程文杰
- 作品数:6 被引量:150H指数:4
- 供职机构:海南大学农学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 大薯种质资源遗传多样性分析
- 大薯(Dioscorea alata L.),又名参薯,为薯蓣科薯蓣属藤本植物;生育期短,产量潜力高,且具有一定的药用价值。本研究以产自海南、云南、广西、广东、福建5省的133份大薯种质为材料,对其农艺性状进行观察记录分...
- 程文杰
- 关键词:RAPDISSR
- 文献传递
- 大薯ISSR-PCR反应体系的优化被引量:1
- 2010年
- 以大薯为材料,通过试验优化了ISSR-PCR反应体系中的主要成分用量及浓度、退火温度对大薯ISSR扩增结果的影响。试验表明:在20μL的反应体系中,Mg2+的浓度为1.875 mmol/L,dNTPs浓度为0.500 mmol/L,引物的浓度为1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为60 ng,在48℃的退火温度下45个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。
- 程文杰罗欣周鑫黄小龙黄东益
- 关键词:ISSR
- 几种真菌DNA提取方法的比较被引量:125
- 2009年
- 通过3种内生真菌DNA提取方法的比较,即CTAB法、SDS法、改良的CTAB法,结果表明三种方法都能得到目的DNA,而且得率都较好,但改良的CTAB法效果最好,不仅DNA纯度高且质量也好。用改良的CTAB法所提取的DNA作为模板,进行PCR扩增,得到了清晰的、单一的扩增普带,完全可用于酶切、测序等后续实验。
- 吴发红黄东益黄小龙周鑫程文杰
- 关键词:内生DNA提取CTABSDS
- 利用改良CTAB法提取淮山叶片高质量DNA被引量:6
- 2009年
- [目的]为淮山的分子生物学研究奠定基础。[方法]以淮山嫩叶为试材,用改良CTAB法提取其中的DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增对所得DNA的质量和浓度进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]所提取DNA的分子量与λDNA相近,各泳道均出现1条清晰的DNA条带,且条带的完整性较好,无蛋白质和RNA污染,无DNA降解现象;以所提DNA为模板进行ISSR-PCR扩增,可获得稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法简单高效,所得DNA质量较高,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析时,条带清晰,多态性较好。
- 李月仙黄东益黄小龙周鑫程文杰罗欣
- 关键词:基因组DNA改良CTAB法
- 毛薯ISSR-PCR反应体系的建立被引量:6
- 2010年
- 本研究主要建立毛薯ISSR-PCR的最佳反应体系。研究采用改良CTAB法提取毛薯总基因组DNA,应用单因子实验法设定模板DNA,Mg2+浓度,dNTP浓度,Tap酶浓度以及退火温度的5个不同梯度,探讨单因素变化对毛薯ISSR-PCR扩增的影响。实验结果表明,毛薯ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积20μL,模板DNA为50ng、Taq酶为0.8U、Mg2+浓度为2.0mmol/L、引物浓度为0.5μmol/L、dNTPs浓度为0.5mmol/L。
- 罗欣周鑫程文杰黄小龙黄东益
- 关键词:ISSR-PCR
- 淮山RAPD-PCR反应体系的建立被引量:4
- 2010年
- 试验旨在获得最佳的淮山RAPD-PCR反应体系,供试材料来自海南大学农学院淮山资源圃。采用改良CTAB法提取淮山的叶片总DNA,通过单因子实验法分析DNA浓度、引物浓度、dNTP浓度、Taq聚合酶以及Mg2+浓度对RAPD-PCR扩增结果的影响,建立了适合于淮山RAPD-PCR反应体系,即20μL体系中包括:模板DNA为50ng、Taq酶为0.2U、Mg2+浓度为3.0mmol/L、引物浓度为0.2μmol/L、dNTPs浓度为0.2mmol/L。
- 周鑫程文杰罗欣黄小龙陈吉良黄祖旬吴文嫱黄东益
- 关键词:RAPD-PCR