贾志刚
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院更多>>
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- P物质诱导高糖条件下成纤维细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的分子机制
- 目的 研究P物质(substance P,SP)诱导人皮肤成纤维细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的作用和分子机制.方法 高糖DMEM培养基培...
- 贾志刚方勇姚敏俞为荣徐鹏贾一韬倪涛
- P物质对高糖条件下成纤维细胞增殖及其单核细胞趋化蛋白-1合成的调节作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨外源性P物质（substance P，SP）对高糖条件下人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblast, HSF）增殖及其单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein - 1,MCP-1）合成的影响。方法用高糖DMEM培养基培养HSF；并用SP在不同浓度和不同时相点处理，ELISA法检测细胞上清液中MCP-1分泌水平，观察时间与剂量的时效关系；半定量RT—PCR、实时荧光定量（RealTime）-PCR、Westernblot分别检测各组HSF内MCP-1mRNA的表达和蛋白的合成；细胞增殖试剂盒（cell counting Kit-8，CCK-8）检测不同浓度SP作用HSF后的增殖情况。结果经SP处理后8h可检测到MCP-1分泌增强（P〈0．05），24h达峰值（P〈0．01），在10，100nmol／L的浓度下分泌最多（P〈0．01）；SP可明显增加高糖条件下HSF MCP-1 mRNA的表达和蛋白的合成，特别是在10nmol／L的浓度下表达最为显著（P〈0．01）；在10，1000nmol／L的SP均明显促进HSF的增殖（P〈0．05）。结论SP可促进高糖条件下HSF的增殖及MCP-1的合成，对促进糖尿病创面修复可能有一定意义。
- 贾志刚方勇姚敏倪涛李晓光石有振
- 关键词：P物质成纤维细胞单核细胞化学吸引蛋白质类伤口愈合
- 一种连续动态直接观察皮肤创口感染的小鼠模型
- 2012年
- 目的拟建立一种稳定、可连续动态直接观察皮肤创口感染的动物模型。方法制作小鼠背部全层皮肤切割伤模型，即刻予以皮下缝合后按随机数字表法分为四组：A组小鼠接种50μl无菌PBS液（PBS对照组），B、C、D组（感染组）小鼠分别接种50斗l含1×10^6、1×10^8和1×10^10菌落形成单位（colonyformingunit，CFU）／ml可发光耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicil—lin—resistantstaphylococcusaureus，MRSA）菌株悬液。观察接种后每组小鼠的饮食活动，并记录12，3，5，7，9，11，14d的平均体重及其死亡率；接种后各时相点采用以电荷耦合器件（charge—COU—pieddevice，CCD）为基础的成像系统记录小鼠创口的荧光素发光强度；接种后24h切取创口局部组织HE染色，观察各组小鼠创口炎症反应情况；记录每组小鼠创口愈合时间。结果（1）平均体重：A、B组小鼠无明显波动；C组逐渐减轻，第3天后逐渐增加，第14天增至接种前水平；D组逐渐减轻直至死亡。（2）死亡率：A、B组为零，C组第14天小鼠死亡率为10％，D组小鼠至接种后第3天死亡率为100％。（3）创口荧光素发光强度：A、B组自接种当天起均逐渐减弱，分别至第5，7天接近完全消失；C组自接种当天起至第14天无明显增强和减弱迹象；D组自接种当天起逐渐增强，且范围逐渐扩大直至死亡。（4）接种后24hHE染色：四组小鼠创口均有炎症细胞浸润，C、D组浸润更明显。（5）创口愈合时间：A、B组分别于接种后第5，7天愈合；C组至第14天仍未愈合，且切口长度及范围未见明显扩大与减小；D组创口范围自接种当天起逐渐扩大直至死亡。结论小鼠皮肤全层切割伤创口接种50μl含1×10^8CFU／ml可发光MRSA菌株悬液，可直接实时动态连续观测创口感染的发生与发展，该感染模型易于制作，稳定和重复性高。
- 石有振王莹顾钏贾志刚傅秀军方勇俞为荣姚敏
- 关键词：耐甲氧西林金葡菌
- 神经肽P物质诱导高糖条件下人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的分子机制被引量：6
- 2012年
- 目的探讨神经肽P物质(SP)诱导高糖培养环境中的人皮肤成纤维细胞分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分子机制。方法采用高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞,加入同一浓度(10 nmol/L)SP孵育不同时间,Western blotting检测细胞中核因子κB(NF-κB)抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化NF-κB亚单位p65(p-NF-κBp65)的表达,免疫荧光方法观测细胞p-NF-κBp65表达和转位情况。将高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞分为对照组、SP组和SP+NF-κB抑制剂(MG132)组(以MG132预处理细胞60 min),Western blotting检测各组细胞内p-NF-κBp65的表达,ELISA方法测定细胞培养上清液中MCP-1的浓度。结果随着SP作用时间的延长,成纤维细胞IκBα的表达量显著减少,p-IκBα的表达量显著增加(P<0.05);同时p-NF-κBp65的表达量在SP作用后显著增加(P<0.05),并保持递增趋势;免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察证实SP作用后细胞胞核内p-NF-κBp65表达增强。与SP组比较,SP+MG132组细胞p-NF-κBp65表达及细胞培养上清液中MCP-1浓度均显著降低(P<0.05)。结论 SP促进人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的作用机制可能与NF-κB信号通路激活有关。
- 贾志刚方勇姚敏俞为荣徐鹏贾一韬倪涛
- 关键词：人皮肤成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1
- 抗氧化剂与创伤修复的关系被引量：4
- 2011年
- 创伤修复是一个复杂过程,氧化应激是其重要影响因素之一,当自由基产生过多或清除能力下降时,导致氧化应激,造成创面愈合困难或延迟。根据抗氧化剂作用环节的不同,可以分为:抑制超氧阴离子的产生、促进超氧阴离子向过氧化氢转化、促进过氧化氢代谢、清除已生成的自由基四种类型的抗氧化剂。这些抗氧化剂都有减轻氧化应激,促进创伤修复的作用。
- 贾志刚方勇姚敏
- 关键词：创伤修复氧化应激反应活性氧活性氮抗氧化剂
