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抗菌肽CM Ⅳ突变体基因在E.coli中融合表达的研究被引量：23: 1997年; 根据家蚕抗菌肽CMⅣ的氨基酸序列,利用E.coli偏爱的密码子设计并合成其突变体DNA,克隆到融合表达载体pEZZ318中,在E.coli中进行融合表达,经亲和层析得到26mg/L的融合表达产物.用化学方法裂解该融合表达产物,得到了具有抗菌活性的突变体抗菌肽CMⅣ.; 谢维窦非吴海宏董雪吟华子春徐贤秀; 关键词：抗菌肽大肠杆菌

中国家蚕抗菌肽CMIV变体在大肠杆菌体系中的高效表达及其体内外活性的初步研究: 为了更好的研究抗菌肽,需要构建一个高效表达,易于纯化的表达体系以制备大量的抗菌肽.研究人员采用大肠杆菌表达系统进行抗菌肽CMIV变体的表达,首先研究人员将抗菌肽CMIV基因及其变体基因X(在CMIV基因的3'-端加了一个...; 窦非; 关键词：家蚕抗菌活性抗肿瘤活性; 文献传递

抗菌肽CMIV末端结构对其活性的影响被引量：44: 2000年; 抗菌肽作为一种新型多肽药物越来越受到人们的重视 .但是到目前为止对于抗菌肽的作用机理仍然不太明确 .将抗菌肽CMIV基因及其变体基因X克隆入GST融合表达系统 .分别用不同的切割试剂切割后得到N 端具有多余氨基酸的抗菌肽CMIV以及C 端未酰胺化的抗菌肽CMIV ,这些多肽均丧失了抗菌活性 ,而N 端无多余氨基酸 ,以及C 端加进 1个天冬酰胺的多肽具有抗菌活性 .实验结果提示 :抗菌肽原有的末端结构对其生物活性至关重要 .; 窦非谢维董雪吟徐贤秀; 关键词：抗菌肽抗菌活性多肽药物

含有FXa切割位点的抗菌肽X在大肠杆菌中的融合表达被引量：10: 2000年; PCR method was used to introduce the code sequence of Factor Xa cleavage site to the 5′ end of cecropin CMIV mutant gene X,then the gene was cloned into the expression vector pGEX KG,and was highly expressed in E.coli BL21 by IPTG induction.The fusion protein was purified by affinity chromatography and was cleaved by Factor Xa.Cecropin X with antibacterial activity was obtained after purified by ion exchange chromatography.; 袁榴娣窦非梁玉璞谢维王芳张双全戴祝英; 关键词：抗菌活性

抗菌肽CMIV变体的制备及对临床耐药致病菌作用的初步研究被引量：3: 1997年; 应用新的融合方法制备抗菌肽ＣＭＩＶ变体；了解重组型抗菌肽变体对几株临床耐药菌的抗性。通过基因工程的手段，将合成的抗菌肽ＣＭＩＶ的ｃＤＮＡ与根据金黄色葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）的ＩｇＧ结合结构域设计并合成的ＺＺ结构域基因融合，在大肠杆菌细胞中表达；用制备的ＣＭＩＶ变体进行抑菌圈试验和液相试验。结果表明５ｕｌ（１０ｕｍｏｌ／Ｌ）抗菌肽可在大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１平板上产生直径１５ｍｍ的抑菌圈；抑制５０％大肠杆菌生长的抗菌肽浓度约０．２ｕｍｏｌ／Ｌ。６种青霉素抗性的革蓝氏阴性菌的抑菌圈直径在６～１３ｍｍ之间；而同样的条件下，对革蓝氏阳性菌——金黄色葡萄球菌的作用很弱。用新的融合方法可通过大肠杆菌体系制备有活性的抗菌肽变体。; 谢维谢维张雪萍张建琼邱奇峰张雪萍; 关键词：抗菌肽抑菌试验致病菌生物制品

含凝血因子FXa识别位点的融合表达体系的构建被引量：1: 2000年; 目的 :研究含凝血因子FXa识别位点的基因与表达载体pGEX KG连接后在大肠杆菌中的表达。方法 :用PCR对人工合成的抗菌肽X基因的 5′端进行改造 ,引入FXa的酶切位点 ,用限制性内切酶作用后 ,连接到含Ptac启动子的表达载体pGEX KG中 ,转化大肠杆菌DH5α,用原位杂交法筛选到阳性克隆。转化大肠杆菌BL2 1,用异丙基硫代 β D半乳糖(IPTG)诱导。结果和结论 :抗菌肽X基因在大肠杆菌中获高效表达 ,表达量约占细胞总蛋白的 2 0 %。重组蛋白以可溶形式存在。融合蛋白经FXa切割后。; 袁榴娣谢维窦非梁玉璞; 关键词：抗菌肽基因克隆

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窦非