贾艳华
- 作品数：6 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 苏云金芽孢杆菌生产菌株溶原性噬菌体pep基因的克隆、表达及功能分析被引量：1
- 2008年
- 溶原性噬菌体的随机爆发是微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)发酵生产的首要危害。【目的】本文的目的就是通过研究B.t生产菌株溶原性噬菌体的遗传背景,以便从分子水平上控制其在生产中的随机爆发。【方法】通过对广东梅州某公司的生产菌株MZ1采用Mitomycin C进行诱导,提取噬菌体颗粒MZTP01的基因组DNA,克隆和表达该噬菌体的pep基因,并进行了功能分析。【结果】诱导获得的溶原性噬菌体MZTP01斑点清晰,直径约1mm,成斑时间12h;从噬菌体基因组DNA双酶切(HindⅢ/EcoRⅠ)片段中回收长度为2362bp的D片段(Genbank登录号:AY639599),又从D片段中克隆了长度为1101bp、编码367aa、分子量为47kDa的pep基因,表达载体M15(pQE30pep)在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中表达获得了47kDa的清晰表达带,在1h时开始产生蛋白并有逐步上升的趋势;Western blot也在47kDa处得到一条清晰的条带;可溶性分析表明PEP蛋白在重组菌株中是以不可溶的包含体形式存在的,该蛋白的产生明显地抑制了宿主的生长速度;噬菌体PEP氨基酸序列之间的同源性比较表明,噬菌体MZTP01PEP蛋白与来自E.coliK12噬菌体的PEP蛋白的同源性程度最大。【结论】我们获得了一种新的噬菌体MZTP01,并首次报道了该噬菌体D片段的核苷酸序列及pep基因的功能,试验证明PEP表达蛋白能够水解酪蛋白,其活力相当于0.3mg/mL的胰蛋白酶。
- 廖威陈维春贾艳华庞义
- 关键词：苏云金芽孢杆菌克隆功能分析
- 苏云金芽孢杆菌噬菌体MZTP02 orf3和orf4的研究
- 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)制剂是一种广泛应用的微生物杀虫剂，但溶源性噬菌体(lysogenic phage)的爆发常常给Bt的工业生产带来巨大的损失。深入研究溶源性噬菌体的特性及...
- 贾艳华
- 关键词：苏云金芽孢杆菌噬菌体转录分析基因敲除芽孢杆菌
- 文献传递
- 末端酶及其在噬菌体包装中的作用被引量：5
- 2013年
- 噬菌体的末端酶是一类寡聚体多功能蛋白,由大小亚基组成,在噬菌体DNA包装过程中有重要作用。大亚基是多功能酶,在包装中起主要作用;小亚基与基因组特异性结合,引导包装进程的进行。综述末端酶定位、结构和功能以及在噬菌体包装过程中的作用。
- 宋少云贾艳华祝心舟庞义
- 关键词：噬菌体
- rfp基因两种遗传转化方法导入荧光假单胞菌的比较分析（英文）
- ＜正＞Eukaryotic fluorescent proteins are being used increasingly as bacterial markers in microbial e-cology, par...
- 贾艳华宋福平李国勋黄大昉张杰
- 文献传递
- 荧光蛋白及其应用
- 基因标记技术是近年来发展起来的分子生物学技术。荧光蛋白基因在标记基因方面由于具有独特的优点而引起了科学家的广泛关注,现已被普遍应用到分子生物学研究的各个方面。荧光蛋白是海洋生物体内的一类发光蛋白。1962年由Shimom...
- 贾艳华李国勋张杰
- 文献传递
- 获得四环素抗性的温敏同源重组载体质粒pRNT15的构建被引量：1
- 2008年
- 苏云金芽孢杆菌工程菌株TnX对蚊幼虫具有高毒力,但红霉素抗性基因的存在限制了其商品化。根据转座子Tn917载体的基因序列,利用重叠延伸PCR法克隆同源重组序列到pRN5101上得到pRN15,根据pBU4载体上的四环素抗性基因序列,对pRN15进行改造,使其失去红霉素抗性,获得四环素抗性,载体命名为pRNT15。重组载体四环素抗性的获得,使之扩大了使用范围,也为工程菌株染色体中红霉素抗性基因的敲除奠定了基础。
- 贾艳华孙钒庞义
- 关键词：苏云金芽孢杆菌重叠延伸PCR抗性基因基因敲除
