谢体三
- 作品数：29 被引量：81H指数：5
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 猪睾丸间质细胞的分离及培养被引量：6
- 2008年
- 为丰富体细胞核移植的供体细胞种类，本研究对猪睾丸间质细胞的分离和培养方法进行了系统研究。运用酶消化法和钢网过滤筛选法获得的猪睾丸细胞,呈现圆形、细胞体积较大，培养4～6h后开始贴壁；培养48h后，贴壁增殖；培养3～5d后可形成单层细胞。这一研究结果为研究和建立睾丸间质细胞体外培养体系提供技术方法和试验依据。
- 黄雅琼杨素芳农微谢体三谭世俭石德顺
- 关键词：睾丸间质细胞
- 不同方法提取猪和牛卵母细胞和早期胚胎total RNA的比较被引量：1
- 2010年
- 研究以猪和牛GV期的卵母细胞和8细胞期胚胎作为研究对象,分别用QIAGENRNeasy Micro Kit、无根RNAPrep Micro kit和华舜快速RNA(微量)提取试剂盒提取其中的totalRNA,通过对total RNA的浓度和纯度的分析比较,找出较适宜的提取方法。结果显示,QIA-GEN RNeasy Micro Kit能更有效地从少量猪和牛卵母细胞和早期胚胎中提取高质量的totalRNA。
- 易康乐陈华海谢体三李纯锦李志才燕海峰石德顺周虚
- 关键词：卵母细胞早期胚胎总RNA
- 水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 2010年
- 为验证精子蛋白对卵母细胞的激活效果,为提高核移植胚胎的质量提供可行方法,通过比较不同裂解方法提取的水牛精子蛋白,不同浓度提取液显微注入猪卵母细胞,对水牛精子提取物的孤雌激活效果进行研究。结果表明:采用液氮反复冻融法和超声波破碎法预处理后提取的水牛精子提取物对猪体外成熟卵母细胞都有显著的孤雌激活效果。水牛精子蛋白浓度在0.53～5.52 mg/mL,注射剂量为2～4 pL时均可有效激活猪卵母细胞,综合效果以1.77 mg/mL较佳。
- 谭世俭谢忠君石德顺谢体三黄章虎
- 关键词：卵母细胞显微注射孤雌激活水牛
- 水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达被引量：5
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1 mmol/L IPTG中,37℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达。将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku。
- 谢体三农微张新民黄雅琼崔奎青石德顺
- 关键词：水牛原核表达
- 猪精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 2009年
- 3个试验分别就猪精子提取物提取方法、精子蛋白质量浓度以及显微注射剂量对猪卵母细胞的孤雌激活效果进行了研究.结果表明,采用液氮反复冻融法和超声波破碎法提取的猪精子提取物对猪卵母细胞都有显著的孤雌激活效果;采用猪精子提取物显微注射孤雌激活猪卵母细胞的适宜注射剂量为2-4 pL;猪精子蛋白质量浓度在1.35 mg/mL以上,注射剂量为2-4 pL时均可有效激活猪卵母细胞.
- 谭世俭谢忠君石德顺谢体三李辉邓彦飞刘继龙
- 关键词：卵母细胞显微注射孤雌激活
- 水牛ghrelin基因原核表达载体构建与蛋白表达
- 2016年
- 为了研究水牛ghrelin基因的结构与功能,本试验对水牛ghrelin基因进行原核表达载体构建与融合蛋白表达条件的优化。采用RT-PCR方法从水牛胃组织的总RNA中扩增出ghrelin编码区,连接到pRSET-a载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆子,用IPTG进行诱导表达条件的优化。结果表明,成功构建原核表达载体pRSET-a-ghrelin,在2 mmol/L IPTG,37℃的条件下诱导表达4 h,水牛ghrelin重组蛋白可成功获得表达,经SDS-PAGE鉴定发现,ghrelin融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为20 ku,其表达量占总菌体蛋白量的35%。本试验结果为进一步研究水牛ghrelin基因的结构和功能提供有价值的生物学信息。
- 农微谢婉朱思燃秦津崔月明李爱友谢体三
- 关键词：GHRELIN水牛原核表达
- 一氧化氮合酶在猪早期胚胎发育中表达的初步研究
- 本研究首次运用分子生物学手段探究了一氧化氮(NO)在猪早期胚胎发育过程中的表达情况以及相关的规律。应用RT-PCR的方法将猪各期胚胎的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)进行PCR扩增，然后对产...
- 刘继龙谢体三王慧英谭世俭
- 关键词：胚胎发育分子生物学一氧化氮合酶生理调节
- 文献传递
- 一氧化氮合酶在猪早期胚胎发育中表达的初步研究被引量：1
- 2009年
- 本研究运用分子生物学手段探究了一氧化氮（NO）在猪早期胚胎发育过程中的表达情况及其相关的规律。应用RT-PCR方法将猪各发育阶段的早期胚胎的内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）进行检测,然后对产物进行半定量分析。结果表明,iNOS在猪早期胚胎发育的整个过程中都有表达,其相对表达量随着胚胎发育进程呈现上升的趋势,在桑葚/囊胚阶段达到最高;eNOS仅仅是在2-细胞期和4-细胞期有表达,其相对表达量在2~4-细胞期间的差异不明显;在猪2~4-细胞胚胎发育过程中,iNOS的相对表达量高于eNOS的相对表达量。结果表明,在猪早期胚胎发育中NO的产量主要由iNOS调节。
- 刘继龙谢体三王慧英谭世俭
- 关键词：一氧化氮MRNART-PCR胚胎发育
- 星虫动物门系统发生研究进展被引量：5
- 2007年
- 根据已经发表的研究资料,总结星虫的一般生物学特点,回顾星虫动物门形成的过程及星虫动物门系统进化研究的历史和现状。星虫以其独有的特点被提升到门的位置,已经广泛为人们所接受,但是对于星虫的分类和系统进化上的亲缘关系一直没有形成一致的意见。在星虫的分类学上,大多数学者认同Cutler和Gibbs的分类系统,即将星虫分成2个纲、4个目、6个科和17个属,但是星虫在系统进化上的亲缘关系的研究结果不一致。原因可能在于分析方法上的不同,建议进行各种数据的联合分析,并以较为合理的方式解决分析中的和谐性问题,统一地确定出星虫的亲缘关系。
- 兰国宝杨素芳谢体三石德顺
- 关键词：星虫动物门进化亲缘关系
- 影响水牛胎儿成纤维细胞转染效率的因素被引量：4
- 2008年
- 实验对电穿孔法和阳离子脂质体法转染水牛胎儿成纤维细胞的条件进行了系统摸索,获得了较好的DNA转染参数。电穿孔法转染时脉冲时间为15ms,电场强度为40～50V/m时,细胞的死亡率处于20%～50%之间,比较适合外源DNA转入水牛胎儿成纤维细胞。将脂质体与DNA的比例控制在8μL:2μg,可获得较高的转染率。相同培养条件下,脂质体法比电穿孔能获得更多的转基因抗性细胞集落,转染DNA的纯度和细胞的状态也明显影响脂质体法的转染效率。
- 崔奎青刘庆友汤刚彬谢体三石德顺
- 关键词：转基因细胞转染电穿孔法脂质体法
