王雄文
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：暨南大学第四附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 硫代反义脱氧寡核苷酸对脑胶质瘤SWO-38细胞的作用
- 2002年
- 目的 研究α1,4半乳糖糖基转移酶 (α1,4GalT)基因硫代反义核酸对脑胶质瘤细胞系SWO -3 8细胞的增值与凋亡的影响及其与Bcl -2和Bax表达的关系。方法 采用脂质体介导的基因转染方法将人工合成α1,4GalT基因反义核酸转入SWO -3 8细胞中。应用RT -PCR检测对α1,4GalTmRNA表达的影响 ,应用克隆形成实验检测对细胞增殖的作用 ,应用流式细胞术 (FCM)和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的发生 ,应用FCM检测Bax和Bcl -2表达的变化。结果 反义核酸转染后 ,经RT -PCR检测证实α1,4GalTmRNA基因的表达下降 ;克隆形成试验显示细胞生长明显受到抑制 (P <0 .0 1) ;FCM检测表明 ,导入α1,4GalT基因反义核酸的SWO -3 8细胞的凋亡明显增加 (P <0 .0 1) ,Bcl -2蛋白表达显著下降 (P <0 .0 1) ,而Bax蛋白表达显著提高 (P <0 .0 1)。结论 α1,4GalT基因硫代反义核酸可诱导脑胶质瘤细胞系SWO -3 8细胞凋亡 。
- 郑刚张积仁刘发全王雄文张新宇
- 关键词：脑胶质瘤BCL-2基因BAX基因基因转染
- 糖基转移酶反义核酸对人脑胶质瘤细胞SWO-38作用的分子机理
- 2002年
- 背景与目的:红细胞系列的鞘糖脂与很多人类肿瘤的生物学活性相关。α1,4半乳糖糖基转移(α1,4-galactosyltransferase,α1,4Gal-T)是红细胞系列鞘糖脂合成的特异的糖基转移酶。本实验目的是研究α1,4Ga反义寡核苷酸对脑胶质瘤细胞系SWO-38的作用及其分子机理。方法:人工合成α1,4Gal-T基因的反义寡核苷酸采用脂质体介导的基因转染方法将α1,4Gal-T基因反义核酸转入SWO-38细胞中。应用RT-PCR检测其对α4Gal-TmRNA表达的影响,应用克隆形成实验检测其对细胞增殖的作用,应用流式细胞术(FCM)和琼脂糖凝胶电检测细胞凋亡的发生,应用FCM检测细胞fas、p53、bax和bcl-2表达的变化。结果:细胞转染反义核酸后,经RT-P检测证实其α1,4Gal-TmRNA基因的表达下降;克隆形成实验显示细胞生长明显受到抑制(P<0.01);DNA电泳像呈凋亡表现;FCM检测表明,导入α1,4Gal-T基因反义核酸的SWO-38细胞凋亡明显增加(P<0.05),bcl-2蛋表达显著下降(P<0.01),而fas和bax蛋白表达显著提高(P<0.01),p53蛋白表达无显著变化。结论:α1,4Ga基因硫代反义核酸可诱导脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞凋亡,其机理与fas、bcl-2和bax基因调控及其相互作用关。
- 郑刚张积仁刘发全王雄文张新宇
- 关键词：糖基转移酶分子机理脑胶质瘤反义核酸
- 获得性他莫昔芬耐受MCF-7细胞膜受体的变化及格列卫的逆转作用
- 2003年
- 目的 :探讨耐受他莫昔芬 (TAM)的MCF 7细胞膜受体等的变化及格列卫对耐药的逆转作用。方法 :MTT法检测TAM对E2 、EGF、Insulin刺激的MCF 7增殖的抑制作用 ;流式细胞术检测与10 - 7mol/LTAM孵育 8周、16周后的MCF 7细胞ER、PR、EGFR及VEGF的变化 ,MTT法检测格列卫对耐药的逆转作用。结果 :TAM抑制E2 、EGF、Insulin刺激的MCF 7增殖 ;耐受TAM的MCF 7ER、PR表达率由父代的 93%、91%下降为 4 1%、36 % ,EGFR由 10 %上升为 39% ,VEGF由 36 %下降至 30 % ,对EGF刺激的增殖更敏感 ,格列卫可增强TAM的生长抑制作用。结论 :耐受TAM的MCF 7细胞ER、PR表达下降 ,EGFR表达升高 ,EGF/EGFR刺激的细胞增殖作用增强 ,格列卫可能作为对TAM获得性耐药后逆转用药方案或贯序用药方案。
- 王雄文张积仁沈雁钟灿灿郑刚
- 关键词：他莫昔芬格列卫受体表皮细胞生长因子
- 脂质体介导a1,4-GalT反义寡核苷酸对人脑胶质瘤细胞系SWO-38的作用被引量：3
- 2002年
- 目的研究α1,4半乳糖糖基转移酶(α1,4GalT)基因反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASO)对脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞的增值与凋亡的影响和与Fas表达的关系。方法采用脂质体介导的基因转染方法将α1,4GalT基因ASO转入SWO-38细胞中。应用RT-PCR检测对α1,4GalTmRNA表达的影响,克隆形成试验检测对细胞增值的作用,流式细胞术(FCM)和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的发生,FACS检测凋亡相关蛋白Fas表达的变化。结果脂质体介导的ASO转染后,经RT-PCR检测证实α1,4GalTmRNA基因的表达下降;克隆形成试验显示细胞生长明显受到抑制(P<0.01);DNA电泳图像呈凋亡表现;FCM检测表明,导入α1,4GalT基因ASO的SWO-38细胞的凋亡明显增加(P<0.01);Fas蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论α1,4GalT基因ASO可诱导脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞凋亡发生,其机制可能与fas基因调控有关。
- 郑刚张积仁刘发全饶智国王雄文张新宇
- 关键词：脑胶质瘤ASOFAS基因
- 格列卫增加获得性他莫昔芬耐受MCF-7细胞对阿霉素的敏感性被引量：1
- 2003年
- 目的探讨获得性他莫昔芬(TAM)耐受MCF-7细胞bax、bcl-2、p170表达的变化及其对阿霉素(ADR)敏感性的影响。方法流式细胞术检测MCF-7及经1×10-7 mol/L TAM持续作用8、16周的MCF-7细胞bax、bcl-2、p170的表达变化;三磷酸腺苷发光法检测TAM处理后的MCF-7对ADR药敏的变化及格列卫(Glivec)对ADR药敏的影响;流式细胞术检测细胞内ADR的固有荧光强度。结果获得性TAM耐受MCF-7细胞p170表达阳性率由父代的(27.43±2.16)%上升到(32.13±1.31)%(P<0.05),bcl-2由父代的(41.53±2.17)%下降到(37.87±1.86)%(P>0.05),bax则由父代的(53.17±1.45)%下降到(28.70±1.41)%(P<0.01)。同时,10 μg/ml格列卫可使耐受TAM的MCF-7细胞内ADR荧光强度增加(P<0.05)。结论获得性耐受TAM的MCF-7细胞对ADR敏感性降低的原因之一可能是由于bax表达明显降低及p170表达增高,合用格列卫可增强耐受TAM的MCF-7对ADR的细胞毒性作用。
- 王雄文张积仁沈雁郑刚钟灿灿
- 关键词：格列卫他莫昔芬阿霉素敏感性
