田伟
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目甘肃省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 牦牛乳酪蛋白降血压肽对高血压大鼠体内降压效果研究被引量：3
- 2014年
- 目的:观察牦牛乳酪蛋白降血压肽对应激性高血压大鼠(stress induced hypertensive rats,SIHR)和正常Wistar大鼠的降压效果,并与降压药物厄贝沙坦(irbesaran)和卡托普利(Captopril)的作用效果进行比较。方法:采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶水解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽,分别以20 mg/kg、40 mg/kg和60 mg/kg剂量的牦牛乳酪蛋白降血压肽一次灌胃,每隔2 h测量SIHR收缩压(SBP),连续测量8 h;长期实验持续6周,每天60 mg/kg一次灌胃,每隔1周测量SBP一次。结果:SIHR给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后,血压均显著下降(P<0.05),并均在灌胃后3-6 h达最低,血压下降最大幅度为(27±5.13)mmHg,呈现一定的量效关系;而正常大鼠给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后血压无显著变化,服用厄贝沙坦和卡托普利后血压则保持显著下降的趋势。长期灌胃牦牛乳酪蛋白降血压肽可使SIHR血压明显下降(P<0.05),并且降压效果稳定。结论:牛乳酪蛋白降血压肽对SIHR有明显的体内降压效果,长期服用可稳定血压,对正常大鼠血压无明显影响。
- 冯玉萍李倬张福梅陈诚田伟靳冬武龙仕和崔梦楠暴艳敏
- 关键词：牦牛乳应激性高血压大鼠降血压肽血管紧张素转化酶
- 水解乳蛋白的制备及在细胞培养中的初步应用被引量：4
- 2014年
- 采用正交法优化复合酶(胰酶和中性蛋白酶)水解凝乳酶干酪素制备水解乳蛋白(lacto-protein hydrolysate,LPH)的制备工艺,通过BHK和Vero细胞的培养效果检测水解乳蛋白的促细胞生长作用。结果显示水解乳蛋白的最佳制备工艺为:胰酶∶中性蛋白酶=2∶1(质量比),40℃,pH 7.0,酶/底物(E/S)=1∶5(质量比)水解6 h。所得产物氨基氮含量3.21 g/L,多肽含量35.63 g/L,游离氨基酸含量14.17 mg/mL,收率达40.20%。BHK和Vero细胞培养24 h,细胞密度均为各自空白的2.0倍,分别为Hyclone产品的1.0倍和0.86倍;培养48h,分别为各自空白的5.0倍和4.0倍,均为Hyclone产品的0.88倍。因此,该工艺简单,耗时短,制备得水解乳蛋白对BHK和Vero细胞生长有明显的促进作用。
- 田伟冯玉萍李明生崔梦楠靳冬武龙仕和马忠仁
- 关键词：细胞培养
- 微载体在组织工程中的应用被引量：2
- 2012年
- 微载体是跨越组织工程诸多学科的一个通用工具,它可以作为大量扩增种子细胞的良好载体,也可以作为组织工程中细胞转运传递的支架.微载体培养技术作为一种新兴的大规模细胞培养技术,在组织工程学中主要应用于种子细胞的扩增培养.目前,利用微载体进行组织工程细胞的大规模培养受到生物、医学科研人员的青睐.
- 田伟冯玉萍李明生
- 关键词：微载体
- 人血白蛋白的原核表达及应用被引量：2
- 2013年
- 旨在构建人血白蛋白(HSA)基因的原核表达载体pGEX-4T-1-rHSA,诱导表达后纯化重组HSA蛋白,制备多克隆抗体并对其进行鉴定。根据GenBank发表的HSA(NM_000477.5)的核苷酸序列设计合成1对特异性引物,以人胚肺二倍体细胞的总RNA为模板,利用RT-PCR扩增HSA基因,将其克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-1-rHSA,经PCR、酶切及测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达,表达产物经变性、复性、亲和层析纯化后作为免疫原制备多克隆抗体,应用间接ELISA和Western-blot方法对所得抗体进行检测。结果表明,重组蛋白主要以包涵体的形式存在,分子质量为92 kD;重组蛋白具有良好的反应原性和免疫原性;应用其制备的抗血清效价达到1∶100 000;纯化的多克隆抗体与血源人血清白蛋白和重组人血白蛋白均能产生特异性结合,具有良好的生物学活性。
- 李向茸冯若飞谢晶莹田伟杨妍梅王丹马忠仁
- 关键词：人血清白蛋白原核表达包涵体多克隆抗体
- 酶解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽的初步研究被引量：3
- 2013年
- 目的:牦牛乳富含酪蛋白,其经酶解制备的降血压肽以安全性高、无副作用等优点已成为乳品开发和高血压防治药物研究的新热点.方法:本实验对从牦牛乳中提取的酪蛋白,依据复合蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及胰蛋白酶各自的最适pH及温度采用酶解方法制备降血压肽,并且以ACE抑制活性为指标初步筛选最佳水解酶.结果:五种酶ACE抑制肽抑制率分别为:复合蛋白酶为39.02%,中性蛋白酶为67.48%,碱性蛋白酶为56.10%,木瓜蛋白酶为71.54%,胰蛋白酶为8.94%.结论:说明,在最适pH及温度条件下,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为制备降血压肽的最佳酶选,这为后续进一步的制备降血压肽实验提供依据.
- 李倬李明生田伟张福梅李云龙靳冬武马忠仁冯玉萍
- 关键词：牦牛乳酪蛋白ACE降血压肽
- 磁性微球在细胞与生物大分子分离纯化中的应用被引量：3
- 2014年
- 细胞和各种生物大分子如核酸、蛋白质等的分离和纯化已逐渐成为生命科学领域内必不可少的技术手段。分离纯化技术的发展对促进整个生物学的发展具有举足轻重的作用。磁性微球分离技术是基于固相磁性材料分离特性,综合生物分子、细胞等因素而发展出的一种新型分离技术。该技术能够简便、快速、柔和、高纯度地分离所需物质。近年来,磁性微球已逐步应用于生物医学、细胞学和生物工程等领域。论文主要回顾了国内外近5年的文献,介绍了磁性微球的结构、特性和分离原理,并详细论述了磁性微球在细胞分离和分类、蛋白质提纯、酶固定化、核酸分离以及免疫分析与检测等领域的应用现状,最后总结并展望了磁分离技术在生物分离纯化和检测中的应用前景。
- 崔梦楠田伟马素娟李明生马忠仁冯玉萍
- 关键词：磁性微球磁分离技术
- 酶解牦牛乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究
- 2013年
- 目的:乳清蛋白是牦牛乳中的重要成分,其经酶解制备的乳源性ACE抑制肽以安全性高和无副作用等优点在高血压的防治中具有重要的研究和应用价值.本实验研究利用乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺技术.方法:本实验对从牦牛乳中提取的乳清蛋白,分别根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶各自的最适pH及温度,采用酶解法制备ACE抑制肽,以ACE抑制活性为指标初步筛选出最佳水解酶,并探究最佳酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳反应条件.结果:碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶,其最佳反应条件为:pH8.5、温度60℃、E/S为5.5%、水解6 h.制备的ACE抑制肽抑制率可达到85.2%.结论:碱性蛋白酶为最佳酶选,用碱性蛋白酶制备的ACE抑制肽体外抑制率较高,符合工业生产要求.这为进一步优化乳清蛋白降血压肽的制备工艺提供依据.
- 冯玉萍李倬曾鸿运田伟靳冬武龙仕和崔梦楠暴艳敏马桂兰
- 关键词：牦牛乳乳清蛋白ACEACE抑制肽
- 瑞士乳杆菌发酵制备牦牛乳酪蛋白源性降血压肽的工艺研究被引量：1
- 2013年
- 目的:以牦牛乳源酪蛋白为原料,利用瑞士乳杆菌,对发酵法制备降血压肽的工艺进行初步探讨.方法:试验首先采用凝乳酶沉淀法从牦牛乳中提取酪蛋白,依据瑞士乳杆菌的发酵特点,按5%(体积比)接菌量进行发酵制备降血压肽.然后并以降血压肽对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制率为指标,主要探讨了底物浓度、pH值、发酵时间三因素对瑞士乳杆菌发酵法制备降血压肽工艺的影响.结果:在接菌量为5%,其他三因素各设置五个水平进行工艺优化,最优工艺条件为:底物浓度4%、发酵pH值8.0、发酵时间16 h.此工艺条件下ACE抑制率可达约68%.结论:通过实验说明底物浓度、pH值、发酵时间等参数的控制对发酵酪蛋白制备抑制肽很重要,此试验数据为后续进一步完善制备降血压肽的实验奠定了重要的基础.
- 张福梅李倬刘乐乐田伟靳冬武李明生央珂韩玉梅
- 关键词：瑞士乳杆菌降血压肽ACE抑制肽
- 胰酶水解凝乳酶干酪素工艺优化
- 2013年
- 以天然牧区凝乳酶干酪素为原料,用甲醛滴定法测定水解度,采用单因素试验和正交试验法优化牛源胰酶水解酪蛋白的工艺条件.结果显示,最优工艺条件为:40℃,pH=7.0,E/S=1∶5(重量比)水解4 h.产物水解度可达21.19%,收率达58.27%.
- 田伟冯玉萍李明生马忠仁靳冬武崔梦楠龙仕和
- 关键词：胰酶水解酪蛋白正交法
