罗大极
- 作品数：11 被引量：66H指数：4
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 饥饿状态下转基因鲤鱼和对照鲤鱼血清生长激素的表达研究被引量：3
- 2009年
- 研究采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)技术,比较分析了转GH基因鲤鱼和对照鲤鱼在饥饿和饱食状态下血清生长激素水平的变化规律,并探讨其可能机制。实验结果表明,在投喂实验中,转基因鲤鱼和对照鲤鱼血清生长激素水平均无明显变化,但转基因鲤鱼血清生长激素远高于对照鲤鱼,分别为(142.0±4.9)ng/mL和(1.6±0.2)ng/mL,转基因鲤鱼体重增长速率显著高于对照鱼。在饥饿实验中,转基因鲤鱼的血清生长激素迅速下降,从(142.0±4.9)ng/mL降至(46.0±3.2)ng/mL,而后稳定在这一较低水平;对照鲤鱼血清生长激素持续上升,从(1.6±0.2)ng/mL升至(10.9±1.4)ng/mL,体重负增长速率没有显著差异。研究结果提示,转GH基因鲤鱼血清生长激素的调控机制与对照鲤鱼的不同,其表达水平不受脑垂体反馈抑制调控机制的影响,而与重组GH基因中β-actin基因启动子的调控模式相关。
- 钟山罗大极汪亚平陈竹管波廖兰杰朱作言
- 关键词：生长激素饥饿ELISA
- 鲫鱼生长激素Ⅰ基因内含子2的多态性分析被引量：23
- 2004年
- 利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (Denaturing PolyacrylamidGelElectrophoresis,DPAGE)和单链构象多态性(Single StrandConformationPolymorphism ,SSCP)分析技术 ,在普通鲫鱼种群 (7个野生鲫鱼群体和 2个金鱼群体 )和银鲫种群 (1个方正银鲫群体 )共 16 2个个体生长激素Ⅰ (GrowthHormoneⅠ ,GHⅠ )基因的内含子 2中检测到丰富的长度和序列多态性。在所有群体中 ,GHⅠ基因内含子 2的长度存在 7种类型 ,分别为A、B、C、D、E、F和G型 ,变异频率为 4 32 % ;其序列存在 15种单倍型 ,分别为A1、A2、A3、B、C1、C2、D1、D2、D3、D4、D5、E1、E2、F和G型 ,变异频率为 9 2 6 %。对这 15种单倍型的DNA序列进行分析 ,结果表明 :1)鲫鱼GHⅠ基因内含子 2的扩增DNA片段长为 2 4 3～ 2 6 3bp ,其中包括部分外显子 2 (3′端 ,33bp)、内含子 2和部分外显子 3(5′端 ,2 1bp)。 15种单倍型A、T、G、C碱基平均百分比组成分别为 34 13%、37 36 %、15 13%、13 38% ,其中G +C(2 8 5 1% )含量明显小于A +T(71 4 9% )含量。内含子 2与外显子 2、3的接头区存在GT—AG保守序列 ,此为真核基因中mRNA剪接的识别信号。内含子 2的 5′端存在有一序列为GTAAGAT的保守区域 ,在其近 3′端分布有一高丰度嘧啶区 ;2 )内含子 2的
- 莫赛军宋平罗大极彭茂宇张亮姚海兰周伟张竟男潘云峰郑曙明
- 关键词：鲫鱼GH内含子多态性
- 两种不同终止子在转基因鲤鱼中的促生长效应被引量：4
- 2009年
- 转基因构建体中启动子的选择会直接影响转植基因的活性,近年来有研究表明转基因构建体中终止子的选择会一定程度地影响转植基因的活性。为了更好地筛选转基因构建体和培育快速生长的转"全鱼"生长激素(Growth hormone,GH)基因鱼,文章用鲤鱼β-actin基因终止子和生长激素基因终止子分别构建了转基因构建体,显微注射得到转"全鱼"GH基因鱼P0代养殖群体,比较两种不同终止子构建体的活性。统计分析发现,生长激素基因终止子构建体的养殖群体的体重频率呈正态分布且平均体重显著高于β-actin基因终止子构建体的养殖群体,β-actin基因终止子构建体的养殖群体的体重频率呈右倾趋势的非正态分布。值得一提的是在混合养殖组中得到一条生长最为快速的鲤鱼证实为转基因阳性且为生长激素基因终止子构建体的转基因鲤鱼。该结果表明转"全鱼"生长激素基因鲤鱼可快速生长,并能将转植基因向下代遗传。实验结果提示生长激素基因终止子构建体比β-actin基因终止子构建体表现的促生长活性要强。
- 钟山罗大极吴刚徐婧汪亚平朱作言
- 关键词：生长激素基因转基因鱼终止子
- 血清sE-cadherin、CXCL16含量对宫颈癌病灶内恶性生物学行为的评估价值被引量：6
- 2017年
- 目的:研究血清可溶性E-钙黏素(sE-cadherin)、趋化因子配体16(CXCL16)含量对宫颈癌病灶内恶性生物学行为的评估价值。方法:选择2014年8月~2017年4月期间在黄冈市中心医院接受手术治疗的宫颈癌患者作为研究的宫颈癌组,选择同期在黄冈市中心医院体检的健康者作为对照组。测定宫颈癌组和对照组血清中sE-cadherin、CXCL16的含量以及宫颈癌组患者宫颈癌病灶、癌旁病灶内增殖基因、侵袭基因的mRNA表达量。结果:宫颈癌组患者血清中sE-cadherin的含量显著低于对照组,CXCL16的含量显著高于对照组;宫颈癌病灶组织中SP2、SND1、ANGPTL4、S6K1、Rab11、S100A6、N-cadherin、MMP9的mRNA表达量显著高于癌旁病灶组织,且与血清中sE-cadherin的含量呈负相关、与血清中CXCL16的含量呈正相关,TET1、HSG、FHIT的mRNA表达量显著低于癌旁病灶组织,且与血清中sE-cadherin的含量呈正相关、与血清中CXCL16的含量呈负相关。结论:宫颈癌患者血清中降低的sE-cadherin以及升高的CXCL16能够评估病灶内增殖及侵袭的恶性生物学行为。
- 肖欢罗大极
- 关键词：宫颈癌
- 基于线粒体D-loop区比较分析野生与养殖斜带髭鲷种群的遗传多样性被引量：16
- 2011年
- 采集广东省深圳市南澳区野生斜带髭鲷Hapalogenys nitens(Richardson)和养殖斜带髭鲷各25个样本。通过设计特异性引物,采用PCR技术对该50个个体的mtDNA D-loop区全序列进行扩增,测序得到的序列进行比对,发现该50个序列长度变异较小,均在788—790 bp之间,野生型和养殖型区别不大。采用MEGA(version 4.0)和DnaSP(version 4.0)软件对序列进行分析,结果显示:50条序列中T、C、A和G碱基平均含量分别为29.9%、21.5%、35.2%和13.5%,其中A+T的含量(65.1%)显著高于G+C含量(34.9%),表现了明显的碱基偏倚。50个个体表现为26种单倍型,包括91个多态位点,单倍型间平均遗传距离为0.024,单倍型多态性(h)为0.958,核苷酸多态性(π)值为0.02277。研究表明,mtDNA D-loop区可以作为检测野生与养殖斜带髭鲷群体遗传多样性的有效分子标记,而广东省深圳市南澳区野生斜带髭鲷种群遗传多样性已经下降至中等水平。研究提示野生斜带髭鲷种群遗传多样性不容乐观,资源调查、种质维护与遗传评价有待深入。
- 陈竹钟山罗大极杨国华梁日深邹记兴
- 关键词：斜带髭鲷线粒体基因组D-LOOP
- 转录激活因子样效应物敲除klf4 b基因的质粒构建与鉴定
- 2015年
- 目的： KLF4是哺乳动物细胞中调控和维持全能性的关键因子，构建与鉴定klf4 b基因敲除的有效位点与相关质粒，以期构建klf4 b基因敲除动物模型研究其功能。方法转录激活因子样效应物核酸酶是目前最有效敲除和编辑基因的基因工程技术之一，设计和组装了klf4 b基因TALENs质粒，在胚胎和整体动物水平验证其有效性。结果成功组装了两对klf4 b基因TALENs质粒，显微注射胚胎后，经检测其中一组成功诱导klf4 b靶向区域突变，突变类型既有插入型也有缺失型；遗传检测显示这些突变型高效的遗传给了下一代。结论在斑马鱼中有效敲除了klf4 b基因，成功获得了斑马鱼klf4 b突变群体；为进一步阐释斑马鱼中klf4 b基因的生物功能提供了良好的研究材料，也为全面理解哺乳类klf4基因的功能提供了研究模型。
- 毛强邱超鲁黎马海燕程彬梁丹罗大极
- 关键词：基因敲除斑马鱼
- 青鳉foxl2基因敲除突变体的构建与表型分析被引量：9
- 2019年
- 【目的】建立青鳉(Oryziaslatipes)foxl2基因突变体材料,为阐释foxl2基因功能提供良好的动物模型和研究基础。【方法】利用CRISPR/Cas9技术敲除青鳉foxl2基因,建立突变体材料。观察foxl2基因突变体的第二性征、性腺等形态特征;组织学分析性腺结构与性腺中细胞类型;用定量PCR检测性腺发育相关基因的表达情况。【结果】通过CRISPR/Cas9技术成功敲除青鳉foxl2基因,建立foxl2基因缺失4个碱基的青鳉突变体。从第二性征与性腺表型上,foxl2-/-突变体均表现为生理雄性;组织切片分析发现,foxl2-/-突变体的性腺结构与野生型卵巢和野生型精巢均有显著差异,存在退化的核仁外周卵母细胞与精子,提示foxl2-/-的性腺在组织结构上类似精巢;定量PCR结果显示,foxl2-/-突变体中雄性性腺发育关键基因sox9b、gsdf、amh等的表达量升高,雌性性腺发育关键基因cyp19a1a等的表达量下降。【结论】通过CRISPR/Cas9技术成功建立青鳉foxl2基因缺失的突变体,foxl2-/-突变体有遗传雌性、生理雄性的表型特征,foxl2对维持青鳉性腺功能有重要作用。
- 周运迪吴星星赵海萍罗大极
- 关键词：青鳉FOXL2基因敲除性腺发育
- 基于S7核糖体蛋白基因部分序列的10种石鲈科鱼类的系统发育关系被引量：4
- 2010年
- 分析了石鲈科4属10种鱼类S7核糖体蛋白基因内含子1部分序列特征,采用MP法和NJ法构建系统发育树。结果表明,在分子系统树上,10种石鲈科(Haemulidae)鱼类共组成两大类群,其中髭鲷属(Hapalogenys)鱼类和胡椒鲷属(Plectorhynchus)鱼类聚成一类群,石鲈属(Pomadasys)鱼类和仿石鲈属(Haemulon)鱼类聚成一类群,两类群再聚成一支,10种石鲈科鱼类构成单一分支类群。髭鲷属鱼类跟胡椒鲷属鱼类的亲缘关系较近。基于遗传距离分析表明,相对于石鲈属,髭鲷属鱼类跟仿石鲈属鱼类的遗传距离较小。因此,研究结果支持髭鲷属的分类地位是介于胡椒鲷属和仿石鲈属之间,未能从石鲈科中独立出来形成髭鲷科(Hapalogeniidae)。
- 梁日深杨国华罗大极钟山邹记兴
- 关键词：系统发育
- 过夜培养对不同质量冻融胚胎治疗结局的影响被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨过夜培养对不同质量冻融胚胎、囊胚治疗结局的影响。方法:回顾性分析大理大学第一附属医院开展的1 326个冻融胚胎移植(FET)周期的患者资料。根据实验目的,分为过夜培养组和常规培养组,对比分析两组间优质胚胎、非优质胚胎、优质囊胚、非优质囊胚移植患者的临床妊娠率。结果:优质胚胎、非优质囊胚移植患者的临床妊娠率在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。过夜培养组非优质胚胎移植患者的临床妊娠率显著高于常规培养组(36.36%vs. 25.89%,P=0.021),而过夜培养组优质囊胚移植患者的临床妊娠率显著低于常规培养组(51.25%vs. 65.13%,P=0.040)。结论:过夜培养有利于改善非优质冻融胚胎的治疗结局,而不利于优质冻融囊胚的治疗。
- 吴睿张丽蓉胡志富于成和张若鹏罗大极
- 关键词：胚胎胚胎质量冻融胚胎
- 斑马鱼体细胞核移植胚胎早期发育的再程序化分子机制研究
- 罗大极
- 关键词：斑马鱼体细胞核移植再程序化抑制性差减杂交
