谈娟
- 作品数：11 被引量：25H指数：4
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家蚕血细胞特异标记BmintegrinaPS3的鉴定及BmUsh基因的造血分化调控研究
- 家蚕为鳞翅目的模式昆虫,其整个体腔都处在循环血淋巴中。根据形态的不同,家蚕血细胞分为五种类型：原血细胞,颗粒细胞,浆细胞,拟绛色细胞和小球细胞,但各种血细胞在体内的增殖分化及发育形成过程仍不清楚。 本研究利用细胞增殖分子...
- 谈娟
- 关键词：家蚕造血作用细胞增殖
- 家蚕Bmcyclin A基因的克隆和表达谱分析
- 周期蛋白A（CyclinA）能分别与两种重要的周期蛋白依赖性激酶cdk2、cdk1作用,推动细胞周期的正常进行。本研究基于家蚕基因组数据克隆了cyclinA基因在家蚕中的同源物BmcyclinA（NCBI登录号:FJ61...
- 张春冬潘敏慧谈娟冯业勋鲁成
- 关键词：家蚕CYCLINA系统进化基因表达
- 文献传递
- nanos基因的研究进展被引量：1
- 2009年
- nanos基因在时空上的表达调控对于个体发育起着重要作用。母源nanos mRNA在卵子中的定位及翻译调控受到严格的控制。果蝇Nanos通过抑制后极hunchback mRNA的翻译建立胚胎后极信号中心,从而建立前后体轴;同时它对果蝇原始生殖细胞的决定及迁移有重要作用;Nanos对于胚后发育中生殖细胞的维持也是必须的。现对nanos基因的mRNA的定位、翻译调控及Nanos结构和功能的研究进展进行了综述。
- 张春冬潘敏慧李娜孙志亚谈娟鲁成
- 关键词：NANOS原始生殖细胞早期胚胎发育
- 家蚕周期蛋白A基因(BmcyclinA)的克隆和表达谱分析被引量：8
- 2009年
- 周期蛋白A(cyclinA)能分别与2种重要的周期蛋白依赖性激酶cdk1和cdk2作用,推动细胞周期的正常进行。利用家蚕基因组数据和分子生物学方法克隆了cyclinA基因在家蚕中的同源物BmcyclinA(GenBank登录号:FJ619105),发现了BmcyclinA基因的另一种错误剪接形式BmcyclinA-1。BmcyclinA基因位于家蚕第13号染色体,由7个外显子和6个内含子组成,其完整开放阅读框为1 533 bp,编码511个氨基酸,在248th-450th氨基酸区域存在2个保守的周期蛋白框。BmcyclinA-1仅能编码正常cyclinA蛋白N端的153个氨基酸残基。RT-PCR分析显示BmcyclinA基因在家蚕整个胚胎发育时期及5龄第3天各组织中均有表达,并且在幼虫精巢中的表达相对较高。
- 张春冬谈娟赵丹红刘迪冯业勋潘敏慧鲁成
- 关键词：家蚕周期蛋白A染色体定位
- 家蚕glial cell missing(BmGcm)基因鉴定、表达、亚细胞定位和功能
- 2018年
- 【目的】鉴定、克隆家蚕(Bombyx mori)glial cell missing(Bm Gcm)基因,分析其m RNA表达及亚细胞定位特征。制备多克隆抗体,同时在细胞水平进行过表达,检测Gcm对细胞增殖和周期的影响,为探究Bm Gcm功能打下基础。【方法】利用RACE方法克隆获得Bm Gcm全长c DNA序列,利用ORF Finder和SMART等在线工具对Bm Gcm基本序列特征和结构信息进行分析,运用Clustalx和MEGA 6.0等软件对多物种Gcm蛋白进行同源序列比对和进化分析。采用RT-PCR和q RT-PCR方法检测Bm Gcm的表达情况。利用原核表达系统获得重组蛋白,通过蛋白纯化和免疫小鼠制备多克隆抗体,运用Western blot对抗体进行检测。构建Bm Gcm表达载体,转染家蚕胚胎细胞系,分析其亚细胞定位情况,同时利用EDU细胞增殖标记和流式细胞仪对其功能进行探索。【结果】Bm Gcm(BGIBMGA006182)定位于4号染色体的nscaf2847上,其基因全长4 046 bp,包含4个外显子和3个内含子。其c DNA全长1 734 bp,包含166 bp的5′UTR、227 bp的3′UTR和1 341 bp的完整开放阅读框(ORF)。该基因编码446个氨基酸残基,预测蛋白分子量为50.61 k D,等电点5.557,含有典型的GCM结构域。多重比对结果显示GCM结构域在不同物种间具有高度的保守性,进化分析显示昆虫Gcm蛋白单独聚为一支,其中Bm Gcm蛋白与帝王蝶同源蛋白亲缘关系最为接近。表达分析结果显示Bm Gcm在胚胎发育第4天表达达到峰值,随后表达水平逐渐下调,而在幼虫阶段,Bm Gcm主要表达于中肠、精巢和卵巢。将Bm Gcm完整的开放阅读框序列构建至原核表达系统,经IPTG诱导和亲和层析纯化获得高纯度重组蛋白,通过免疫小鼠获得了多克隆抗体,Western blot检测该抗体可以特异性识别重组蛋白。在家蚕细胞系中过表达Bm Gcm蛋白,结果显示其定位于细胞核。在细胞水平,过表达Bm Gcm会明显抑制细胞增殖,将细胞周期阻滞于G1/S期。【结论】克隆鉴定得到Bmgcm�
- 张奎潘光照苏晶晶谈娟徐曼李钰添崔红娟
- 关键词：抗体制备
- 家蚕血细胞特异标记BmintegrinαPS3的鉴定及BmUsh基因的造血分化调控研究
- 家蚕为鳞翅目的模式昆虫，其整个体腔都处在循环血淋巴中。根据形态的不同，家蚕血细胞分为五种类型:原血细胞，颗粒细胞，浆细胞，拟绛色细胞和小球细胞，但各种血细胞在体内的增殖分化及发育形成过程仍不清楚。
本研究利用细胞增...
- 谈娟
- 关键词：家蚕血细胞
- 文献传递
- 昆虫干细胞研究进展被引量：4
- 2010年
- 干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,按照其来源可分为胚胎干细胞和成年干细胞。昆虫中也同样存在多种干细胞。开展昆虫干细胞自我更新、发育命运决定、分化潜能等特性以及其与周围微环境相互关系的研究,对农林害虫的生物防治、经济昆虫的遗传育种以及一些生物反应器材料的利用,甚至对于人类疾病的治疗等都具有重要意义。以模式生物果蝇为主,介绍了昆虫干细胞的相关研究进展,重点集中在果蝇各种组织干细胞的鉴定与识别方面,包括研究较成熟的生殖腺内干细胞、中肠干细胞、马氏管干细胞、神经母细胞和造血干细胞。同时介绍了对干细胞维持起重要调控作用的各种信号途径的研究进展。这些昆虫干细胞的研究成果将为开展家蚕等鳞翅目昆虫的干细胞研究提供启示。
- 崔红娟李泰谈娟潘敏慧秦俭向仲怀
- 关键词：昆虫果蝇干细胞
- 昆虫造血作用和造血干细胞研究进展被引量：6
- 2011年
- 昆虫血细胞(insect hemocyte)在昆虫代谢、发育变态以及先天免疫等方面承担着重要的作用。昆虫只有先天免疫系统,血细胞所行使的免疫功能对于昆虫对抗外源病菌尤为重要。本文主要介绍了昆虫血细胞类型、造血作用、造血干细胞及造血相关因子的相关研究。通过特殊染色和形态学观察,果蝇Drosophila血细胞主要由3类细胞组成,而鳞翅目等大部分昆虫血细胞由5类细胞组成。昆虫血细胞主要存在于循环血液环境及造血器官内,而在这两个系统中都存在有进行复制的血细胞,这为研究昆虫造血干细胞特性和其定位提供了一个很好的系统。果蝇血细胞祖细胞来自于胚胎中胚层细胞,然后再分化为各种血细胞,这一系列分化过程由造血因子所调控。
- 谈娟周其明崔红娟
- 关键词：昆虫血细胞造血作用造血干细胞
- 家蚕多梳蛋白家族基因BmPsc的全长序列克隆及表达分析被引量：1
- 2013年
- 多梳蛋白(polycomb group,PcG)基因Bmi-1(B cell-specific MLV integration site-1)与人类造血干细胞以及多种肿瘤干细胞的维护相关,Bmi-1蛋白具有典型的N端Ring结构,通过结合核小体并抑制其重塑以实现抑制关键基因转录,具有沉默目的基因的功能。Bmi-1在昆虫中的同源基因为Psc(posterior sex combs)。采用RACE技术获得家蚕Psc基因(BmPsc)全长4 084 bp的序列。该基因位于家蚕第4号染色体上,是一个单外显子基因,ORF为3 291 bp,编码1 096个氨基酸,蛋白质分子质量121 kD,等电点(pI)为9.83;同源序列比对发现BmPsc与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)的Psc基因序列有58%的相似度,与果蝇(Drosophila melanogaster)的Psc基因序列仅有34%的相似度;氨基酸序列分析显示BmPsc具有保守的N端Ring结构。利用qRT-PCR检测家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄各时期幼虫血液中BmPsc基因的表达水平,发现BmPsc在各组织均有表达,在精巢以及卵巢中的表达明显较高,其次是翅原基(含造血器官),在循环血液中也有较高表达;在5龄各时期幼虫血液中的表达呈一定规律性,于蜕皮后的5龄第2天以及进入变态前的5龄第6天出现表达峰值,而在5龄中期(第4～5天)为表达低谷。研究结果为进一步阐释该基因在细胞水平以及个体水平对干细胞分化的抑制作用奠定了基础。
- 徐曼谈娟张奎王雪崔红娟
- 关键词：家蚕QRT-PCR
- 家蚕整合素基因Bmintegrin αPS3的鉴定及亚细胞定位被引量：7
- 2013年
- 【目的】克隆家蚕整合素基因BmintegrinαPS3,分析其mRNA表达及亚细胞定位特征,并进行原核表达及蛋白纯化,为进一步探究BmintegrinαPS3在家蚕中的功能奠定基础。【方法】利用RACE方法克隆获得BmintegrinαPS3的cDNA全长序列;采用RT-PCR方法检测BmintegrinαPS3的时空表达;在原核表达系统中表达获得BmintegrinαPS3重组蛋白;并构建BmintegrinαPS3真核表达载体,转染家蚕胚胎细胞系分析其蛋白亚细胞定位。【结果】家蚕整合素基因BmintegrinαPS3编码框全长为2 895 bp,编码965个氨基酸,含有整合素家族蛋白典型的integrin alpha结构域,预测其为跨膜蛋白。构建了BmintegrinαPS3的原核表达系统,并利用亲和层析纯化获得高纯度的BmintegrinαPS3原核表达蛋白,为进一步制备抗体获得足够的抗原。在家蚕细胞系中外源表达BmintegrinαPS3蛋白,显示其主要定位于细胞质和细胞膜中。另外,RT-PCR结果显示BmintegrinαPS3 mRNA在血细胞中为特异持续表达。【结论】获得了BmintegrinαPS3的完整cDNA序列及表达特征,经原核表达、纯化获得其融合蛋白,在细胞水平上初步分析了其亚细胞定位情况。
- 谈娟张奎徐曼陈思源崔红娟
- 关键词：克隆原核表达亚细胞定位
