范娅涵
- 作品数：23 被引量：52H指数：4
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理生物学更多>>
- CD26多克隆抗体的制备与鉴定
- 2009年
- 目的针对CD26酶催化结构域制备多克隆抗体。方法应用RT-PCR技术以人白细胞mRNA为模板,扩增获取编码CD26催化结构域的基因序列,克隆入原核表达载体PET32a后,转化BL21感受态细菌,经IPTG诱导表达得到his-CD26融合蛋白;亲和层析柱纯化并经Western-blot鉴定后,用此重组蛋白免疫2只新西兰纯种大白兔,获取免疫血清共180 ml,经蛋白A柱纯化及抗原抗体亲和纯化后,采用间接ELISA法检测抗体效价,Western-blot及免疫细胞化学染色进行抗体效价及特异性鉴定。结果构建出PET32a/CD26原核表达质粒,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达,经his亲合层析纯化后蛋白量达2.3 mg/ml;制备的多抗血清纯化后效价达256 000,经Western-blot证明能特异性的识别CD26重组蛋白,免疫细胞化学染色显示能特异的结合于H9细胞。结论成功制备了能特异性识别CD26的多克隆抗体。
- 宋敏范娅涵胡川闽赵树铭
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 人／猪造血嵌合体构建及特异性免疫耐受形成的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的初步探析人/猪造血嵌合体的构建及所诱导形成特异性免疫耐受的条件,为实现嵌合体人源性造血提供实验支持。方法实验分为3组,新生猪5只/组,实验1组:将人脐血来源CD34+细胞移植入正常新生小型猪体内后,持续注射人源SCF、EPO;实验2组:新生猪移植细胞后不注射人源因子;实验3组(正常对照组):新生猪注射生理盐水。移植后10、20、30、40、50、60d时取嵌合体猪外周血,检测人源CD71+细胞比例,同时检测猪外周血抗人种属抗体。结果2组嵌合体猪外周血中均有一定比例的人源CD71+细胞,但实验1组外周血比例显著高于同期实验2组(P<0.01);正常小型猪外周血于16d出现抗人种属抗体,嵌合体猪外周血于移植后50d出现,且抗体效价低于同龄正常猪。结论利用新生乳猪可建立人/猪造血嵌合体,可诱导形成供者型免疫耐受;在人源造血因子作用下,可实现人造血干细胞在嵌合体内分化。
- 赵树铭刘真蒋天伦范娅涵王昕
- 关键词：异种移植脐血嵌合体
- 格林巴利综合征伴呼吸肌麻痹患者行血浆置换的临床护理被引量：1
- 2015年
- 格林巴利综合征（Guillian Barre syndrome,GBS）伴呼吸肌麻痹是神经内科常见的急诊之一,病死率高。我科2014年1月至2015年5月利用血浆置换治疗GBS伴呼吸肌麻痹18例,1例因呼吸衰竭抢救无效死亡,其余17例均取得良好效果。现总结GBS伴呼吸肌麻痹患者行血浆置换的护理要点,报道如下。资料与方法一、临床资料18例患者中,男11例,女7例,年龄在31~56岁,
- 黄红梅蒋天伦黎儒青赵树铭陆华范娅涵
- 关键词：血浆置换呼吸肌麻痹格林巴利综合征临床护理
- 治疗用脐血干细胞的制备及初步临床应用被引量：7
- 2010年
- 目的制备满足临床干细胞治疗需要的脐带血干细胞制剂,观察脐血干细胞局部移植治疗肝硬化失代偿和股骨头坏死的初步临床疗效。方法建立标准化操作规程(SOP),进行脐带血的采集、分离和检测,制备脐带血干细胞制剂进行局部移植。选择进行局部移植干细胞制剂治疗的相关疾病患者共11例,其中肝硬化9例、股骨头缺血坏死2例;年龄30—65岁,平均51岁,男9例,女2例。结果制备的脐带血干细胞制剂有核细胞计数达(3.8±1.73)×109个,均达到治疗剂量,其中CD34+细胞比率为(1.93±0.54)%,CD105+细胞比率为(97.9±4.0)%。肝硬化失代偿期患者治疗后白蛋白水平逐步升高,1个月后与治疗前相比有明显升高(P<0.05)。肝硬化和股骨头缺血坏死患者经治疗后临床症状均有好转。结论脐带血干细胞移植可为临床多种疾病的有效治疗提供一种新手段。
- 范娅涵蒋天伦黎儒青杨仕明赵树铭
- 关键词：脐带血干细胞肝硬化股骨头缺血
- EPO上调人CD34^＋脐血干细胞CD26的表达
- 2009年
- 目的研究EPO对人CD34+脐血干细胞表面CD26表达的影响。方法应用流式细胞仪法检测经MACS-CD34+免疫磁珠分选并采用EPO处理后培养的人CD34+脐血干细胞,通过与酶底物反应检测人CD34+脐血造血干细胞表面CD26的表达情况。结果与对照组相比,经EPO 100 U/ml和EPO 200 U/ml 18h培养后的CD34+脐血造血干细胞群中CD26+细胞比例明显上升,其酶活性亦明显升高。结论EPO可上调CD34+脐血干细胞表面CD26的表达并增强其生物学功能。
- 范娅涵宋敏黎儒青蒋天伦赵树铭
- 关键词：EPOCD26脐血干细胞
- 重庆地区无偿献血者丙肝病毒感染及对献血者招募的影响(英文)被引量：10
- 2008年
- 近年来,中国的献血者招募模式正在从有偿献血到单位组织献血,进而到完全无偿献血的模式转变。有关真正的无偿献血者中丙型肝炎感染的资料还较少报道。本研究对重庆地区2003年的首次献血者进行丙型肝炎感染及病毒分型的调查,共有13620份血清标本进行ELISA丙型肝炎抗体检测,其中抗体阳性标本再经RT-PCR扩增HCVRNA的核心区/E2区片段进行基因分型。结果发现,HCV抗体阳性率为0.49%(67/13620),其中在40-49岁年龄段的阳性率(0.86%)最高;高学历人群和大城市生活人群的阳性率相对为高。丙肝病毒的基因分型结果显示,在22份基因分型阳性标本中有基因型1b,2a,3a和3b等四种,分别占4(18%)、5(23%)、9(41)和4(18%),以基因型3(包括3a和3b)为流行。结论:重庆地区无偿献血人群中丙型肝炎抗体阳性率较低;由于本地及周边地区静注毒品人群中丙型肝炎感染以基因型3为主,提示可能在献血人群中有静注吸毒者的存在。因此,随着献血模式的转变,在献血者的招募中应注意排除吸毒者这一高危人群。
- 赵树铭蒋天伦黎儒青GAO Feng-XiangLU LingZHENG Hao-Qiang胡建范娅涵李兵肖瑞卿Yury Khudoyakov
- 关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒感染基因型无偿献血者
- 人外周血富集白细胞层来源的树突状细胞的培养与鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的探讨从人外周血富集白细胞层(白膜)分离、培养树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法。方法用PBS液与白膜1∶1稀释,采用Ficoll淋巴细胞分离液对稀释后的白膜进行淋巴细胞分离,2h后弃悬浮细胞,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和DMEM完全培养液培养,体外培养第6天,加入肿瘤坏死因子(TNF-α),促进其分化成熟。用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测细胞表型。在倒置显微镜下观察细胞形态。结果显微镜下观察,细胞呈不规则形状,膜表面向外伸出许多树枝样细长突起;成熟DC细胞表面CD83、CD86、CD1a、HLA-DR分子表达明显增高;平均每份白膜(200mL全血)可以获得(3.87±0.31)×107个成熟DC。结论作者建立了一种从白膜中分离、培养树突状细胞的方法,可获得数量较多、纯度较高的DC,为DC瘤苗的来源开创了一条新途径,并为血液的合理利用找到了一个新方式。
- 史蓉华范娅涵赵树铭
- 关键词：树突细胞人外周血细胞培养
- 体外构建人巨核祖细胞/胃癌细胞融合体生成血小板的研究被引量：3
- 2011年
- 目的构建脐血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体产生功能性血小板。方法免疫磁珠分选人脐带血CD34+细胞,通过RPMI1640培养基体外静态培养,加入定向分化因子TPO、FL、IL-3、IL-6产生巨核祖细胞;复苏胃癌SGC7901细胞;采用聚乙二醇(PEG)化学融合法制备巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,HAT筛选系统分选融合细胞,继续培养;流式细胞仪检测培养孔上层液中类血小板颗粒表面CD41、CD62p表达,血小板聚集试验、粘附试验检测血小板功能,瑞氏染色观察颗粒形态。结果免疫磁珠分选的CD34+细胞培养7 d可增殖80倍,与胃癌SGC7901细胞株经PEG化学融合法融合成巨核祖细胞/胃癌细胞,融合率为(36.91±1.08)%;融合细胞培养10 d可增殖4倍,产生(6.1±1.21)×106/ml的类血小板颗粒;瑞氏染色后观察,其形态与正常血小板相似。类血小板颗粒表达血小板特异性标志CD41及血小板活化后标志CD62p,与正常血小板比较,CD62p在类血小板颗粒中表达略降低:正常血小板(74.11±1.71)%、类血小板颗粒(71.04±1.64)%;CD41表达明显降低:正常血小板(88.83±3.26)%、类血小板颗粒(72.51±2.79)%(t=6.59,P<0.05);聚集试验表明具有正常血小板相似的聚集功能;血小板粘附试验:正常血小板(40.43±1.63%)、类血小板颗粒(35.53±4.06%)。结论通过PEG细胞化学融合法构建的脐带血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体能产生功能性血小板。
- 雷慧芬范娅涵孟强尹智平陆华蒋天伦赵树铭
- 关键词：巨核祖细胞脐带血CD34+细胞胃癌SGC7901细胞血小板
- 消化道外Cajal细胞的研究进展被引量：1
- 2009年
- 张红军范娅涵
- 关键词：肠道外ICC
- 微粒型血小板干粉制剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种微粒型血小板干粉制剂及其制备方法和应用，该制剂按体积份计由以下组分制成：浓度为1×10<Sup>9</Sup>～2×10<Sup>9</Sup>/ml的血小板5～30份、白蛋白浓度≥45g/L的血浆0.1...
- 赵树铭黎儒青李静范娅涵蒋天伦
- 文献传递
