袁保梅
- 作品数：41 被引量：140H指数：8
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 重组小鼠canstatin N端片段对鸡胚新生血管生成的抑制作用(英文)被引量：2
- 2004年
- 为了研究重组小鼠canstatinN端片段的体内抗血管生成活性 ,通过PCR扩增小鼠canstatinN端片段cDNA ,定向克隆于原核表达载体 pET30a (+)中 ,构建小鼠canstatinN端片段重组表达载体 pET mCanN ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹检测小鼠canstatinN端片段的表达 .结果表明 ,IPTG诱导原核表达载体 pET mCanN在大肠杆菌E .coliBL2 1(DE3)中高效表达 ,小鼠canstatinN端片段表达量约占菌体总蛋白量的 18% ,小鼠canstatinN端片段主要以包涵体形式存在 ,包涵体经过洗涤、裂解、Ni spincolumn亲合柱层析以及蛋白质复性等步骤纯化后 ,获得了纯度约为 92 %的重组小鼠canstatinN端片段 .鸡胚绒毛尿囊膜 (chickenembryochoriollantoicmembrane ,CAM)实验表明 ,原核表达的小鼠canstatinN端片段能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成 .
- 侯卫红贾岩龙王天云柴玉荣袁保梅田芳王建民薛乐勋
- 关键词：CANSTATIN肿瘤血管生成抑制剂原核表达
- 盐藻hsp70a cDNA片段的克隆与分析被引量：10
- 2003年
- 根据衣藻、矮牵牛花、Pisumsativum等真核生物hsp70a氨基酸高度保守序列设计两对简并引物,以热休克盐藻cDNA为模板进行巢式PCR扩增,产物经T A克隆转化至JM109大肠杆菌中,经筛选后测序,将测序结果推导成氨基酸序列进行同源性分析,获得了盐藻热休克蛋白70acDNA片段。在盐藻中所获得的cDNA片段,核苷酸长度为372bp,编码126个氨基酸。推导的氨基酸序列与与下列物种的hsp70a比较:衣藻为96%,矮牵牛花为94%,Pisumsativum为86%,番茄为86%,人为85%,果蝇和酵母分别为84%和83%。所克隆的序列为盐藻hsp70acDNA片段。
- 姜国忠牛向丽吕玉民谢华王建民袁保梅徐培荣薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻CDNA克隆
- 粗牛角椒新品种郑椒505
- 田保明凌华张巧玲舒海燕翁海波李永欣袁保梅刘瑞瑞梁秋霞廉玉利赵珍
- 简要技术说明：(1)母本97C08选育“牛角椒”为河南一地方品种，具有丰产性好、品质优等突出特点，但抗病性较差。以“牛角椒”为种质材料，经超低能离子束诱变(N+/cm^2，诱变剂量7×1017，注入“牛角椒”干种子)，获...
- 关键词：
- 关键词：辣椒
- 人参皂苷Rb1对内源性Aβ所致小鼠神经细胞Tau蛋白过磷酸化的干预作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨人参皂苷Rb1对神经干细胞的保护作用及机制。方法将人参皂苷Rb1作用于APP转基因鼠分化中的神经细胞,用免疫荧光化学和免疫蛋白印记法测定总Tau蛋白磷酸化水平及Tau蛋白在Ser-396、Ser-262位点磷酸化水平。结果与阳性对照组相比,人参皂苷Rb1处理组Tau蛋白的总磷酸化水平及在Ser-396和Ser-262位点磷酸化水平明显下降;而与阴性对照组相比,Tau蛋白总磷酸化水平及在Ser-396和Ser-262位点的磷酸化水平明显增高。结论人参皂苷Rb1具有一定神经保护作用;其机制可能为直接促进神经细胞活性或通过调节Tau蛋白上游作用因子的活性。
- 李国栋袁保梅鄢文海邢莹
- 关键词：APP转基因小鼠TAU蛋白过磷酸化人参皂苷RB1
- 改良的降落PCR与普通PCR结果比较被引量：17
- 2003年
- 目的 :设计并验证一改良的降落ＰＣＲ(ＭＴＤ ＰＣＲ)程序。方法 :自盐藻ｂａｒｄａｗｉｌ中提取基因组ＤＮＡ作为ＰＣＲ模板 ,使用ＴａｑＤＮＡ聚合酶及ｐｆｕＤＮＡ聚合酶 ,运用普通ＰＣＲ和ＭＴＤ ＰＣＲ程序 ,扩增胡萝卜素生物合成相关基因 (ｃｂｒ)上游启动子序列 ,并电泳比较ＰＣＲ扩增产物的特异性。结果 :使用普通Ｔａｑ酶进行ＰＣＲ ,普通ＰＣＲ程序产生2 0 0ｂｐ , 50 0ｂｐ和 1 2 72ｂｐ的 3条带 ,而ＭＴＤ ＰＣＲ程序仅克隆出 1 2 72ｂｐ的特异带 ;利用高保真的ｐｆｕＤＮＡ聚合酶作ＰＣＲ ,在ＭＴＤ ＰＣＲ泳道中也仅有 1 2 72ｂｐ 1条带 ,而普通ＰＣＲ除了产生 1 2 72ｂｐ的特异带外 ,还出现 1条 50 0ｂｐ的非特异带。结论 :无论使用普通Ｔａｑ酶或高保真酶ｐｆｕ,改良的ＭＴ ＰＣＲ程序均明显提高ＰＣＲ的特异性 ,提示它可用于克隆普通ＰＣＲ难以克隆的基因片段 。
- 张贵星袁保梅许培荣薛乐勋
- 关键词：PCRPFUDNA聚合酶
- 杜氏盐藻核基质附着区的分离及特征性分析被引量：3
- 2005年
- 采用0.5%TritonX 100破碎细胞,15%Percoll分离盐藻细胞核,25mM二碘水杨酸锂(lithiumdi iodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇 沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC18载体上构建MARs文库。随机挑选6个克隆进行体外结 合实验筛选,筛选出一能与核基质结合的克隆,测序分析结果表明该序列具明显的MAR序列特征。
- 王天云袁保梅柴玉荣王建人薛乐勋
- 关键词：核基质附着区杜氏盐藻PERCOLLPUC18体外结合限制酶
- 杜氏盐藻RbcS基因cDNA片段的克隆和序列分析被引量：3
- 2005年
- 目的:克隆杜氏盐藻1,5 -二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)小亚基RbcScDNA片段。方法:根据 莱茵衣藻、团藻、玉米等真核生物的RuBisCO小亚基RbcS氨基酸的高度保守序列ETRSYLPP和MNKLPMFG,设计 一对简并引物,采用RT PCR方法及该简并引物克隆杜氏盐藻RbcScDNA。PCR产物经T A克隆与T vector相连, 转化大肠杆菌JM109,随机挑取数个菌落,筛选鉴定,对阳性克隆进行测序分析。将测序结果推导成氨基酸序列进 行同源性比较。结果:得到的cDNA长度为209bp,编码69个氨基酸。推导的氨基酸序列与团藻、Chloromonassp. ANT3、衣藻、伞藻、菠菜、玉米的RbcS相比较,同源性分别为85%、84%、82%、76%、70%、69%。结论:所克隆的序 列为杜氏盐藻RbcScDNA片段。
- 柴玉荣陈华艳王天云侯卫红袁保梅王建民薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶RBCS
- 和厚朴酚与染料木素配伍的新用途
- 本发明属于生物医药技术领域，具体公开了和厚朴酚与染料木素配伍在制备防治放射性肠损伤的药物中的应用，以及一种用于防治放射性肠损伤的药物。本发明通过细胞实验证实，和厚朴酚与染料木素配伍在人肠上皮细胞(HIEC)中显示出辐射保...
- 袁保梅陈虹李冠霖李国栋李子悦
- 双向电泳过程中的常见问题及解决方法被引量：7
- 2009年
- [目的]研究蛋白质组双向电泳中出现的问题及解决方法。[方法]培养野生型K12菌株Escherichia coli MG1655,分离其蛋白质样品并进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]双向电泳中存在蛋白质点没有出现或很少,纵纹与横纹现象严重等问题。[结论]该研究为以后开展双向电泳试验打下了基础。
- 舒海燕曹刚强凌华袁保梅田保明
- 关键词：双向电泳影响因素蛋白质组
- 拟南芥种子发芽新方法研究被引量：1
- 2009年
- [目的]研究简便易行的拟南芥种子发芽方法。[方法]以哥伦比亚生态型拟南芥种子为材料进行诱变处理后统计种子发芽率。[结果]结果表明,种子诱变处理发芽后,在白色的滤纸上,无论是发芽的幼苗还是没有发芽的种子,都可以非常清楚地看到。[结论]该方法克服了常规发芽方法的缺点,能够很方便地计算出种子的发芽率。
- 舒海燕曹刚强凌华袁保梅田宝明
- 关键词：拟南芥诱变发芽率半致死剂量
