白银山
- 作品数：36 被引量：41H指数：4
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- 猪精原干细胞超微结构观察与体外冻存条件的优化研究被引量：1
- 2014年
- 【目的】检测猪精原干细胞(PSSCs)在分化过程中其内部超微结构及细胞器的变化情况,并且找到适宜PSSCs的冷冻保存条件,为长期保存PSSCs和研究PSSCs的分化机制提供科学依据.【方法】采用两步酶消化法和Percoll不连续密度梯度法获取PSSCs,利用透射电子显微镜(TEM)对PSSCs在体外不同培养时间的超微结构变化进行观测,并且利用台盼蓝染色法和碱性磷酸酶(AP)染色法比较不同浓度的甘油和二甲基亚砜(DMSO)保存液对PSSCs冻存效果的影响.【结果和结论】未分化的PSSCs细胞膜完整平滑,细胞器正常,胞质均匀,无伪足出现,细胞核清晰.而开始分化的PSSCs出现伪足,线粒体数量大幅增加.冻存7 d后,解冻结果表明,PSSCs以V(DMSO)∶V(DMEM/F12)∶V(FBS)∶V(100×双抗)=10∶69∶20∶1为宜.
- 师如意张秀娟白银山卫恒习李莉张守全
- 关键词：超微结构冻存
- 小鼠精原干细胞分离培养条件的优化被引量：3
- 2012年
- 采用两步酶消化法获得5～7日龄昆明小鼠睾丸组织的单细胞悬液,比较差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度法对精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的纯化效果,并利用MTT法检测不同生长因子及添加浓度对SSCs体外增殖的影响.结果表明5日龄小鼠和7日龄小鼠的睾丸细胞总数存在较大差异(P<0.05),但SSCs数目无显著差异(P>0.05);与Percoll不连续密度梯度法相比,差速贴壁法获得了较高的SSCs数量和纯化率,其纯化率平均85.06%;MTT法检测结果表明LIF因子的添加对SSCs的增殖具有促进作用,20 ng/mL GDNF+20 ng/mLbFGF+103 U/mL LIF的组合添加是昆明小鼠SSCs的体外培养增殖的最佳组合.
- 张秀娟李莉卫恒习白银山师如意张守全
- 关键词：昆明小鼠精原干细胞体外培养MTT法
- 水通道蛋白在调节肠道健康中的作用被引量：5
- 2016年
- 水通道蛋白是一类可以高效选择性转运水分子的细胞膜通道蛋白,广泛分布于人和哺乳动物的胃肠道组织中,在机体液体转运和消化生理中发挥重要作用。本文总结了水通道蛋白的结构、分类及其在人、鼠类和仔猪胃肠道系统的表达和分布情况,并阐述了水通道蛋白与腹泻、肠上皮细胞迁移与修复、肠道屏障功能和肠道炎症相关疾病等过程的关系及其作用。
- 朱翠白银山陈庄蒋宗勇
- 关键词：水通道蛋白肠道健康腹泻仔猪
- 猪精原干细胞长期培养与转基因
- 精原干细胞(Spermatogonial stem cells，SSCs)是雄性动物体内唯一可将遗传信息传递给子代的干细胞。它具有多潜能性，可以通过直接诱导获得多功能干细胞(Induced pluripotent ste...
- 白银山
- 关键词：转基因猪
- 左旋肉碱对猪卵母细胞体外成熟、脂肪代谢和孤雌胚胎发育的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】探讨不同质量浓度的左旋肉碱对猪卵母细胞体外成熟、脂肪代谢和孤雌胚胎发育的影响.【方法】在成熟培养液中添加不同质量浓度左旋肉碱,观察其对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响,并利用油红染色、三酰甘油定量试剂盒和定量RT-PCR技术检测其对卵母细胞脂肪代谢及其关键水解酶表达水平的影响.【结果和结论】在成熟液中添加100 ng/mL左旋肉碱能极显著促进猪卵母细胞的脂肪滴代谢(P<0.001),并显著提高猪卵母细胞体外成熟率和孤雌激活囊胚发育率(P<0.05);在胚胎培养液中添加100 ng/mL左旋肉碱能够显著提高猪孤雌胚胎卵裂率(P<0.05),其囊胚率和囊胚质量均有提高的趋势;通过定量RT-PCR进一步发现100 ng/mL左旋肉碱极显著降低猪卵母细胞中激素敏感脂肪酶基因(HSL,P<0.01)和三酰甘油水解酶基因(ATGL,P<0.001)的mRNA表达水平,表明左旋肉碱能够影响调控脂肪代谢关键酶基因的表达.试验结果表明,左旋肉碱具有促进猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚胎发育能力的作用,其可能是通过调控脂肪代谢来实现的.
- 冯美莹李桂焕徐振鹏白银山王文聪李莉张守全卫恒习
- 关键词：猪卵母细胞左旋肉碱孤雌激活脂肪代谢胚胎发育
- 猪IGF2R基因多态性及其遗传印记被引量：1
- 2010年
- 【目的】在猪IGF2R基因的外显子内寻找SNP,以SNP为遗传标记研究IGF2R基因的印记表达特征。【方法】选取3个品种243头瘦肉型商品猪为试验材料,以IGF2R基因为候选基因,通过PCR-SSCP对IGF2R基因多态性进行检测;选取IGF2R基因外显子48的SNP杂合子仔猪3头和成年猪1头,对脑、心脏、肝脏、脾、肾、肺、胃、胰、胸腺、膀胱、肌肉、舌、胎盘的组织器官mRNA产物分别进行RT-PCR-RFLP电泳和RT-PCR-SSCP电泳。【结果】IGF2R基因外显子48中有一个单核苷酸多态性位点,384位碱基由G突变为A,该位点为NspⅠ酶切位点;IGF2R的外显子48在3头仔猪和1头成年猪的主要组织器官仅表达母亲来源的等位基因。【结论】猪IGF2R基因呈母方表达、父方印记的遗传特征。
- 李莉陈预明白银山吴同山张守全
- 关键词：遗传印记
- 猪精原干细胞体外培养条件的优化被引量：6
- 2013年
- 以出生后1～5 d的长白公猪为主要研究对象,采用两步酶消化法获取睾丸细胞悬液,用Percoll不连续密度梯度法对猪精原干细胞(PSSCs)进行纯化,以碱性磷酸酶(AP)染色鉴定;利用MTT法检测2种细胞因子——胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和白血病抑制因子(LIF)对PSSCs发育的影响.结果表明:用Percoll不连续密度梯度法获得的PSSCs占睾丸总细胞数的(8.19±0.83)%,AP染色的阳性率为(87.47±2.90)%,表明该方法可有效获取PSSCs;MTT法检测表明,20 ng.mL-1 GDNF+1 000 U.mL-1 LIF的组合添加对PSSCs体外增殖的效果最好.
- 师如意卫恒习李莉白银山张秀娟吴珍芳张守全
- 关键词：精原干细胞体外培养
- 猪精原干细胞的获取极其多能性的研究
- 干细胞生物学的研究一直是生命科学领域的热点问题。近年的研究表明,精原干细胞(Spermatogonial Stem Cells,SSCs)具有多能干细胞的性质。本研究以出生后1-5d的雄性长白仔猪为主要研究对象,成功地获...
- 师如意李莉张景峰白银山张守全
- 关键词：精原干细胞诱导分化
- 文献传递
- 一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法
- 本发明公开了一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法，包括步骤：取长白小公猪的骨髓细胞，培养液培养20‑28h后更换新鲜培养液，继续培养，传代至获得细胞形态均一的F3代的长白仔猪bMSCs；利用携带LargeT慢病毒...
- 张守全白银山冯美莹卫恒习李莉
- 文献传递
- 鸡精液稀释与低温保存效果分析被引量：16
- 2010年
- 随着现代养禽业的快速发展，鸡人工授精技术得到了非常广泛的应用。而鸡精液的稀释与保存是人工授精技术发展的重要环节，它的发展与突破能促进人工授精技术发挥更好的作朋。精液稀释后，使精液量增加，从而提高了种公鸡的利用率，减少种公鸡的饲养数量，降低饲养成本。
- 胡艳娟白银山李莉陈金丽梁国雄陈峰张守全
- 关键词：精液稀释鸡精液人工授精技术饲养数量饲养成本种公鸡
