许晶晶
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目NSFC-河南人才培养联合基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非泛素化蛋白降解体系靶向敲减KRAS癌蛋白的初步研究
- 2016年
- 目的:尝试构建能与KRAS癌蛋白相互作用的"RBD+ODC"融合蛋白,经由"鸟苷酸脱羧酶/抗酶"系统(onithine decarboxylase/antizyme,ODC/AZ)在蛋白水平直接实现对KRAS癌蛋白的降解。方法:应用分子克隆的方法构建AZ、ODC、"RBD+ODC"、突变体"RBD+ODC"、突变体KRAS等真核表达质粒,分别瞬时转染人HEK293T和胰腺癌细胞PANC-1,应用Western blot法在蛋白水平直接检测外源性和内源性KRAS表达水平的改变,应用Co-IP法检测到"RBD+ODC"能够与KRAS癌蛋白相互作用。结果:成功构建了AZ、ODC、"RBD+ODC"、突变体"RBD+ODC"、突变体KRAS等多个真核表达质粒,相较于对照组,"RBD+ODC"能够在蛋白水平直接实现对外源性和内源性KRAS癌蛋白的"敲减",并且能够与KRAS有效结合。结论:靶向敲减KRAS癌蛋白的非泛素化蛋白降解体系的构建,为下一步功能试验奠定了基础。
- 马怡晖庞霞许晶晶夏培苡高汉青
- 关键词：功能结构域抗酶
- 肝细胞癌中乳腺癌扩增性抗原1的表达及其对上皮间质转化相关标记分子表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 研究乳腺癌扩增性抗原1（AIB1）、上皮间质转化（EMT）标记分子在肝癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系,观察RNA干扰沉默AIB1对HepG2细胞相应EMT标记分子的表达及细胞侵袭能力的影响.方法 用免疫组织化学染色法检测81例肝细胞癌标本中AIB1、EMT标记分子紧密连接蛋白（ZO-1）、上皮样钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和神经性钙黏蛋白（N-cadherin）的表达,并分析其临床意义.用以AIB1基因为靶点的pLenti6-AIB1 RNAi慢病毒载体感染肝癌细胞HepG2后,检测其AIB1及EMT标记分子mRNA和蛋白水平的表达,用Transwell分析细胞的侵袭能力.结果 肝细胞癌组织中AIB1蛋白表达水平明显高于正常癌旁组织.淋巴结转移性肝细胞癌中AIB1高表达的发生率是63％ （P ＜0.05）.癌组织中AIB1蛋白表达与E-cadherin蛋白呈明显负相关,而与Vimentin蛋白呈正相关.pLenti6-AIB1 RNAi慢病毒载体感染HepG2细胞后,AIB1mRNA和蛋白表达水平显著下降.感染后HepG2细胞侵袭能力明显下降;E-cadherin蛋白表达水平明显上调,Vimentin蛋白表达水平明显下降.结论 AIB1在肝细胞癌中表达增加,且与肝细胞癌侵袭性转移相关.沉默AIB1表达可引起肝癌细胞HepG2中Vimentin表达下降和E-cadherin表达增加,导致细胞侵袭性下降,提示AIB1通过诱导肝癌细胞的EMT过程而促进肝癌发生侵袭性转移.
- 许晶晶郭思余海波刘宇琼蔡建平薛瑞
- 关键词：上皮间质转化肝细胞癌淋巴结转移
- RBD+ODC及其突变体融合表达质粒的构建和表达验证
- 2016年
- 目的构建RBD+ODC及其突变体融合表达质粒,并进行验证。方法选取Ras下游效应分子Raf-1中能够与K-Ras蛋白相互作用的RBD+CRD氨基酸片段作为结合结构域,以ODC蛋白分子全长作为功能结构域。以正常人胰腺组织的c DNA为模板扩增相应的目的基因片段,应用分子克隆的方法通过在引物中引入GS片段使结合结构域和功能结构域相连并通过双轮PCR法在ODC功能位点引入突变,所获得的核苷酸片段均连入pc DNA3.1真核表达载体中。结果与结论经测序和Western Bolt验证,成功构建了RBD+ODC及突变体RBD+ODC的重组质粒,2种质粒均能够在人HEK293T细胞中正常表达。
- 马怡晖庞霞许晶晶夏培苡高汉青
- 关键词：功能结构域RBDODC
- TCT阳性病例与其HPV的相关性及HPV分型在ASC-US临床处理中的价值被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨薄层液基细胞学检测(TCT)阳性病例与其人乳头瘤病毒(HPV)检测的相关性及HPV分型检测在意义不明确的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)临床处理中的价值。方法:收集507例宫颈细胞学异常并进行HPV检测的病例,按病变严重程度分组,比较各组的HPV阳性率;对TCT为ASC-US且进行阴道镜下宫颈组织活检的215例病例,分析比较HPV分型检测与病理活检结果的关系。结果:按病变严重程度分为4组:非典型鳞状上皮细胞(ASC)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌(SCC),其HPV阳性率分别为50.17%、66.67%、76.34%、83.33%,4组之间差异有统计学意义(P<0.05)。215例ASC-US病例中HPV阳性率为43.26%,HPV阳性组和阴性组检出CINⅡ及以上分别为29.03%、4.92%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。93例HPV感染患者中,HPV分型检测感染排名前5位的依次为HPV16、58、52、33、18,其中HPV16及58阳性率分别为36.56%、27.96%。HPV16及58阳性组中检出CINⅡ及以上分别为17.20%、5.38%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:随着宫颈细胞学病变程度的增加,HPV阳性率逐渐升高,HPV分型检测对ASC-US的临床处理具有重要意义。
- 王延许晶晶张红新
- 关键词：薄层液基细胞学
