 2006年; 目的制备EB病毒GST-Rta150融合蛋白的单克隆抗体并鉴定其特性。方法取经GST-Rta150融合蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行阳性杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆,接种杂交瘤细胞至小鼠腹腔,收集腹水并纯化。制备的单克隆抗体以琼脂双向扩散法鉴定抗体类及亚类。间接ELISA法测定抗体的效价,Western-blot检测抗体的特异性。结果获得一株稳定分泌抗GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A9,细胞培养上清效价为10-3,腹水效价为10-5,纯化的抗体效价为10-6。经鉴定GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的亚类为IgG1。Western-blot结果显示此单克隆抗体能特异结合GST-Rta150融合蛋白。将杂交瘤细胞株在液氮中冻存3个月后复苏,其分泌的单克隆抗体效价不变。结论通过上述方法制备出来的单克隆抗体特异性强,稳定性好,为研究EB病毒立即早期基因产物Rta蛋白以及EB病毒相关疾病的诊断和治疗奠定了基础。; 朱银华梁伟波吕梅励徐永春贾静张林; 关键词：单克隆抗体杂交瘤 EBV EB病毒

EAE小鼠模型的构建及其免疫学机制的探讨被引量：10: 2008年; 目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型并初步探讨EAE发病的免疫学机制。方法用MOG35-55抗原免疫C57BL/6小鼠,观察实验动物的症状及中枢神经系统的病理改变;应用MTT法测定EAE小鼠脾脏T淋巴细胞活化增殖程度;应用ELISA技术测定EAE小鼠血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体水平。结果EAE组发病率为100%,HE染色观察到脑脊髓炎性细胞浸润,白质脱髓鞘等病理改变;EAE小鼠脾脏MOG35-55反应性T淋巴细胞增殖活化,血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体随病情的加重而升高。结论用MOG35-55多肽成功诱导了C57BL/6小鼠EAE模型;并推断EAE的发生可能与MOG35-55反应性T淋巴细胞的活化、抗MOG35-55抗体和IFN-γ升高有关。; 泰淑红李虹贾静吕梅励张林; 关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白实验性自身免疫性脑脊髓炎干扰素-Γ

一种麻醉科临床药物浓度调节器及其实现方法: 本发明公开了一种麻醉科临床药物浓度调节器及其实现方法，属于麻醉科临床药物技术领域，包括底板，所述底板的上方设置有连接板，所述连接板上且与底板相对应的位置安装有多个连接管，所述连接管的靠中央位置安装有第一阀门，所述连接板的...; 姜鲜章卓贾静李涛

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贾静