许杨
- 作品数：3 被引量：33H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗卵巢癌相关抗原单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立被引量：1
- 2002年
- 目的 研究从卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者的腹腔积液中 ,纯化获得携带CA 12 5抗原决定簇的卵巢癌相关抗原。以此为免疫原 ,制备单克隆抗体 ,并建立放射免疫分析方法并应用于临床中。方法 腹腔积液经高氯酸分离 ,凝胶层析及亲和胶蓝柱层析纯化CA 12 5相关抗原。应用细胞融合技术 ,抗体采用ELISA方法、免疫印记技术进行鉴定。单克隆抗体经碘原法标记放射性核素1 2 5I ,初步建立 1种碘标固相双位点夹心模式的免疫放射分析法。结果 腹腔积液中CA12 5相关抗原经纯化 ,其比活度达 1.1× 10 6 U mg。共获得 6株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株 ,采用 2株配对最佳的抗体 ,初步建立 1种碘标免疫放射分析法。该方法可测下限为 1.2U ml ,批内变异系数为 4.4% ,批间变异系数为 9.6% ,平均回收率为 97.0 %。初步临床应用的结果表明在正常人血清中CA 12 5相关抗原平均值为 (2 .14 7± 3 .0 92 )U ml。在 60例卵巢癌患者中 ,平均值为 (10 6.5± 187.5 )U ml ,两者比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 以患者腹腔积液中纯化的CA12 5相关抗原制备单克隆抗体 ,并建立放射免疫分析方法 ,初步应用于临床血清学测定中 。
- 许杨范振符陈智周曹明华
- 关键词：CA125抗原单克隆抗体放射免疫分析肿瘤标志物卵巢癌
- 探讨HBV X、TGF-alpha,c-myc及beta-catenin基因与高发区肝癌的相关性
- 2004年
- 目的 研究HBVX基因、TGF alhpa、c myc、beta catenin等癌变相关基因及 2 49密码子突变的p5 3蛋白在高发区肝细胞癌癌变发生及其恶性表型维持所发挥的作用。方法 以肝癌高发区启东的肝癌细胞株 770 1和 770 3标本作为研究对象 ,以PCR及DNA测序分析方法确定HBVX基因在细胞DNA水平的整合。以RT PCR及Western blot检测HBVX基因的转录与表达。用PCR RFLP方法确定 p5 3基因 2 49密码子的错义突变。应用免疫组织化学法分析TGF alhpa ,c myc ,beta catenin的表达。结果 2株细胞在DNA水平都存在HBVX基因片断的整合 ,但未见完整的转录和蛋白水平表达。序列分析显示 2株细胞的HBVX基因的序列各有特异性 ,并存在 13 0、13 1密码子的热点突变。PCR RFLP分析说明 2个细胞株中p5 3基因 2 49密码子均属野生型。免疫组化显示 2株细胞中TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白均有显著的积累。 结论 本实验的结果显示HBVX基因对这 2株细胞恶性表型的维持并不存在必然的关联 ,而是 1种HBV感染的遗传标志。未见HBVX基因蛋白表达 ,可能由于X基因 3′端缺失变异所致。免疫组化的结果显示TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白的显著积累 ,说明多种癌基因的相互协同 ,可能与肝癌的发生。
- 许杨徐立斌高纪东冯志俊吴志远孙宗棠
- 关键词：HBVXC-MYC肝癌肝细胞
- 干扰RNA对HepG2肝癌细胞内源性c-myc表达的抑制作用被引量：32
- 2004年
- 目的 研究干扰RNA(RNAi)对HepG2细胞的c myc基因表达的干扰效应。方法 建立装载靶向c myc基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体。用脂质体法将此表达载体转染HepG2细胞株 ,以转染空载细胞作为对照。采用定量PCR和Westernblot检测c myc基因的表达。用流式细胞仪及荧光显微镜检测AnexinV标记的凋亡细胞。结果 转染siRNA的表达载体可以抑制内源c myc基因在转录和转译上的表达 ,抑制率达 6 7%。c myc基因的表达抑制与HepG2细胞的凋亡相关联。结论 转染siRNA的表达载体可明显抑制肝癌细胞株HepG2c myc基因的表达 。
- 许杨王益华高纪东叶珏朱红霞徐宁志王兴宇孙宗棠
- 关键词：干扰RNAHEPG2肝癌细胞肝细胞
