蒋东辉
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省湛江市科技计划项目更多>>
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- 双氢青蒿素诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡及其机制被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨双氢青蒿素(DHA)对鼻咽癌CNE-2细胞的生长抑制作用及其机制。方法:以体外培养的CNE-2细胞为研究对象,分别采用CCK-8法观察不同浓度和时间DHA对CNE-2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪Annexin V-FITC法检测CNE-2细胞的凋亡率,caspase-3活性检测法检测不同浓度DHA处理后CNE-2细胞中caspase-3的活性变化。结果:CCK-8法显示,与对照组相比,随DHA浓度的增加,CNE-2细胞的增殖显著抑制(P<0.05);流式细胞仪Annexin V-FITC法,结果显示DHA诱导CNE-2细胞凋亡具有浓度依赖性;caspase-3活性检测法显示,与对照组相比,随DHA浓度的增加,caspase-3的活性显著提高(P<0.05)。结论:DHA能有效抑制CNE-2细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能是能上调CNE-2细胞中caspase-3的活性。
- 黄振河张月飞蒋东辉黄雪琴黄博罗国庆
- 关键词：鼻咽癌双氢青蒿素凋亡CASPASE-3
- 鼻咽癌干细胞的研究进展
- 2013年
- 鼻咽癌高发于我国华南地区、东南亚等地。目前鼻咽癌的治疗主要以放疗为主,因其高转移率及局部复发,5年生存率徘徊于10%～40%。目前鉴别肿瘤干细胞的＂金标准＂[1]是联合肿瘤细胞体外增殖实验及动物移植瘤实验。肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）具有分化潜能,其大部分子代细胞为非致瘤细胞,具有增殖能力但不能生发和维系肿瘤等特征,移植极少量该型细胞到免疫缺陷动物即可成瘤。
- 蒋东辉张月飞
- 关键词：肿瘤干细胞鼻咽癌细胞体外增殖联合肿瘤CELLS
- 鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体，并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC（SBI）试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体，使用透射电镜观察其形态特征，BCA法进行蛋白定量，Westernblot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物，透射电镜下观察呈圆形的囊泡，直径为40～130nm，具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-l、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg／mL（以蛋白计）的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体，ExoQtfick—TC（SBI）法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体，不需要超速离心，为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。
- 黄雪琴崔仲宜蒋东辉张月飞罗国庆
- 关键词：鼻咽癌细胞外泌体
- 人骨髓间充质干细胞诱导鼻咽癌上皮间质化的初步探讨被引量：2
- 2014年
- 目的初步探讨人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,hbMSCs）条件培养基（conditioned medium,CM）在人鼻咽癌CNE1及CNE2细胞上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）中的影响。方法取第3代hbMSCs融合达70%-80%时,换液培养24h后取其上清液（hbMSCs-CM）;取对数生长期5×103CNE1及CNE2细胞,分别在普通培养液（对照组）和hbMSCs-CM的培养液（实验组）中培养。使用倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,蛋白质印迹法及q-PCR检测EMT相关蛋白及RNA变化。结果 hbMSCs-CM培养鼻咽癌细胞5d,CNE1和CNE2均观察到细胞间距离增宽,并且折光性强、多量单极或双极梭形状成纤维细胞样细胞,以CNE2细胞最为明显。q-PCR检测结果显示,与对照组相比,hbMSCs-CM培养组细胞上皮细胞标志基因mRNA的相对表达水平下调,差异有统计学意义,P值均〈0.001;间质细胞标志基因mRNA相对表达水平上调,差异有统计学意义,P值均〈0.001;EMT相关转录因子基因mRNA相对表达量上调,差异有统计学意义,P值均〈0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,hbMSCs-CM诱导CNE1及CNE2细胞发生EMT并呈一定浓度依赖性。当hbMSCs-CM浓度≥70%,上皮细胞标志蛋白相对表达水平显著下降,差异有统计学意义,P〈0.05。当hbMSCs-CM浓度〉50%时,CNE1和CNE2细胞间质细胞标志及转录因子蛋白相对表达水平上调,差异有统计学意义,P〈0.05。结论 hbMSCs可改变鼻咽癌细胞形态,并下调细胞黏附蛋白及增加细胞间质蛋白水平,可能是参与鼻咽癌上皮间质转化过程的因素之一。
- 蒋东辉黄博张月飞李祥勇周克元罗国庆
- 关键词：鼻咽癌骨髓间充质干细胞上皮间质转化条件培养基
