石拓
- 作品数：17 被引量：303H指数：13
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家攀登计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 中国对虾一种C型杆状病毒的纯化技术及形态特征研究被引量：17
- 1997年
- 染病中国对虾于1995年7月取自青岛崂山对虾养殖场。为探索对虾杆状病毒分离纯化技术，采用组织超薄切片技术对染病对虾进行电镜观察；被病毒感染的对虾经组织匀浆、差速离心和密度梯度离心。纯化出杆状病毒粒子；纯化的杆状病毒经磷钨酸钾负染色，于透射电子显微镜下观察形态结构。结果表明，中国对虾中肠组织的细胞核被大量的有囊膜无包涵体的杆状病毒侵染，属C型杆状病毒；病虾头部组织以6000r／min匀浆，6000r／min与10000r／min差速离心，再经10％－50％蔗糖密度梯度，可纯化出形态完整的杆状病毒粒子；与所有已报道的对虾杆状病毒不同，中国对虾完整的病毒粒子带有一很长的尾，可达病毒体的1．5倍以上。经Tritonx－100处理，获得脱去囊膜的核衣壳，衣壳系由两个帽端夹14圈螺旋形成对称的圆柱体结构。
- 孔杰石拓刘萍包振民郭福生相建海
- 关键词：中国对虾病毒纯化
- 中国对虾遗传多样性的RAPD分析──朝鲜半岛西海岸群体的DNA多态性被引量：61
- 1999年
- 1997年4月自黄海越冬场采集中国对虾朝鲜半岛西海岸群体样品。采用RAPD技术对该群体共33个个体的基因组DNA多态性进行了检测。利用20个随机寡核苷酸引物共检测105个位点，其中多态位点41个，占39％。单个引物获得的标记为1－10个，分子量为180－2200bp。个体间的平均遗传距离为0．093，群体的平均余合度为0．2176。表明该对虾群体的遗传多样性较低。低水平的遗传多样性一方面使中国对虾的生存情况更加危险，同时其本身也可能是对虾对病害、恶劣环境等不利因素的抵抗力下降，从而导致资源衰退的原因之一。研究结果证实：在检测种群遗传变异度大小方面，RAPD具有比同工酶更高的灵敏度和分辨率。
- 石拓孔杰刘萍韩玲玲庄志猛邓景耀
- 关键词：中国对虾RAPD多态位点
- 暴发性流行病病原对中国对虾亲虾人工感染及对子代影响的PCR检测被引量：42
- 1999年
- 1997年4月在山东海阳市近海捕获10尾中国对虾，采用患暴发性流行病的虾池中的病虾为毒种，进行人工感染试验。采用两次聚合酶链反应（PCR）检测方法，对感染亲虾的胃、腮、卵巢，以及卵和各期幼体进行跟踪检测。对经人工感染的10尾亲虾组织的PCR检测结果表明，6尾虾的胃样呈阳性，其中4尾为第1次检测出阳性；1尾虾的腮样呈阳性；2尾虾的卵巢样呈阳性，且其所产的卵子也呈阳性；每尾亲虾产卵所孵化出来的各期幼体，经两次PCR检测均呈阴性。随着实验水温的上升，人工感染病毒的亲虾存活的时间缩短；卵子的孵化率随着对亲虾感染时间的增长而有大幅度降低的趋势。
- 刘萍ns.qd.sd.cn孔杰石拓刘志鸿李健韩玲玲
- 关键词：亲虾子代PCR检测
- RAPD标记鉴别红鳍东方鲀和假睛东方鲀种群的初步研究被引量：10
- 1999年
- 用ＲＡＰＤ技术对东方纯属（Ｆｕｇｕ）的红鳍东方鲀（Ｆｕｇｕ ｒｕｂｒｉｐｅｓ）和假睛东方鲀（Ｆｕｇｕｐｓｅｕｄｏｍｍｕｓ）共三个群体进行分析，经２０个随机引物扩增，得到每一个体的多态片段。比较所有图谱，没有发现能够鉴别三个群体的特异性谱带；而且采自日本的红鳍东方纯与采自中国的红鳍东方鲀的电泳图谱基本相似。结果还表明，红鳍东方纯与假睛东方鲀电泳图谱的差异也甚小，说明二者的亲缘关系非常接近，这与以前用同工酶进行分析的结果相一致（王可玲等，１９８４），
- 刘振辉石拓柳学周陈超孔杰
- 关键词：RAPD标记红鳍东方TUN种群
- 中国对虾杆状病毒一个DNA片段序列测定被引量：13
- 2003年
- 孔杰刘萍石拓相建海
- 关键词：中国对虾杆状病毒
- 中国对虾黄渤海沿岸群亲本及子一代RAPD分析被引量：30
- 2000年
- 1997年 3月从山东海阳市近海捕获中国对虾 ,取两尾单独暂养 ,产卵后培育出子代 ,用随机扩增多态性 DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技术对亲本和子代的基因组 DNA进行多态性研究 ,目的是在分子水平上了解亲本与子一代之间的遗传结构 ,比较了两个家系的遗传差异。结果表明 ,使用 OPG系列 2 0个引物 ,有 16个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物 ,扩增的多态性片段分子量大小在 2 6 0 0～ 2 2 0 bp之间。家系 A检测 78个位点 ,其中多态位点数为 14个 ,占17.95% ,家系 B检测 88个位点 ,其中多态位点数为 18个 ,占 2 0 .4 5%。家系 A父本对其子代的遗传距离为 0 .0 4 50± 0 .0 0 93,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 570± 0 .0 0 87,30个个体之间的遗传距离为 0 .0 2 83± 0 .0 0 95;家系 B父本对其子代的遗传距离为 0 .0 52 3± 0 .0 12 4 ,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 6 4 1± 0 .0 132 ,2 8个个体之间的遗传距离为 0 .0 384± 0 .0 155。研究结果进一步证实 ,子代之间的遗传距离比其父、母与子代之间更小 ,遗传变异程度更低。另外 ,发现了与性别有关的 12 0 0 bp的片段。
- 刘萍孔杰石拓刘志鸿邓景耀庄志猛徐怀恕韩玲玲
- 关键词：中国对虾RAPD分析
- 日本对虾野生和养殖群体遗传多样性的RAPD分析被引量：38
- 2001年
- 为加深和丰富对我国最为重要的经济虾类之一日本对虾(Penaeus japonicus)遗传多样性的认识,分析了日本对虾一个野生地理种群(台湾海峡北部)及其移植到北方水域进行繁育的养殖群体各23个个体的随机扩增DNA多态性。实验选取OPK组20个10 bp随机引物中的17个产生效果稳定的扩增结果用于群体遗传多样性分析,在两个群体中共检测出155个位点,野生种群和养殖群体的多态比例分别为85.14％和78.62％.用经修正的Shannon表型多样性指数量化两个群体的遗传多态度,野生种群和养殖群体的遗传多态度分别为0.214和0.201;两群体的遗传相似度为94.20％,遗传距离为0.058.
- 庄志猛孔杰石拓刘萍邓景耀戴继勋
- 关键词：日本对虾RAPD随机扩增多态DNA野生种群养殖群体
- 杆状病毒感染越冬亲虾(Penaeus chenesis)的研究——越冬亲虾感染及其垂直传播的可能性被引量：27
- 1997年
- 在中国对虾越冬亲虾中检出杆状病毒。经对病虾鳃、前中肠、卵巢组织进行电镜观察，在这些组织中发现大量有囊膜的杆状病毒。病毒粒子大小约为３６７ｎｍ×１２８ｎｍ，核衣壳为３２４ｎｍ×９２ｎｍ。病毒在细胞内不形成包涵体，在核内或在细胞质的发生基质中装配。从病毒的形态特征、感染组织以及典型的发病症状和病理变化，初步认为亲虾感染的病毒与近年广泛报道的造成养殖对虾大规模流行病的主要原因——中国对虾杆状病毒为同一种。卵巢组织也是病毒的主要靶器官之一。
- 包振民胡景杰姜明姜明刘晓云石拓孔杰
- 关键词：中国对虾越冬亲虾杆状病毒生殖细胞
- 中国对虾两个不同地理种群遗传结构的RAPD分析被引量：17
- 2000年
- 采用RAPD技术对中国对虾中国黄渤海沿岸种群 (HB)和朝鲜半岛西海岸种群 (PK)的遗传多样性进行检测 .2 0个随机引物 (OPD系列 )在二个种群中都扩增出 148条DNA片段 ,其中多态性片段数分别为 5 4条和6 5条 ,多态性片段的比例分别为 36 .49%和 43.92 % ,种群的平均杂合度分别为 0 .1981和 0 .2 375 .实验表明 ,中国对虾朝鲜半岛西海岸种群的遗传多样性要比中国黄渤海沿岸种群高 ,但二个种群都处于较低的遗传变异水平 .由此显示 ,中国对虾的种质资源须进行科学管理与保护 .图 1表 2参
- 刘振辉孔杰石拓刘萍孟宪红庄志猛邓景耀
- 关键词：中国对虾RAPD技术
- 中国对虾黄、渤海沿岸地理群的RAPD分析被引量：54
- 2000年
- 采用随机扩增多态 ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ，简称ＲＡＰＤ）技 术，对中国对虾的黄、渤海地理群的３２个个体遗传多样性进行了检测．使用ＯＰＩ系列 的２０个 １０ ｂｐ的寡核苷酸随机引物，对每个个体的基因组 ＤＮＡ进行扩增，结果为：１７ 个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物，扩增片段的分子量在 ２ ０００～２００ ｂｐ之间， 共检测 １０６个位点，其中多态位点数为 ３９个，占 ３６． ８ ％；平均遗传距离为 ０． ０９４１＋ ０． ０２０ ６，有 ６７个标记（占 ６３． ２％）在整个群体的 ３２个个体间表现稳定的一致性。
- 刘萍孔杰石拓庄志猛邓景耀徐怀恕韩玲玲
- 关键词：中国对虾种群RAPD技术
