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人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定: 2001年; 为了获得有免疫原性的人脂皮素 -1 ( lipocortin-1 ,LC-1 )蛋白 ,以便疫动物获得抗体 ,建立了免疫分析方法 ,而且更深入地探讨 LC-1抗炎机制及其在临床上的应用。采用基因工程的方法进行重组人 LC-1的原核表达并鉴定 ,主要结果如下 :( 1 )从 U93 7细胞中提取总 RNA,以此为模板行反转录 PCR,成功地扩增了 1 0 38bp的人 LC-1 c DNA基因 ,并将此基因全长克隆入 p UC1 8载体 ,经测序分析证实克隆序列与文献报道的序列基本一致 ;( 2 )成功地构建了原核表达质粒 p BV2 2 0 / LC-1 ,并在大肠杆菌中实现表达。经 SDS-PAGE电泳和 West-ern免疫印迹分析 ,证实重组菌产生 37k D的表达产物 ,且此蛋白可与 LC-1抗体特异结合。实现了人 LC-1基因的克隆及原核表达 ,获得了有免疫学活性的 LC-1 ,为; 靳雁斌李英丽石丽萍颜光涛; 关键词：反转录聚合酶链反应原核表达聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹分析

白介素1β及其受体拮抗蛋白在肠缺血/再灌注诱导肺损伤中的作用和机理: 2001年; 目的:探讨肠缺血-再灌注(I/R)损伤时肺损伤的机理及白介素1β(IL-β)及其受体拮抗蛋白的作用。方法:采用大鼠肠系膜上动脉夹闭造成I/R损伤模型。利用放射免疫分析测定损伤前后和各处理组血液、肺组织灌注液中IL-1β和IL-1ra水平。同时采用RT-PCR法测定肺组织中IL-1β和IL-1ra的mRNA的表达含量。经光镜和电镜观察肺局部白细胞浸润及组织损伤情况。结果:I/R损伤后6小时血液中IL-1β和IL-1ra有所增加,即表现为损伤组IL-1β比对照组明显增加,而IL-1ra不明显;但IL-1ra的损伤组和对照组二者均在损伤后6小时比伤前自身对照组明显增加。肺组织灌洗液中损伤组IL-1β明显增多,而IL-1ra不明显。肺组织中IL-1β的mRNA在损伤后表达明显增加,而IL-1ra表达没有明显变化。经非特异性磷脂酶A_2(PLA_2)阻断剂(氯喹和三氟拉嗪),血小板活化因子受体阻断剂SR27417A,环氧化酶抑制剂消炎痛以及抗氧化剂愈创木酸等处理后,血清、肺灌注液和肺组织中上述指标有不同程度的改变。肺内白细胞的聚集和浸润明显减少。结论:IL-1β和IL-1ra可能参与肠I/R介导急性肺损伤,并且同局部PLA_2活化有一定关系。; 颜光涛郝秀华薛辉王录焕李英丽石丽萍张凯; 关键词：白介素1Β 肺损伤肠缺血再灌注

不同方法制备脂质体^(125)I-IL-8包封率的比较被引量：9: 2001年; 本文用四种不同的方法制备脂质体 ,同时包裹12 5I -IL - 8。对不同方法制备的脂质体包裹12 5I -IL - 8的包封率进行对比。结果表明 :机械分散法、钙融合法、反相蒸发法制备的脂质体对12 5I -IL - 8的包封率依次增大。而用反相蒸发法和钙融合法联合制备的脂质体对12 5I -IL -; 石丽萍王录焕李英丽颜光涛; 关键词：脂质体包封率

酸敏脂质体的制备及其性质的研究: 由脂质双分子组成，内部为水相的闭合囊泡称为脂质体。它的结构类似生物膜，在水中平衡后具有亲水性和疏水性两性性质，在脂质体的水相和膜相内可以包裹多种物质。目前，脂质体已广泛应用于细胞生物学，免疫学，基因工程等领域。随着对疾病...; 石丽萍; 关键词：理化性质包封率细胞生物活性体外细胞毒性; 文献传递

白介素-1β及其受体拮抗蛋白在肠缺血-再灌注所致急性肺损伤中的作用研究被引量：12: 2001年; 目的 :探讨肠缺血再灌注 ( I/R)损伤时肺损伤的机制和白介素 1β及其受体拮抗蛋白 ( IL 1ra)的作用。方法 :用大鼠肠系膜上动脉夹闭造成 I/R损伤模型 ,利用放射免疫分析法测定损伤前后和各处理组血液、肺组织灌洗液中 IL 1β和 IL 1ra水平。同时采用逆转录聚合酶链反应 ( RT PCR)法测定肺组织中 IL 1β和IL 1ra m RNA的表达含量。经光镜和电镜观察肺局部白细胞浸润及组织损伤情况。结果 :I/R损伤后 6小时血液中 IL 1β和 IL 1ra有所增加 ,损伤组 IL 1β比对照组明显增加 ,而 IL 1ra不明显 ;但损伤组和对照组IL 1ra伤后 6小时比伤前自身对照组均明显增加。损伤组肺灌洗液中 IL 1β明显增多 ,而 IL 1ra不明显。肺组织中 IL 1β的 m RNA在损伤后表达明显增加 ,而 IL 1ra表达没有明显变化。经非特异性磷脂酶 A2( PLA2 )阻断剂 (氯喹和三氟拉嗪 )、血小板活化因子受体阻断剂 SR2 7417A、环氧化酶抑制剂消炎痛以及抗氧化剂愈创木酸等处理后 ,血清、肺灌洗液和肺组织中上述指标有不同程度的改变。肺内白细胞的聚集和浸润明显减少。结论 :IL 1β和 IL 1ra可能参与肠 I/R介导的急性肺损伤 ,并且和局部 PLA2; 颜光涛郝秀华薛辉王录焕李英丽石丽萍张凯; 关键词：白介素-1Β 肺损伤缺血-再灌注损伤

肠缺血/再灌注损伤后白介素1-β水平与磷脂酶A_2激活的关系被引量：12: 2002年; 为了探讨肠缺血 /再灌注损伤后IL 1β基因表达和蛋白含量变化与磷脂酶A2 抑制之间的关系 ,采用大鼠肠缺血 /再灌注损伤模型 ,在对照组、损伤组和磷脂酶A2 抑制剂处理组动物中收集血清、肺灌洗液、腹腔灌洗液及全身重要脏器组织样品 ,采用放射免疫法测定IL 1β含量 ,并用RT PCR法测定肺组织中IL 1β和Ⅱ型PLA2 基因表达。结果表明 ,损伤后 6h血清中IL 1β含量明显高于对照组 ;损伤后 1和 3h ,腹腔液中IL 1β也明显高于对照组 ;损伤后肝组织中IL 1β水平有明显增加 ,而肺、肾、肠组织中IL 1β没有明显变化。损伤后肺灌洗液中IL 1β也明显高于对照组水平 ,肺组织中IL 1βmRNA表达增加 ,而Ⅱ型PLA2 mRNA在损伤后表达反而有所下降。采用磷脂酶A2 抑制剂氯喹、环氧化物酶抑制剂消炎痛、血小板活化因子受体阻断剂SR2 74 17后 ,IL 1β蛋白和基因表达有不同的改变。提示肠缺血 /再灌注损伤后一定时间内 ,肝内IL 1βmRNA表达和血中IL 1β水平明显增高 ,但是否与磷脂酶A2; 颜光涛郝秀华薛辉王录焕李英丽石丽萍; 关键词：肠缺血再灌注损伤白细胞介素-1Β 磷脂酶A2

酸敏脂质体的制备及其生物学活性被引量：3: 2003年; 目的　对不同方法制备酸敏脂质体进行包封率测定及形态学观察 ,探讨酸敏脂质体包裹反义寡核苷酸的生物学效应。方法　测定四种不同方法制备包裹1 2 5I IL 8脂质体的包封率 ;在超高倍显微分析仪下观察形态结构。用包裹细胞磷脂酶A2 (cPLA2 )反义寡核苷酸的酸敏脂质体转染U937细胞 ,提取细胞RNA ,采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR) ;免疫印迹 (Westernblot)法检测cPLA2 蛋白的表达。结果　反相蒸发法与钙融合法联合制备的酸敏脂质体具有良好地包封率和形态结构 ,经酸敏脂质体包裹cPLA2 反义寡脱氧核苷酸可明显抑制cPLA2基因及蛋白的表达。; 石丽萍颜光涛张凯李英丽; 关键词：生物学活性反义寡核苷酸基因表达反转录-聚合酶链反应

免疫脂质体与临床被引量：4: 2002年; 石丽萍颜光涛; 关键词：免疫脂质体药物载体

特异性白介素1受体拮抗蛋白放射免疫分析的建立及初步应用: 2001年; 用人工重组的白介素 1受体拮抗蛋白 (I 1ra)免疫新西兰兔 ,获取高效价特异的IL 1ra抗体。用氯氨T氧化法制备12 5I标记IL 1ra ,经SephadexG 2 5纯化 ,竞争性抗原抗体反应采用非平衡法 ,标准品和待测样品同抗体反应 37℃ 6小时后加入12 5I 标记抗原继续反应 4℃ 2 4小时。经PR试剂分离结合和分离的标记抗原。该法标准曲线范围 3～ 96ng ml,最低检出量为 ( 9 0± 1 4ng ml,n =89) ,类风湿因子阳性的病人血清含量为 ( 39 0 6± 15 2 3ng ml,n =14)。肠缺血再灌损伤后 6小时大鼠血清中IL 1ra较伤前自身对照明显增加 (P <0 0 0 1,n =82 )。肺灌洗液中损伤前后没有明显差异。该法特异、灵敏、简便 ,可用于人血清和大鼠血清及肺灌注液中IL; 颜光涛郝秀华薛辉王录焕李英丽石丽萍张凯; 关键词：放射免疫分析类风湿性关节炎缺血再灌注损伤

人脂皮素-1cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达: 2001年; 脂皮素 1 (LC 1 )是钙依赖性的膜磷脂结合蛋白 ,介导糖皮质激素的抗炎作用。本研究采用RT PCR法获取人LC 1cDNA ,以pUC1 8为克隆载体、pBV2 2 0为表达载体 ,在DH5α菌成功表达了LC 1 。; 靳雁斌颜光涛李英丽薛辉石丽萍辛宏郝秀华王录焕; 关键词：克隆原核表达免疫印迹分析炎症抗炎作用

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石丽萍

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